急性腦梗死患者血清Lp-PLA2、MIF的表達及其與神經功能缺損的相關性

劉麗娜,趙紅敏,王靜,田惠玉,謝冰川

動脈粥樣硬化是急性腦梗死(acute cerebral infarct，ACI)的病理基礎，會造成腦血管狹窄，形成血栓，加重ACI患者神經功能缺損(neurological deficit，ND)程度[1]。多種炎性因子參與動脈粥樣硬化，其中，脂蛋白磷脂酶A2(lipoprotein-associated phospholipase A2，Lp-PLA2)參與動脈粥樣硬化的形成、發展過程和斑塊破裂過程，能增加氧化性脂肪酸、溶血性卵磷脂的分泌，促進動脈粥樣硬化的發展，是動脈粥樣硬化常見的炎性反應標志物[2]。研究證實，Lp-PLA2水平與ACI患者的動脈粥樣硬化、神經損傷等病情直接相關[3]。巨噬細胞移動抑制因子(macrophage migration inhibition factor， MIF)是參與動脈粥樣硬化的細胞因子，具有激素、酶、炎性因子多種效能[4]。研究表明，MIF與腦梗死患者的病情具有緊密的聯系[5]。由此推測，MIF可能與ACI患者的ND程度有關聯。基于此，本研究分析急性腦梗死患者血清Lp-PLA2、MIF的表達及其與ND的相關性，為后續ACI患者ND治療方法和評估方式的研究提供科學依據，報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2020年6月—2021年6月河北醫科大學第一醫院全科醫學科診治ACI患者86例作為研究對象，男54例，女32例；年齡43～62(58.45±6.00)歲；發病至入院時間1.3～4.1(2.80±0.55)h。在急性期(發病第2天)、恢復期(發病第15天)，分別根據美國國立衛生研究院卒中量表(NIHSS)評分將ACI患者納入輕度組(≤4分)、中重度組(>4分)。本研究經醫院醫學倫理委員會審核通過(審批號2020023)，患者與家屬均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 病例選擇標準 (1)納入標準：①符合“中國急性缺血性腦卒中診治指南2018”[6]中ACI診斷標準；②經頭顱CT檢查確診為ACI；③ACI首次發病；④發病至入院時間≤48 h；⑤動脈粥樣硬化誘發的ACI。(2)排除標準：①腦出血；②合并自身免疫性疾病或傳染性疾病；③合并惡性腫瘤；④合并心肌梗死或周圍血管性病變等；⑤心、肝、腎等臟器功能異常；⑥近期手術史；⑦近期顱腦創傷史；⑧近3個月內使用抗生素。

1.3 觀察指標與方法

1.3.1 ND程度評估[7]：于急性期、恢復期，用NIHSS量表評估患者ND程度：意識水平、凝視、視野、面癱、上肢運動、下肢運動、肢體共濟失調、感覺、語言、構音障礙、忽視等11個項目，總分42分，得分越高提示神經功能缺損越嚴重。根據NIHSS評分分為輕度缺損(≤4分)和中重度缺損(>4分)。

1.3.2 血清Lp-PLA2、MIF檢測：于急性期、恢復期，采集患者空腹肘靜脈血3 ml，離心留取血清5 ml， -80℃保存，使用Lp-PLA2試劑盒(天津康爾克生物科技有限公司提供)，以雙抗體夾心法測定血清Lp-PLA2水平；使用MIF試劑盒(上海臻科生物科技有限公司)，以酶聯免疫吸附試驗法測定血清MIF水平。

1.3.3 實驗室相關指標檢測：于急性期、恢復期，采集患者空腹肘靜脈血7 ml，留取血清，-80℃保存待測。(1)血糖指標：以全自動生化分析儀(貝克曼庫爾特有限公司，型號 AU5800)測定空腹血糖(FPG)；(2)血脂指標：以血脂檢測儀(日立公司，型號7180)測定總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)；(3)肝腎功能：以全自動生化儀測定肌酐(SCr)、尿酸(UA)、丙氨酸氨基轉移酶(ALT)。

2 結 果

2.1 急性期、恢復期不同ND程度ACI患者臨床資料比較 急性期中重度組ACI患者收縮壓、舒張壓及血清TG、Lp-PLA2、MIF高于輕度組，差異有統計學意義(P<0.05)；恢復期中重度組ACI患者舒張壓及血清TG、LDL-C、Lp-PLA2、MIF高于輕度組，差異有統計學意義(P<0.05)；2組其余資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 急性期、恢復期不同ND程度ACI患者臨床資料比較

2.2 急性期、恢復期ACI患者ND程度比較 急性期，ACI患者NIHSS評分為2～37(17.37±3.12)分，其中輕度28例，中重度58例。恢復期，ACI患者NIHSS評分為2～34(8.80±0.99)分，其中輕度31例，中重度55例。ACI患者急性期NIHSS評分高于恢復期(t/P=24.195/<0.001)。

2.3 急性期、恢復期ACI患者血清Lp-PLA2、MIF表達比較 與急性期比較，恢復期ACI患者血清Lp-PLA2、MIF水平降低， 差異均有統計學意義(P<0.01)，見表2。

表2 急性期、恢復期ACI患者血清Lp-PLA2、MIF表達比較

2.4 血清Lp-PLA2、MIF表達與ACI患者ND程度的相關性 急性期時，血清Lp-PLA2、MIF表達與ACI患者ND程度呈正相關(r=0.390、0.498，P均<0.001)。恢復期時，血清Lp-PLA2、MIF表達與ACI患者ND程度呈正相關(r=0.390、0.428，P均<0.001)。

