戊型肝炎肝衰竭患者的血生化指標及血清IL-22表達水平研究

習 林，游紹麗，劉鴻凌，朱 冰，臧 紅，辛紹杰，榮義輝

戊型肝炎肝衰竭患者的血生化指標及血清IL-22表達水平研究

習 林，游紹麗，劉鴻凌，朱 冰，臧 紅，辛紹杰，榮義輝

目的研究由HEV感染引起的肝衰竭（hepatic failure, HF）患者肝功能指標特征及血清IL-22水平。方法回顧性分析132例戊型肝炎（戊肝）HF病例資料，按照是否有HBV感染分為混合感染HF組和單純戊肝HF組，比較2組肝功指標、IL-22、IL-6以及IFN-γ水平。以普通戊肝組和健康體檢組作對照，比較4組IL-22、IL-6 及IFN-γ水平。結果混合感染HF組ALT、TBIL水平高于單純戊肝HF組（P均＜0.05），PA水平低于單純戊肝HF組（P＜0.05）。在IL-22水平方面，戊肝患者均高于健康對照者，混合感染HF組最高，普通戊肝組最低。在IL-6水平方面，HF患者均高于健康對照者，且混合感染HF組最高（P均＜0.05），但是普通戊肝組與健康對照組差異無統計學意義。4組IFN-γ差異無統計學意義。結論與單純戊肝HF患者相比，混合感染HF組肝功能損害程度更嚴重。戊肝患者IL-22、IL-6水平升高，發生HF時明顯升高，合并HBV感染時更高。

肝衰竭；HBV；HEV；血清IL-22

戊型肝炎（戊肝）是由HEV引起的。HEV是一種通過糞-口傳播的無包膜RNA病毒[1]，常引起大規模暴發或流行，臨床癥狀類似甲型肝炎，并可出現肝內膽汁淤積甚至發展為慢性肝炎，孕婦和老人感染戊肝后有較高的病死率（＞20%）[2]。慢性肝病患者合并感染HEV后會造成肝病急劇進展，并發癥增多，病死率高，預后差[3]。HEV的致病機制為通過宿主T細胞介導免疫應答造成機體損傷，Th細胞介導的免疫應答性質及強度直接決定患者病情的嚴重程度。IL-22由宿主Th22和Th17細胞分泌，在機體內發揮著抵御微生物入侵、修復組織損傷、促進急性期反應等作用[4]。本文研究HEV普通感染、HEV單純感染引起的肝衰竭（hepatic failure, HF）以及合并HBV感染引起的HF患者肝功能指標和血清中IL-22水平變化。

1 對象與方法

1.1 對象 研究對象來源于解放軍第三〇二醫院2003年1月—2012年 12月收治的HEV相關HF患者，其中單純HEV感染HF患者66例（單純戊肝HF組），HEV合并HBV感染HF患者66例（混合感染HF組），選取同期收治的與HF組年齡、性別匹配的普通戊肝患者50例作為對照（普通戊肝組）。以本院體檢中心2016年12月進行健康體檢的與HF組年齡、性別匹配的體檢者50例作為正常健康對照（健康對照組）。戊肝診斷標準符合《病毒性肝炎防治方案》[5]；HF診斷均符合《肝衰竭診治指南》（2012年版）[6]。

1.2 方法 回顧性分析混合感染HF組和單純戊肝HF組肝功指標、IL-22、IL-6及IFN-γ水平。以普通戊肝組和健康體檢組作對照，比較4組IL-22、IL-6及 IFN-γ水平。

1.3 檢測指標 應用ELISA法（上海科華，中國）或化學發光法（羅氏，美國）檢測血清病原標志，HAV、HBV、HCV、HDV、HEV、CMV、EBV和HIV等的抗原和抗體。采用日本Olympus公司AU5400型全自動生化檢測儀進行血液及生化指標ALT、AST、TBIL和ALB等檢測。凝血酶功能以及PA用日本Sysmex公司CA-500全自動凝血儀檢測。所有監測項目均在本院臨床檢驗中心完成。IL-22、IL-6、IFN-γ使用相應的ELISA試驗檢測試劑盒（IL-22、IL-6、IFN-γ）進行監測，試劑盒采用美國RayBiotec公司試劑盒。嚴格按照試劑盒說明書進行操作，設標準品和空白對照，每個樣本做3個復孔，結果計算平均值。建立標準曲線，根據標準曲線計算其血清中IL-22、IL-6、IFN-γ濃度。

1.4 統計學處理 用CHISS 2004軟件進行統計分析。計量資料呈正態分布或近似正態分布，用±s表示，2組間比較用成組t檢驗（組間方差齊），多組間比較用單因素方差分析，多重比較用q檢驗。多組間計數資料比較用R×Cχ2檢驗。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 一般資料 4組性別差異無統計學意義，但HF患者年齡較大。見表1。

表1 4組人口學資料Tabe 1 Demographic information of 4 groups

2.2 混合感染HF組與單純戊肝HF組肝功能指標比較 混合感染HF組ALT、TBIL水平高于單純戊肝HF組（P均＜0.05），PA水平低于單純戊肝HF組（P＜0.05）。2組AST和ALB差異無統計學意義。見表2。

