甲氧芐啶快速檢測試劑盒質量評價樣品的分析

葉雅真 駱和東

摘 要：為做好商品化甲氧芐啶膠體金快速檢測試劑盒質量評價工作，本文采用參比方法，參照《能力驗證樣品均勻性和穩定性評價指南》（CNAS-GL003-2018）對甲氧芐啶評價樣品進行穩定性和均勻性考察。結果顯示，甲氧芐啶制備樣品穩定性符合要求，在14 d考察期內可用于試劑盒質量評價，制備樣品均勻性符合要求，可用于試劑盒質量評價。

關鍵詞：甲氧芐啶;膠體金免疫層析;質量評價;食品安全快速檢測

Abstract： In order to evaluate the quality of commercial methylrim colloidal gold rapid detection kit， the stability and uniformity were investigated by reference to （CNAS-GL003-2018）.The results showed that the sample stability of trimethoprim preparation met the requirements， can be used for the kit quality evaluation during the 14 d investigation period， the preparation sample uniformity met the requirements， and can be used for the kit quality evaluation.

Keywords： trimethoprim; the principle of colloidal gold immunochromatography; quality assessment; rapid detection for food safety

甲氧芐啶（Trimethoprim，TMP）是一種抗菌增效劑，可提高抗菌藥在動物體內的利用率[1-5]。甲氧芐啶的廣泛使用和不合理用藥，使動物性食品中有藥物殘留，對人體健康造成危害。食品安全快速檢測技術是一種快速定性（或半定量）的檢測技術，大多在2小時內可以出具樣品中目標成分含量符合或不符合國家相關限量要求的報告，雖然無法報告樣品中目標成分的具體含量，但是實現了現場快速檢測，為監管部門對食品安全的有效監管提供了便利的技術手段[6-15]。但由于國內快速檢測產品生產門檻低，監管部門難以監管，市場上流通的快速檢測產品質量參差不齊，符合監管需求的合格快檢產品較少[6-8]。為做好商品化甲氧芐啶膠體金快檢試劑盒質量評價工作，確保甲氧芐啶試劑盒的檢測效果，本文參照《能力驗證樣品均勻性和穩定性評價指南》（CNAS-GL003-2018）對甲氧芐啶評價樣品進行穩定性和均勻性考察[16]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

甲醇中甲氧芐啶溶液標準物質（BePure-26347YM，1 000 μg/mL，BePure）;乙腈（色譜純，德國MERCK）;正己烷（色譜純，德國MERCK）;正丙醇（分析純，滬試）;甲酸（優級純，德國MERCK）;磷酸氫二鈉（分析純，國藥）;磷酸二氫鉀（分析純，國藥）;有機過濾頭（0.22 μm，津騰）。

1.2 儀器與設備

三重串聯四極桿液相色譜質譜聯用儀（Agilent 6470）;色譜柱（100 mm×2.1 mm，1.7 μm，Agilent?UPLC C18）;Milli-Q超純水處理系統（美國Millipore）;電子天平（德國Sartorius）;微波爐（格蘭仕）;臺式離心機（美國Sigma）;移液槍（德國Eppendorf）;刀式研磨儀（德國Retsch）;pH計（瑞士METTLER TOLEDO）。

1.3 實驗方法

膠體金免疫層析快速檢測試劑盒一般適用于肌肉靶組織的檢測。通過調研發現雞肉是甲氧芐啶殘留風險最高的食品，因此確定此次質量評價的樣品基質為雞肌肉組織。參比方法為《動物源性食品中磺胺類藥物殘留量的測定 液相色譜-質譜/質譜法》（GB/T 21316—2007）[17]。經參比方法確證為陰性的雞肉作為空白雞肉樣本。以空白雞肉為基質，添加甲氧芐啶標準溶液，制成0 μg/kg、25 μg/kg 、50 μg/kg 3個添加水平的樣品。用參比方法對制備樣品進行均勻性和穩定性考察。

2 結果與分析

2.1 制備樣品的穩定性檢驗

參照《能力驗證樣品均勻性和穩定性評價指南》（CNAS-GL003-2018）中穩定性檢驗-t檢驗法分析制備的甲氧芐啶加標樣品的穩定性。統一制備甲氧芐啶加標樣品用于穩定性檢驗，分裝到50 mL離心管中，速凍保存。在第1 d、第7 d、第10 d和第14 d，分別隨機抽取25 μg/kg和50 μg/kg 2個濃度梯度的甲氧芐啶加標樣品各6份，用參比方法對制備樣品進行穩定性檢驗。穩定性檢驗t臨界值t0.05（10）=1.812 5。濃度梯度為25 μg/kg的甲氧芐啶加標樣品在第7 d、第10 d和第14 d與第1 d相比較，t值分別為0.457 3、0.086 1和0.063 3，濃度梯度為50 μg/kg的甲氧芐啶加標樣品在第7 d、第10 d和第14 d與第1 d相比較，t值分別為0.263 4、0.238 3和0.052 9，所有t值均

2.2 制備樣品的均勻性檢驗

參照《能力驗證樣品均勻性和穩定性評價指南》（CNAS-GL003-2018）中均勻性檢驗-單因子方差分析法分析制備的甲氧芐啶加標樣品的均勻性。統一制備甲氧芐啶加標樣品用于試劑盒質量評價，分裝到50 mL離心管中，速凍保存。隨機抽取25 μg/kg和50 μg/kg 2個濃度梯度的甲氧芐啶加標樣各10份，用參比方法對制備樣品分別進行均勻性檢驗。查F檢驗臨界值表可知，均勻性檢驗F臨界值F0.05（9，10）=3.02。甲氧芐啶加標樣品在25 μg/kg和50 μg/kg 2個濃度梯度的F值分別為2.57、2.90，均

3 結論

本文參照《能力驗證樣品均勻性和穩定性評價指南》（CNAS-GL003-2018）對甲氧芐啶評價樣品進行穩定性和均勻性考察。結果顯示，甲氧芐啶制備樣品穩定性、均勻性均符合試劑盒質量評價要求，在14 d考察期內可用于試劑盒質量評價。

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