艾煙對動脈粥樣硬化小鼠抑制機制研究

康虹亮　易?！堥∏駶摗∥榻瓭±畋?/p>

摘要：目的：人們日常生活中用艾葉燃燒的艾煙對發(fā)生的心血管疾病動脈粥樣硬化的保護作用。方法：小鼠作為實驗對象，建立動脈粥樣硬化模型，我們以單純高脂飼料喂養(yǎng)，為期12周，建造小鼠動脈粥樣硬化模型。我們用艾葉中燃燒的艾煙，之后再使用它干預小鼠，進行觀察和記錄。其主要分四個步驟，艾煙的充分燃燒、小鼠動脈粥樣硬化模型的建立、分組實驗觀察記錄、數(shù)據(jù)分析。結果：艾煙使動脈粥樣硬化小鼠的TC，TG，HDL，LDL全部都大幅度的下降，八周齡小鼠高脂飲食喂養(yǎng)十二周以后，體重以及血脂變化都出現(xiàn)了異常，相對于正常小鼠，APOE體重減輕，TG，LDL，VLDL含量增高，HDL含量下降.結論：艾煙進行煙熏12周可以有效降低TG，LDL的水平，可以調整小鼠血脂水平。

關鍵詞：艾煙，動脈粥樣硬化小鼠，抑制機制

艾煙是艾絨燃燒的產物，艾的藥性成分可能存在其中。古代文獻中有用艾煙治療疾病的記載，如在《圣濟總錄》、《本草綱目》《神農本草經(jīng)疏》等古籍中，有將艾葉做卷后點燃，口吸艾煙以治療咳嫩，鼻吸艾煙治療牙痛，熏艾治療病疾，掩口不愈等記載。研究發(fā)現(xiàn)，艾煙在膽固醇代謝，血液流變方面有一定的良性調整作用。而對于艾煙是否為艾灸抗動脈粥樣硬化的起效因素之一，國內外未見報道。本研究以小鼠為研究對象，以艾艾煙暴露為干預方法，觀察艾煙干預對小鼠生存狀態(tài)、血脂、血清炎性指標、主動脈粥樣硬化斑塊、肝臟病理，以及膽固醇攝取和膽固醇逆向運轉機制的影響，以期從抑制炎癥、改善胎代謝障礙等途徑闡釋艾灸、艾煙的作用機制。

1、材料與方法

1. ? 30只8周齡的Apoe小鼠隨機分為2 組：模型組以及艾煙組，每組15只。15只小鼠作為正常對照，小鼠喂養(yǎng)一周后，進行實驗干預，干預方法如下：正常組：采用小鼠固定器固定小鼠，不進行干預;模型組：采用固定器固定小鼠四肢，不進行干預;艾煙組：將小鼠固定后放入自制玻璃缸，玻璃鋼內有調試好的粉塵儀。點燃艾條，從玻璃缸的上方的圓孔中插入，令艾煙充滿玻璃缸測試其濃度在5mg/m3 到15mgm3時將艾條取出，然后封閉圓孔。并且每隔三分鐘就記錄一次濃度數(shù)值，數(shù)值過高或者過低都需要及時補充。
2. 統(tǒng)計學方法? 應用SPSS23.0統(tǒng)計軟件進行相關數(shù)據(jù)分析，計量數(shù)據(jù)以（±s）表示，采用Fisher確切概率法檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2、結果

2.1實驗前普通小鼠和APOE小鼠皮毛烏黑有光澤， 且活波好動 ， 但在實驗結束時 ， 小鼠皮毛灰暗干澀并出現(xiàn)多處脫落。實驗前各組小鼠體重無差異 ，隨時間增長各組小鼠體重逐漸增加 ，干預12周后，各組小鼠體重呈現(xiàn)正常組模型 組 、 艾煙組的趨勢 。 模型組小鼠體重顯著低于正常組（p=0.001） ; 艾煙組小鼠體重與模型組沒有特別大的差異，且都具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

模型組小鼠血清TG，LDL含量顯著高于正常組，HDL含量顯著低于正常組，血清TC與正常組無差異。艾煙組小鼠血清TG，LDL含量顯著低于模型組，HDL含量與模型組無顯著差異（見表1）。

