劉元鐘

（電子科技大學醫學院附屬綿陽市中心醫院醫學檢驗科，四川 綿陽 621000）

乙型病毒性肝炎是臨床上常見的一種疾病，是指患者因感染乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）而發生的肝臟病變。該病的傳染性較高。該病患者的臨床癥狀主要是乏力、惡心及肝區疼痛，并可伴有不同程度的肝功能損害，病情嚴重的患者甚至會發生肝硬化及感染[1]。乙肝兩對半是判定是否發生HBV感染的血清免疫標志物。全自動化學發光免疫分析儀可用于檢測乙肝兩對半。HBV是一種雙鏈DNA病毒。臨床上可根據患者血清中HBV-DNA的含量判定其是否患有乙型病毒性肝炎。聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR）擴增儀可用于進行HBV-DNA定量檢測[2-3]。本文主要是探討使用全自動化學發光免疫分析儀聯合PCR擴增儀診斷乙型病毒性肝炎的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文的研究對象為2020年1月至2021年2月期間電子科技大學醫學院附屬綿陽市中心醫院收治的186例疑似患有乙型病毒性肝炎的患者。在這些患者中，有男性患者105例，女性患者81例；其年齡為15～78歲，平均年齡為（46.50±31.50）歲。本次研究經該醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 方法

本次研究中使用的主要儀器和試劑為全自動化學發光免疫分析儀（品牌：西門子，型號：ADVIA Centaur CP）及配套試劑、PCR擴增儀（品牌：萊恩德，型號：LD-PCR）及配套試劑。在清晨使用真空負壓采血管采集患者5 m L的空腹靜脈血。將血液標本放在水浴箱中10 m in。用離心機以4000 r/m in的速度對血液標本進行離心處理。將血清低溫保存。為所有患者均使用全自動化學發光免疫分析儀進行乙肝五項檢測，然后根據檢測結果判定其是否患有乙型病毒性肝炎。檢測乙肝五項的方法是：按照試劑盒的說明書，使待檢血清分別與包被乙型肝炎病毒表面抗原（hepatitis B virus surface antigen，HBsAg）、乙 型 肝 炎 病毒表面抗體（hepatitis B virus surface antibody，HBsAb）、乙 型 肝 炎 病 毒e抗 原（hepatitis B virus e antigens，HBeAg）、乙型肝炎病毒e抗體（hepatitis B virus e antibody，HBeAb）及 乙 肝病毒核心抗體（hepatitis B virus core antibody，HBcAb）的順磁顆粒結合，并向其中添加吖啶酯標記抗體復合物。用全自動化學發光免疫分析儀觀測復合物出現的發光反應。乙肝五項檢測結果為陽性的標準為：患者的血清HBsAg定量≥0.5 IU/m L、HBsAb定量＞10.00 MIU/m L、HBeAg定量＞0.100 IU/m L、HBeAb定量＞0.20 IU/m L或HBcAb定量＞0.60 IU/m L。若為這些患者使用全自動化學發光免疫分析儀檢測乙肝五項的結果為陽性，則可判定其患有乙型病毒性肝炎。為所有患者均使用PCR擴增儀進行HBV-DNA定量檢測，然后根據監測結果判定其是否患有乙型病毒性肝炎。進行HBV-DNA定量檢測的方法是：在待檢血清中加入100 μL的裂解液，混勻后靜置10 min，離心25 s，去除上層清液。在獲得的溶液中加入150μL的洗滌液，混勻后靜置10 m in，離心25 s，去除上層清液。在獲得的溶液中再次加入150μL的洗滌液，混勻后靜置10 m in，離心25 s，去除上層清液。在獲得的溶液中加入30 μL的反應液，并放入PCR擴增儀中。將熒光猝滅基團標記探針與熒光報告基團標記探針分別添加在HBV-DNA模板的兩端，用Taq酶降解探針作為引導。當兩個基團的抑制作用消失后，根據該熒光信號測定HBV-DNA的含量。HBV-DNA檢測結果為陽性的標準為：患者血清中HBV-DNA的水平＞1000 copy/m L。若為這些患者使用PCR擴增儀檢測HBV-DNA的結果為陽性，則可判定其患有乙型病毒性肝炎。