2.5 血清Lp-PLA2、MIF評估ACI患者ND程度的決策曲線 以凈受益率為縱坐標，高風險閾值為橫坐標，繪制急性期、恢復期血清Lp-PLA2、MIF評估ACI患者ND程度的決策曲線(見圖1)，結果顯示，當高風險閾值分別在0.00～0.99、0.00～0.96時，凈受益率大于0，凈受益率最大值為0.674、0.672；聯合血清Lp-PLA2、MIF水平的模型評估ACI患者ND程度的凈受益率優于單純Lp-PLA2或單純MIF。

注：Lp-PLA2.脂蛋白磷脂酶A2；MIF.巨噬細胞移動抑制因子

3 討 論

ACI患者的ND與動脈粥樣硬化斑塊的形成、發展有關，由于血管壁發生炎性反應，內皮細胞功能被破壞，炎性因子聚集，形成動脈粥樣硬化斑塊，造成或加重ACI，導致管腔狹窄或閉塞，從而加重ND[8]。NIHSS評分為ACI患者常用的神經功能缺損評估方法，NIHSS評分越高，ACI患者的神經功能缺損程度越嚴重[9]。但是，NIHSS評估方法較為復雜，存在一定的局限性，而且，NIHSS評估易受患者主觀感受的影響。目前，現有的生化指標難以準確評估ACI患者ND程度。因此，有必要分析ACI患者神經功能損傷相關因素，輔助神經功能損傷評估，提升評估準確度。

Lp-PLA2是新型的動脈粥樣硬化標志物，屬于磷脂酶，具有釋放脂肪酸、卵磷脂的功能和水解脂蛋白相關磷脂酰膽堿的作用，參與炎性反應，從而誘導炎性因子過表達，加快血栓的形成和動脈粥樣硬化過程[10]。而ND程度與動脈粥樣硬化過程有關[11]，因此，Lp-PLA2可能也與ACI患者ND程度有關。MIF是一種參與ACI病理過程的炎性因子，可促進巨噬細胞增殖，強化巨噬細胞的吞噬作用，刺激巨噬細胞聚集于炎性反應部位，加重炎性浸潤，從而參與ACI患者缺氧后的腦組織炎性反應損傷，加快動脈粥樣硬化進程，可能影響ACI患者ND[12-13]。本研究發現，血清Lp-PLA2、MIF表達與ACI患者ND程度呈正相關。分析原因可能為：Lp-PLA2主要分泌于巨噬細胞、淋巴細胞等，通過水解低密度脂蛋白，生成氧化性游離脂肪酸、血磷脂酰膽堿，對T淋巴細胞、巨噬細胞產生刺激，造成內皮細胞凋亡并聚集巨噬細胞，加快動脈粥樣硬化，加重ND[14]。Lp-PLA2增加基質金屬蛋白酶，降解膠原纖維，降低粥樣硬化斑塊穩定性，造成斑塊破裂，加重ND[15]。而且，ACI患者伴有微循環障礙，發生巨噬細胞、中性粒細胞炎性浸潤，存在膠質細胞、神經細胞等腦細胞變性壞死的情況[16]。Lp-PLA2能刺激單核巨噬細胞，白三烯類、白介素等多種炎性介質表達增加，促進炎性反應，加重缺血性腦損傷，從而影響ND程度[17]。張紅霞等[18]經相關性分析證實，Lp-PLA2與腦梗死后ND程度密切相關，ND程度越嚴重，血清Lp-PLA2水平越高，與本結果相符。MIF參與巨噬細胞的炎性反應，加重膠原纖維的破壞，促進動脈硬化形成和發展，造成血管痙攣、梗死，加重氧化應激反應[19-20]。MIF不僅促進巨噬細胞增生，誘導巨噬細胞聚集于炎性反應局部而加重炎性浸潤，破壞動脈粥樣硬化斑塊的穩定性使其破裂，加重ND[21]；而且能通過誘導基質金屬蛋白酶-9分泌，進一步降解膠原，增加動脈粥樣硬化斑塊的不穩定性，加重ACI病情，可能影響ACI患者ND程度[22]。研究證實，MIF能促進核因子-κB表達，炎性細胞增多，加重炎性反應，增加神經功能損傷[23]。另有研究表明，MIF能通過與下行多巴胺能系統相互作用而抑制多巴胺能系統，參與神經病理超敏反應，可能影響ND程度[24]。此外，決策曲線分析是一種簡潔易懂的數學模型,以評判預測工具的可用性及效益。本研究繪制急性期、恢復期血清Lp-PLA2、MIF評估ACI患者ND程度的決策曲線，結果顯示，ACI患者血清Lp-PLA2、MIF在急性期、恢復期均可用于ND程度評估，凈受益率均較高，說明具有較高的可用性和效益。

綜上所述，ACI患者血清Lp-PLA2、MIF的表達隨恢復而降低，與ND程度有關，在急性期、恢復期均可用于ND程度評估。

利益沖突：所有作者聲明無利益沖突

作者貢獻聲明

劉麗娜、王靜：設計研究方案，實施研究過程，采集數據，論文撰寫；趙紅敏：進行統計學分析，課題設計，文章審核；田惠玉：提出研究思路，分析試驗數據，論文審核;謝冰川：資料搜集整理，論文修改