一種新的兔髖關節腔注射給藥方法介紹*

張 鑫 李志剛 申意偉 徐西林 劉 釗 張曉峰

(1.黑龍江中醫藥大學研究生院，哈爾濱 150000)(2. 黑龍江中醫藥大學附屬第二醫院，哈爾濱 150001)(3.黑龍江省中醫藥管理局，哈爾濱 150000)

兔為股骨頭壞死常用的實驗動物模型，兔股骨頭壞死模型建立后，在驗證相關注射藥物藥效時如何將藥物注射至股骨頭附近是實驗時遇到較為棘手的問題。目前在動物實驗層面，關節腔注射療法在研究膝關節疾病時使用較多，而采用髖關節腔注射給藥的研究較少[1]。在臨床治療中，對患者進行髖關節注射時多采用仰臥位[2]。然而，兔不是直立行走動物，較難在仰臥位進行髖關節注射，且未有文獻對兔髖關節腔的注射方法進行論述。因此，需找到一種新的兔髖關節腔注射方法來幫助相關動物實驗的順利開展。在既往兔股骨頭壞死造模及藥物治療的相關動物實驗基礎之上，根據兔的解剖學特征，介紹一種從背側入路對兔進行髖關節腔注射的方法操作簡單，可靠性高，便于實行，故將該方法總結后進行詳細闡述。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1實驗動物:新西蘭兔1只，6月齡，體質量約為3.0 kg，購自北京富龍騰飛實驗動物研究院有限公司，實驗動物生產許可證號：SCXK(京)2018-0009，飼養于河北以嶺醫藥研究院有限公司實驗室，實驗動物使用許可證號：SYXK(冀)2020-003。飼養期間自由飲水，飼喂兔維持飼料購自北京科澳協力飼料有限公司，京飼證(2018)06073。飼養環境：單籠飼養，相對濕度為(50±5)%，12 h/12 h明暗交替和溫度(22±2)℃。所有操作均經過河北以嶺醫藥研究院實驗動物實驗倫理學要求，審批號：N2021021。

1.1.2儀器、試劑與材料:小動物麻醉機基礎型R500IE和異氟烷(深圳市瑞沃德生命科技有限公司)，電推剪(CP-7800，CODOS)，0.5% 伊文思藍染色液(Evan blue，DK0001，北京索萊寶科技有限公司)，碘伏、棉球、1 mL無菌注射器、直尺、記號筆等。

1.2 方法

①備皮：用電推剪剔除兔臀部毛發，充分暴漏兔臀部皮膚，便于定位和消毒(圖1)。

圖1 備皮

②麻醉：通過小動物麻醉機，使用異氟烷麻醉動物。

③定位：麻醉后兔俯臥位放置于無菌單上，呼吸面罩持續吸入異氟烷維持麻醉，操作者立于兔的右側。定位之前，需將兔擺放至髖關節注射時體位，以確保定位的準確性，避免定位與注射時因體位不同而導致體表定位不準確。

體位擺放如下：將兔注射側髖膝關節各屈曲90°(圖2)，并使其髖關節內收，雙側膝關節相互靠攏，以增加股骨頭與髖臼之間的間隙，有利于注射時順利穿刺至髖關節腔。第一步，左手拇指置于兔臀部觸摸大轉子，以大轉子后上部為第一定位點并標記(圖3)。第二步，觸摸兔脊正中線并標記一直線，作為第二標記線。第三步，用直尺經第一標記點做脊正中線之垂線，將大轉子與脊正中線之垂線所構成的線段分為7等份，選取距大轉子內三份為進針點，亦可在大轉子向脊正中線方向距大轉子1.5 cm處左右做標記，即為進針點(圖6)。

圖3 定位大轉子后上部

圖4 右側注射體位

圖5 左側注射體位

圖6 測量

④消毒：碘伏棉球消毒進針點及周圍皮膚(圖7)。

圖7 消毒

⑤給藥：右側髖關節注射時，右側屈髖屈膝90°，左手持兔左側股骨，左手拇指置于大轉子后上部，小指置于股骨外側，其余三指置于股骨內側，夾持股骨向外稍用力(圖3～4)，擴大股骨頭與髖臼之間的間隙，左手拇指觸摸到大轉子固定于大轉子后上部，根據大轉子后上部的位置確定進針點。