3、討論

現(xiàn)代研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)艾煙中含有多種活性成分，可以通過呼吸系統(tǒng)和血液循環(huán)系統(tǒng)，達到抗炎殺菌、調節(jié)免疫、抗氧化、調節(jié)自主神經(jīng)功能，調節(jié)膽固醇代謝等多種效果。艾煙具有殺菌、抗病毒的作用，可抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、傷寒軒菌、結核桿菌等還可抑制流感病毒、腺病毒、鼻病毒等可用于治療呼吸系統(tǒng)疾病。同時艾煙還可局部作用于皮膚，治療局部皮膚感染，如足癬、外傷感染等艾煙的提高免疫，抗氧化作用表現(xiàn)在艾煙可以調節(jié)細胞因子平衡，抑制（經(jīng)脂多糖（誘導的）小鼠巨嗟細胞系（的釋放和的表達“，提高血清抗氧化酶活性，抗氧化損傷，和清除自由基。艾煙可以良性調整心率變異性，提高心臟自主神經(jīng)功能、并且研究發(fā)現(xiàn)，艾煙在膽固醇代謝，血液流變方面有一定的良性調整作用。一定濃度艾煙暴露可以降低高脂血癥大鼠、升高，降低血柴枯度。還可降低大鼠血清中和血管性假血友病因子水平，升高并認為，艾煙可以通過呼吸進入機體，并最終進入血液循環(huán)，可能對心血管系統(tǒng)具有一定的的作用。

研究表明Toll受體 （Toll-like receptors TLRs） 作為免疫細胞表面識別病原相關分子模式的一個模式識別受體家族， 與天然免疫反應有著密切的關系， TLR4是其中發(fā)現(xiàn)較早同時也是目前研究較多的Toll受體， 在血脂代謝紊亂和慢性炎癥的相互作用起著重要橋梁作用， 一方面氧化修飾的血清脂蛋白可通過TLR4受體激活免疫細胞， 介導TNF-α、IL-1、IL-6等炎癥因子的釋放， 同時炎癥細胞因子也可以促進脂蛋白的氧化， 使具有生物活性的氧化修飾的脂蛋白的比例和含量均升高促進脂質沉積。目前多數(shù)研究認為Hcy導致的內皮功能障礙是動脈粥樣硬化的重要機制。NO是內皮細胞維持血管擴張的主要調節(jié)因子， 而血管內皮在成生NO過程中出現(xiàn)異常， 使NO生成減少， 導致內皮功能障礙， 是動脈粥樣硬化的前奏。

高脂飼料喂養(yǎng)法建立的模型以脂質沉積為主要特征，操作性強，也較常被采用，但其造模時間較長，且形成的斑塊位置不固定，從而人們在此基礎上進行改進，免疫法、神經(jīng)及機械損傷法、血流動力改變法、基因工程法等建立動脈粥樣硬化動物模型的方法應運而生，這些方法都能加速模型的建立，也各有優(yōu)缺點，它們與人類自發(fā)型的動脈粥樣硬化存在一定差異，在研究動脈粥樣硬化并發(fā)癥時，部分結扎頸動脈法發(fā)揮了不可替代的作用;球囊損傷法形成的斑塊位置確切，便于研究者實施各種干預措施后觀察斑塊的變化;免疫法建立的模型可為研究疫苗預防動脈粥樣硬化提供線索，因此人們可根據(jù)自己的需要選擇比較合適的造模方法。

目前，動脈粥樣硬化的研究已是全國共通的話題，在美國也有大量的研究，在美國，每年約785 000人新發(fā)冠心病（CAD），約470 000人再發(fā)CAD。2007年美國平均每6個死亡病例中有1例死于CAD。盡管腦卒中發(fā)生率下降，但美國2007年的死亡數(shù)據(jù)顯示每18個死亡病例中有1例死于腦卒中。血脂異常是CAD最主要的危險因素，甚至是CAD的首要條件。流行病學資料也顯示高膽固醇血癥以及冠狀動脈粥樣硬化是缺血性腦卒中的危險因素。冠心病流行病學和預防美國是冠心病高發(fā)病國家，全國共有冠心病患者約400萬，每年約有70萬心肌梗塞發(fā)作。1949年開始了Framingham地區(qū)冠心病流行病學研究，研究出吸煙、高血壓、高血脂、超體重、缺少運動、糖尿病、陽性家族史等為主要的易患因素。研究對象目前尚有60%存活。

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項目基金：2021年湖南省大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項目：湘教通[2021]197號-3904;2021年長沙醫(yī)學院大學生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓練計劃項目：長醫(yī)教[2021]47 號-059

*通訊作者：李兵，（1987-11-），男，本科，講師，解剖學專業(yè)

第一作者：康虹亮（2001-12-），男，本科在讀，臨床醫(yī)學專業(yè)

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