液態氟碳納米脂質微球超聲對比劑在大鼠CT顯像實驗中的應用研究

高學明

摘要：目的：研究大鼠CT顯像實驗中液態氟碳納米脂質微球超聲對比劑的應用。方法：采用蘭州大學大學實驗動物中心提供的12只Wistar大鼠，制備與評價PFOB微球，進行體外實驗、體內實驗，統計分析大鼠造影前后下腔靜脈、腹主動脈、脾臟、肝臟感興趣區不同時間點的CT值。結果：大鼠造影前后下腔靜脈、腹主動脈感興趣區注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h的CT值均逐漸降低（P<0.05），均高于注射前（P<0.05）。大鼠造影前后脾臟感興趣區注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1、2、3d的CT值逐漸升高（P<0.05），注射后3、4、5、6、7、8d的CT值逐漸降低（P<0.05），均高于注射前（P<0.05）;肝臟感興趣區注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1d的CT值逐漸升高（P<0.05），注射后1、2、3、4、5、6、7、8d的CT值逐漸降低（P<0.05），注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1、2、3、4、5、6、7、8d的CT值均高于注射前（P<0.05）。結論：大鼠CT顯像實驗中液態氟碳納米脂質微球超聲對比劑的應用價值高。

關鍵詞：大鼠;CT顯像實驗;液態氟碳納米脂質微球超聲對比劑

液態氟碳（PFOB）是一種全氟化物（PFC），組成成分為碳原子8個、氟原子7個、溴原子1個，攜氧功能良好，穩定性高，最早作為血液代用品在醫學領域得到了廣泛應用。本文研究了大鼠CT顯像實驗中液態氟碳納米脂質微球超聲對比劑的應用。

1.材料與方法

1.1 材料與設備

采用蘭州大學大學實驗動物中心提供的12只Wistar大鼠，體質量200～250g，雌雄不限。購買國藥集團化學試劑有限公司生產的卵磷脂，上海東華有限公司生產的高壓均質乳化機（GYB40-10S），上海標本模型廠生產的高速分散均質機（FJ-200），江蘇榮華儀器制造公司生產的磁力攪拌器（78-1型），英國馬爾文公司生產的激光粒度和電位分析儀（Zetasizer 3000HS），法國Elf Atochem公司生產的PFOB，美國GE公司生產的16排螺旋CT，1%戊巴比妥鈉，氯仿。

1.2 方法

1.2.1 PFOB微球的制備與評價

將5g卵磷脂稱取出來，恒溫下在10ml氯仿溶液中溶解并攪拌，在此過程中將磁力攪拌器充分利用起來，待卵磷脂在氯仿溶液中完全溶解后，向水相溫度為60℃的旋轉蒸發儀中移送，旋轉蒸發，直到有一均勻薄膜形成。向一燒杯中移送脂質薄膜，將80ml PBS緩沖液加入。向卵磷脂緩沖液中逐滴加入75.27g PFOB并乳化5～10min，在此過程中將高速分散機充分利用起來。之后向高壓均質機中轉入該混合乳劑，進一步乳化3～4min，壓力為70Mpa。光鏡下對PFOB微球形態與分布進行觀察，采用激光粒度和電位分析儀對微球微粒及電位進行測定。

1.2.2 體外實驗

用脫氣水將PFOB微球原液稀釋，在塑料管中裝入5ml脫氣水、5ml 1：8倍稀釋液、5ml 1：4倍稀釋液、5ml 1：2倍稀釋液、5ml原液，分別用數字5、4、3、2、1標記，進行CT掃描，參數設置：電壓、電流、層厚、每層掃描時間分別為80kVp、170mA、5mm、0.8s。

1.2.2 體內實驗

給予大鼠腹腔注射4.8ml/kg 1%戊巴比妥鈉麻醉，將大鼠尾靜脈通道建立起來，將濃度為64%W/V 5ml/kg PFOB注入，在注入前、注入后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1、2、3、4、5、6、7、8d分別進行胸腹部CT掃描，參數設置同上。對實驗過程中大鼠生命體征變化進行觀察。將感興趣區從下腔靜脈、腹主動脈、脾臟、肝臟的相同部位選取出來，并對其造影前后的CT值進行測量，將時間-密度曲線繪制出來。采用ADW4.3后處理軟件進行三維重構。

1.3 統計學分析

數據分析工具采用SPSS21.0軟件，計量資料用（）表示，用t檢驗。P<0.05表示差異存在統計學意義。

2.結果

2.1 大鼠造影前后下腔靜脈、腹主動脈感興趣區不同時間點的CT值比較

大鼠造影前后下腔靜脈、腹主動脈感興趣區注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h的CT值均逐漸降低（P<0.05），均高于注射前（P<0.05）。見表1。

2.2 大鼠造影前后脾臟、肝臟感興趣區不同時間點的CT值比較

大鼠造影前后脾臟感興趣區注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1、2、3d的CT值逐漸升高（P<0.05），注射后3、4、5、6、7、8d的CT值逐漸降低（P<0.05），均高于注射前（P<0.05）;肝臟感興趣區注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1d的CT值逐漸升高（P<0.05），注射后1、2、3、4、5、6、7、8d的CT值逐漸降低（P<0.05），注射后即刻、30min、1、2、3、4、6、8、12h、1、2、3、4、5、6、7、8d的CT值均高于注射前（P<0.05），但注射后8d和注射前的CT值之間的差異不顯著（P>0.05）。見表2。

3.討論

有研究表明，聚集的PFBO微球的聲反射現象顯著增強。由于X射線不會穿透PFOB，PFOB無生物學活性，因此在放射對比劑中占有重要地位。本研究結果表明，在CT顯像中，PFOB微球超聲對比劑能夠將積極作用發揮出來，應用前景良好。

綜上所述，大鼠CT顯像實驗中液態氟碳納米脂質微球超聲對比劑的應用價值高，值得推廣。

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甘肅省人民醫院院內科研基金（20GSSY3-10）

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