左側髖關節注射時，左手的放置方法稍有不同，但都應以固定兔股骨穩定為原則，左側屈髖屈膝90°，左手持兔左側股骨，左手拇指置于大轉子后上部，其余四指握持左側股骨并將兔與操作者腹壁緊貼以保持穩定(圖5)，左手拇指將大轉子部向外推動，其余四指將股骨內收以擴大股骨頭與髖臼之間的間隙，左手拇指固定于大轉子后上部，根據大轉子后上部的位置確定進針點。

碘伏消毒后用一次性1 mL無菌注射器垂直進針(圖8)，注意避開坐骨神經和血管。進針后在觸及骨骼后停止進針(垂直進針距離約1 cm左右)，此時即進針至髖關節附近，稍微調整針頭尋找股骨頭與髖臼之間縫隙，針頭有觸及滑膜感的囊性感時即進入髖關節腔，立即進行注射。注射完成后拔出注射器針頭，碘伏棉球按壓片刻不出血即可。隨后關閉氣麻機，將兔側臥位平放于兔籠內，約3～5 min后即可蘇醒。

圖8 注射

2 討論

2.1 髖關節注射進針點的合理性

兔髖關節的解剖如圖9所示，在大量兔動物實驗的基礎上根據其解剖形態發現經背側對兔進行髖關節腔注射在解剖學上有充分的合理性。在兔髖關節內收的前提下，背側髖關節間隙增寬，且神經血管距髖關節間隙存在著一定距離，此時進行兔髖關節注射時不會損傷血管和坐骨神經，安全性高。

圖9 兔髖關節解剖

根據分離的股骨頭測量數據得出，兔大轉子距股骨頭最遠處的距離為1.5 cm左右(圖10)。在體表測量大轉子距后正中線的總距離為3.5 cm左右(圖6)，因兔子個體大小略有差異，可按比例進行計算定位，即將大轉子距后正中線的總距離分為七等份，選取外側三等份與內側三等份交界點為進針點，也可直接取大轉子后上部內側沿向后正中線垂線內側1.5 cm左右進針。

圖10 大轉子至股骨頭前端的距離測量

取一只新西蘭兔按照前期總結的髖關節注射操作方法，向兔髖關節腔注射伊文思藍染色液進行驗證。操作方法如上所述，注射完成后，將兔髖關節進行解剖，注射后未去除關節囊可見伊文思藍染色液成功注射至髖關節腔(圖11)。去除關節囊后，可見股骨頭已被成功染色(圖12)。將股骨頭分離后可見，整個股骨頭已被伊文思藍溶液充分染色(圖13)，證明藥物成功注射入髖關節腔并在關節腔內充分的分布，與股骨頭表面接觸完全，達到藥物注射的理想效果。

圖11 注射伊文思藍染色劑后未分離關節囊的股骨頭

圖12 注射伊文思藍染色劑后分離關節囊的股骨頭

圖13 分離后的股骨頭

2.2 優點

①相對于耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉麻醉，氣麻機麻醉后兔能夠快速蘇醒，反復進行關節腔注射時對實驗動物的影響較小，且無需使用兔固定盒，避免了在關節腔注射過程中兔的劇烈反抗而傷及實驗人員；②只要嚴格按照文中介紹的定位方法定位進針點，即可將藥物注射至關節腔及周圍。操作熟練后，單人即可快速完成，省時省力；③關節內給藥是一種保守治療方法，可將治療性藥物直接注射到關節腔中。相比傳統的口服等給藥方式，避免了首關消除，直達病所，改善了藥物生物利用率的問題，從而最大限度的擴大治療效果[3]；另一方面，關節腔注射時藥物使用較低劑量即可達到治療濃度，減少了藥物的使用劑量，同時也減少了不良作用發生的概率[4-5]；④髖關節腔是由滑膜和關節囊構成的一個密閉且獨立的解剖間隔，髖關節腔注射使治療藥物直接進入關節腔，隨后立即與股骨頭、軟骨、髖關節滑膜與關節囊動脈等病灶部位直接接觸，有利于藥效的充分發揮[6]。

2.3 不足

關節內給藥是一種有創操作，一定程度上會增加感染、腫脹等并發癥的風險[7]。因此，在操作時要嚴格備皮、消毒后再進行后續操作。

2.4 注意事項

①定位之前，需將兔擺放至髖關節注射時體位，以確保定位的準確性，避免定位與注射時因體位不同而導致體表定位不準確；②進針時要將兔髖關節內收以牽開坐骨神經和血管，擴大關節間隙。

綜上所述，本方法操作簡便，可行性高，嚴格按照操作步驟定位即可將藥物順利注射入兔髖關節腔，為大量動物實驗的大批量開展提供了便捷，是一種行之有效的兔髖關節腔注射給藥方法。