表2 2組HF患者血生化指標比較（±s）Table 2 Comparison of blood biochemical indexes between 2 HF groups(±s)

表2 2組HF患者血生化指標比較（±s）Table 2 Comparison of blood biochemical indexes between 2 HF groups(±s)

組別 n ALT(U/L) AST(U/L) TBIL(μmol/L) ALB(g/L) PA(%)混合感染HF組 66 2379.3±845.9 1535.6±798.2 289.6±69.1 31.2±11.4 33.8±11.8單純戊肝HF組 66 1892.6±543.9 1358.1±633.2 242.7±78.2 30.5±6.2 38.6±10.1 t值 3.932 1.415 3.651 0.438 -2.511 P值 0.000 0.159 0.000 0.662 0.013

2.3 4組IL-22、IL-6及IFN-γ水平比較 在IL-22水平方面，戊肝患者均高于健康對照者，混合感染HF組最高，普通戊肝組最低。在IL-6水平方面，HF患者均高于健康對照者，且混合感染HF組最高（P均＜0.05），但是普通戊肝組與健康對照組差異無統計學意義。4組IFN-γ差異無統計學意義。見表3。

表3 4組血清IL-22、IL-6和IFN-γ細胞因子水平比較(±s，pg/ml)Tabl 3 Comparison of serum IL-22, IL-6 and IFN-γ levels among 4 groups (±s, pg/ml)

表3 4組血清IL-22、IL-6和IFN-γ細胞因子水平比較(±s，pg/ml)Tabl 3 Comparison of serum IL-22, IL-6 and IFN-γ levels among 4 groups (±s, pg/ml)

注：a.與混合感染HF組比較，P＜0.05；b.與單純戊肝HF組比較，P＜0.05；c.與普通戊肝組比較，P＜0.05

組別 n IL-22 IL-6 IFN-γ混合感染HF組 66 115.7±34.6 45.4±6.2 23.6±8.1單純戊肝HF組 66 73.6±21.3a 43.1±5.8a 23.6±6.1普通戊肝組 50 38.2±15.2ab 10.8±3.9ab 23.1±8.6健康對照組 50 15.6±6.1abc 9.4±3.2ab 22.6±7.1 F值 209.745 852.948 0.228 P值 0.000 0.000 0.877

3 討 論

我國HBV感染人群約 9300萬[6]，全球每年大約有2000萬人感染HEV，其中約有330萬人出現戊肝癥狀，5.66萬人死于此病[7]。由于各型嗜肝病毒之間沒有交叉免疫性，因此乙型肝炎（乙肝）患者仍可重疊合并感染HEV。有報道稱慢性乙肝重疊急性戊肝患者與單獨慢性乙肝患者相比，前者TBIL、并發癥發生率、重型肝炎發生率和病死率均明顯升高，而 ALT、ALB和 PA均明顯降低[8]。HF是終末期肝病的一種，病死率高，預后差，嚴重危害患者健康。本研究發現，混合感染HF組ALT、TBIL水平高于單純戊肝HF組（P均＜0.05），PA水平低于單純戊肝HF組（P＜0.05）。2組間AST和ALB差異無統計學意義。

目前臨床認為戊肝患者肝臟炎癥主要與宿主T細胞介導的免疫肝損傷有關，但具體機制仍未完全闡明[9-10]。最新研究顯示，免疫調節細胞Th22/ Th17在數量和功能上的平衡以及其產生的效應分子在病毒性肝炎、移植排異和自身免疫性疾病的發生發展中發揮著重要作用[11]。Th22/Th17細胞均分泌IL-22細胞因子，其能特異性作用于肝實質細胞，IL-22在慢性肝炎的發生發展中發揮的作用則以抗炎為主，減輕肝組織氧化應激反應和損傷；但同時IL-22在急性肝炎的發生、發展中所發揮的作用以促炎為主，IL-22可以刺激促炎癥因子的表達，放大特異性免疫細胞介導的組織損傷[12]。細胞因子IL-6也是參與肝損傷修復過程中的核心因子，主要由 Th2細胞分泌，其也能刺激 Th22和Th17細胞分泌IL-22[13]；IFN-γ介導宿主免疫CTL效應，主要由 Th1細胞分泌，與IL-22基因有相同的轉錄起始位點。本研究以IL-22為中心，以來源一致反應Th2細胞活性的IL-6細胞因子，反應Th1細胞活性的IFN-γ因子為參照，分析HF患者在HEV單獨感染以及HEV合并HBV感染，HEV普通感染時患者的血清表達情況。結果顯示：HF組IL-22和IL-6水平顯著高于普通戊肝組和健康對照組；混合感染HF組IL-22和IL-6水平顯著高于單純戊肝HF組；混合感染HF組、單純戊肝HF組、普通戊肝炎組IFN-γ水平與健康對照組水平相當，且3組間差異無統計學意義。

綜上所述，急性HEV感染引起的HF有IL-22參與，其產生的免疫應答性質及強度與患者病情的嚴重程度有關，在HF患者中若合并HBV感染，肝功能損害更嚴重，IL-22水平也更高。

[1] Rodriguez-Frias F, Jardi R, ButiM. Hepatitis E: molecular virology, epidemiology and pathogenesis［J］. Enferm Infecc Microbiol Clin, 2012, 30(10):624-634.

