張容超,吳 濤,劉 奇,李 娜,郭奎奎,杜 旭,王瑞輝
(陜西中醫(yī)藥大學(xué),陜西 咸陽(yáng) 712046)
顱腦損傷(Traumatic brain injury,TBI)是一種常見(jiàn)的神經(jīng)外科疾病,屬中醫(yī)學(xué)“跌仆”“腦傷”范疇[1]。TBI主要是由暴力直接或間接作用于頭部,破壞正常腦實(shí)質(zhì)而發(fā)病,常可引起暫時(shí)或永久性的認(rèn)知、心理及生理功能的喪失,其發(fā)病率居全身創(chuàng)傷性疾病之首,患者群體主要是青壯年男性[2]。不管是在貧窮戰(zhàn)亂地區(qū),還是發(fā)達(dá)和平的國(guó)家TBI的發(fā)病率都非常高,本病引起的學(xué)習(xí)、工作等日常生活能力的障礙及巨額的醫(yī)療費(fèi)用,給患者及社會(huì)帶來(lái)了沉重的負(fù)擔(dān),近年來(lái)隨著工礦、交通等基建行業(yè)的發(fā)展,其發(fā)病率不斷上升。研究發(fā)現(xiàn),針灸治療可減輕TBI的繼發(fā)性損害,改善患者預(yù)后,具有獨(dú)特的療效。前期研究發(fā)現(xiàn)電針對(duì)TBI大鼠的療效較佳,且常選腧穴為百會(huì)、水溝、曲池、內(nèi)關(guān)、足三里、涌泉[3-4],本研究以TBI模型大鼠為研究對(duì)象,以電針為干預(yù)手段,通過(guò)檢測(cè)TBI大鼠損傷腦組織PI3K/AKT通路關(guān)鍵蛋白的表達(dá)量,探討電針對(duì)TBI大鼠的治療效應(yīng)及作用機(jī)制,為針灸治療TBI的科研和臨床研究提供一些參考。
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:選用SPF級(jí)雄性SD大鼠160只,購(gòu)自四川成都達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司[批號(hào)SCXK(川)2015-030],平均體重(200±20)g。實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格遵守《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見(jiàn)》[5]。飼養(yǎng)環(huán)境12 h明暗交替、恒溫恒濕,自由飲水、普通飲食常規(guī)適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑與儀器:戊巴比妥鈉(批號(hào)096956-001),Anti-PI3K p85α mouse IgG antibody(批號(hào)sc-374534),Anti-AKT1/2/3 rabbit IgG antibody(批號(hào)BM4400),HRP-Goat anti-rabbit IgG(H+L)(批號(hào)HS101-01),HRP-Goat anti-mouse IgG(H+L)(批號(hào)HS201-01),抗熒光衰減封片劑(批號(hào)P0126),腦立體定……