1.3 觀察指標

觀察為這些患者單獨使用全自動化學發光免疫分析儀、單獨使用PCR擴增儀、聯合使用全自動化學發光免疫分析儀和PCR擴增儀診斷乙型病毒性肝炎的結果、敏感度、特異度和準確度。

1.4 統計學方法

對本次研究中的數據均采用SPSS 21.0統計軟件進行處理，計量資料用均數±標準差（±s）表示，采用t檢驗，計數資料用百分比（%）表示，采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 為這些患者使用全自動化學發光免疫分析儀診斷乙型病毒性肝炎的結果

為這些患者使用全自動化學發光免疫分析儀診斷乙型病毒性肝炎的結果顯示，有119例患者患有乙型病毒性肝炎，有67例患者未患有乙型病毒性肝炎。詳見表1。

表1 為這些患者使用全自動化學發光免疫分析儀診斷乙型病毒性肝炎的結果（例）

2.2 為這些患者使用PCR擴增儀診斷乙型病毒性肝炎的結果

為這些患者使用PCR擴增儀診斷乙型病毒性肝炎的結果顯示，有123例患者患有乙型病毒性肝炎，有63例患者未患有乙型病毒性肝炎。詳見表2。

表2 為這些患者使用PCR擴增儀診斷乙型病毒性肝炎的結果（例）

2.3 為這些患者使用全自動化學發光免疫分析儀聯合PCR擴增儀診斷乙型病毒性肝炎的結果

2.4 為這些患者使用三種方法診斷乙型病毒性肝炎的效能

為這些患者使用全自動化學發光免疫分析儀聯合PCR擴增儀診斷乙型病毒性肝炎的結果顯示，有133例患者患有乙型病毒性肝炎，有53例患者未患有乙型病毒性肝炎。詳見表3。

表3 為這些患者使用全自動化學發光免疫分析儀聯合PCR擴增儀診斷乙型病毒性肝炎的結果（例）

與單獨使用全自動化學發光免疫分析儀或PCR擴增儀相比，為本研究中的患者聯合使用全自動化學發光免疫分析儀和PCR擴增儀診斷乙型病毒性肝炎的敏感度、特異度及準確度均較高，P＜0.05。詳見表4。

表4 為這些患者使用三種方法診斷乙型病毒性肝炎的效能（%）

3 討論

乙型病毒性肝炎是臨床上常見的一種傳染病。HBV的傳染源主要是乙型病毒性肝炎患者及HBV攜帶者，傳播方式包括母嬰傳播、血液傳播及性傳播。乙型病毒性肝炎患者病情的潛伏期可受到病原體種類、數量及個人免疫狀態等因素的影響[4-5]。乙肝五項的檢測指標可反映出患者感染HBV后的免疫狀態。全自動化學發光免疫分析儀是臨床上常用于檢測乙肝兩對的儀器，可利用化學發光法確定血液內是否存在HBsAg、HBsAb、HBeAg、HbeAb及HBcAb，為臨床診治乙型病毒性肝炎提供依據[6-7]。相關的研究結果顯示，使用全自動化學發光免疫分析儀診斷乙型病毒性肝炎的準確率較高[8]。但使用全自動化學發光免疫分析儀診斷乙型病毒性肝炎無法準確地判定患者體內HBV復制及傳染的情況，因此存在一定的漏診率及誤診率。HBV屬于DNA病毒，依靠HBVDNA完成復制。乙型病毒性肝炎患者體內HBVDNA的含量越高，表示其體內HBV的復制越活躍，其病情的傳染性越強[9-10]。PCR擴增儀是一種可用于定量檢測特定DNA片段的儀器。使用PCR擴增儀診斷乙型病毒性肝炎可將微量的HBVDNA大幅度擴增并測定受檢品中HBV-DNA水平，為臨床診斷乙型病毒性肝炎提供依據[11-12]。將全自動化學發光免疫分析儀和PCR擴增儀聯合用于診斷乙型病毒性肝炎，可使兩種儀器相互彌補診斷過程中的不足之處，大大提高診斷的效能。

本次研究的結果證實，與單獨使用全自動化學發光免疫分析儀或PCR擴增儀相比，聯合使用全自動化學發光免疫分析儀和PCR擴增儀診斷乙型病毒性肝炎的敏感度、特異度及準確度均較高。