[2] Vivek R, Nihal L, Illiayaraja J, et al. Investigation of an epidemic of hepatitis E in Nellore in south India［J］. Trop Med Int Health, 2010, 15(11):1333-1339.

[3] 王琦，王煜，劉婭，等．替比夫定治療慢性乙肝過程中患者血清IL-22的變化及意義［J］．包頭醫學院學報，2014，30(2):37-39.

[4] 張恩勝，王靜，邱丙平，等． IL-17、IL-22在新生小鼠MCMV肝炎中的表達及意義［J］．中國實用醫刊，2014，41(14):31-35.

[5] 中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會，中華醫學會肝病學分會．病毒性肝炎防治方案［J］．傳染病信息，2000，13(4):141-150.

[6] 中華醫學會感染病學分會肝衰竭與人工肝學組，中華醫學會肝病學分會重型肝病與人工肝學組．肝衰竭診治指南（2012年版）［J］．中華肝臟病雜志，2013，21(3):177-183.

[7] WHO. 戊型肝炎實況報道［EB/OL］.［2017-06-15］. http:// www.who.int/mediacentre/factsheets/fs280/zh/.

[8] Acharya SK, Sharma PK, Singh R, et al. Hepatitis E virus (HEV) infection in patients with cirrhosis associated with rapid decompen sation and death［J］. J Hepatol, 2007, 46(3):387-394.

[9] 張自然，郭世民，趙和平．HBV相關肝硬化患者血清IL-22水平及臨床意義［J］．肝臟，2015，20(7):513-516．

[10] 宋玉蓮，白若岑．血清IL-22水平與急性戊型肝炎病毒感染患者肝功能損害、疾病進展及轉歸的相關性［J］．肝臟，2016，21(5):375-377.

[11] 賀立飛，秦白茹．自身免疫性肝炎患者 Th17相關細胞因子的檢測及臨床意義［J］．中國醫師進修雜志，2011，34(22):45-46.

[12] Hoan NX, Tong HV, Hecht N, et al. Hepatitis E virus superinfection and clinical progression in hepatitis B patients［J］. Ebiomedicine, 2015, 2(12):2080-2086.

[13] 鄧意志，徐慧．白細胞介素22對晚期肝硬化患者預后預測價值研究［J］．中國現代醫學雜志，2014，24(18):35-40．

（2017-05-10收稿 2017-06-15修回）

（本文編輯 張云輝）

Blood biochemical indexes and serum IL-22 level in patients with hepatitis E virus-induced hepatic failure

XI Lin, YOU Shao-li, LIU Hong-ling, ZHU Bing, ZANG Hong, XIN Shao-jie, RONG Yi-hui*Clinical Laboratory in First Affiliate Hospital of PLA General Hospital, Beijing 100037, China *Corresponding author, E-mail: ryh3021977@hotmail.com

ObjectiveTo study liver function index and serum IL-22 levels in patients with hepatic failure (HF) induced by HBV.MethodsA total of 132 HF patients were analyzed retrospectively. According to the presence of HBV co-infection, the involved patients were divided into co-infected HF group and simple infected HF group. Liver function indexes and IL-22, IL-6 and IFN-γ levels in 2 groups were compared. In addition, normal infection group and healthy examination group were defined, IL-22, IL-6 and IFN-γ levels among 4 groups were also compared.ResultsALT and TBIL levels in the co-infected HF group were significantly higher than these in simple infected HF group (P＜0.05), while PTA level was lower (P＜0.05). IL-22 levels in the patients with HEV infection were higher than that in healthy controls, the co-infected HF patients showed the highest levels, and simple infected patients showed the lowest levels. IL-6 levels in the HF patients were higher than that in healthy controls (P＜0.05), and the HF patients with co-infection showed the highest level, but no significant difference was found between simple infection and health control groups. There were no significant differences in IFN-γ levels among 4 groups.ConclusionsCompared with HF patients, the HF patients with HBV co-infection exhibit more severe liver dysfunction. IL-22 and IL-6 levels are higher in the infected patients, obviously increased in HF patients and extremely increased in HF patients with HBV co-infection.

hepatic failure; HBV; HEV; serum IL-22

R37

A

1007-8134(2017)03-0176-03

10.3969/j.issn.1007-8134.2017.03.013

北京市科技計劃課題首都市民健康培育項目（Z14100002114038）

100037 北京，解放軍總醫院第一附屬醫院檢驗科（習林）；100039 北京，解放軍第三〇二醫院肝衰竭診療與研究中心（游紹麗、劉鴻凌、朱冰、臧紅、辛紹杰），肝臟腫瘤診療與研究中心（榮義輝）

榮義輝，E-mail： ryh3021977@hotmail.com