15%氟啶蟲酰胺·聯苯菊酯懸浮劑的液相色譜法分析

許艷秋，王廣成，安萬霞，吳春先，李 婷，高立明

(1.四川省農藥檢定所，四川成都 610041；2.成都楠光先業科技有限公司，四川成都 610041)

氟啶蟲酰胺(flonicamid)，化學名稱為N-氰甲基-(三氟甲基)煙酰胺，CAS登記號為158062-67-0，是由日本石原產業株式會社開發的新型低毒吡啶酰胺類殺蟲劑，目前已在全球30多個國家登記上市[1]。氟啶蟲酰胺具有良好的滲透作用，通過阻礙害蟲的吮吸作用從而將其餓死，在實際生產中廣泛用于作物蚜蟲等刺吸式口器害蟲的防治[2]。聯苯菊酯(bifenthrin)又名氟氯菊酯，化學名稱為2-甲基聯苯基-3-基甲基(Z)-(1R,3R; 1S,3S)-3-(2-氯-3,3,3-三氟丙-1-烯基)-2,2-二甲基環丙烷羧酸酯，CAS編號82657-04-3，具有觸殺和胃毒作用，無內吸和熏蒸作用，是一種殺蟲譜廣、作用迅速的擬除蟲菊酯類殺蟲劑和殺螨劑[2]。聯苯菊酯與氟啶蟲酰胺進行復配可以彌補氟啶蟲酰胺在速效上的不足[3]，從而達到更好的防治效果。

2020年6月23日，歐盟食品安全局(EFSA)發布消息稱擬制定農作物和動物源食品中氟啶蟲酰胺的進口限量[4]。因此，對氟啶蟲酰胺相關產品質量進行監督和控制十分重要。目前，氟啶蟲酰胺水分散粒劑含量[5]的檢測方法已有文獻報道，聯苯菊酯乳油的檢測方法也有相關標準[6]。然而，其混配制劑的檢測方法卻未見報道。因此本文建立了一種能夠快速有效分離和測定混配制劑中氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯的液相色譜方法，為其質量控制和監督管理提供技術支持。

1 試驗部分

1.1 供試藥劑

氟啶蟲酰胺標準品[質量分數99.3%，國家農藥質檢中心(沈陽)]；聯苯菊酯標準品(質量分數98.5%，上海市農藥研究所有限公司)；15%氟啶蟲酰胺·聯苯菊酯懸浮劑(某公司提供)；乙腈(色譜純，飛世爾科技公司)；超純水(實驗室制備)。

1.2 儀器

Agilent 1260高效液相色譜儀配二極管陣列檢測器(美國安捷倫科技有限公司)；ZORBAX SB-C18不銹鋼柱色譜柱[150 mm×4.6 mm (i.d.)，5 μm，安捷倫科技(中國)有限公司]。

1.3 色譜條件

流動相：乙腈+水，梯度淋洗，淋洗參數如表1所示；流速：1.0 mL/min；柱溫：(30±2) ℃；檢測波長244 nm；進樣體積：5.0 μL。在該色譜條件下，氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯的保留時間分別約為4.1 min和10.3 min。

表1 梯度淋洗參數

上述為典型操作條件，實際操作中可根據儀器自身特點作適當調整，以獲得理想的效果。典型色譜圖見圖1。

圖1 氟啶蟲酰胺+聯苯菊酯標樣(上)和15%氟啶蟲酰胺·聯苯菊酯懸浮劑樣品(下)的色譜圖

1.4 試驗步驟

1.4.1 標準溶液配制

分別準確稱取氟啶蟲酰胺標準品0.06 g (精確至0.000 2 g)、聯苯菊酯標準品0.03 g (精確至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，加入適量乙腈超聲溶解，恢復至室溫后，用乙腈稀釋至刻度，搖勻備用。

1.4.2 試樣溶液的配制

準確稱取15%氟啶蟲酰胺·聯苯菊酯懸浮劑樣品0.6 g (精確至0.000 2 g)，置于50 mL容量瓶中，用約5 mL水稀釋混勻，加入適量乙腈超聲溶解，恢復至室溫后，用乙腈稀釋至刻度，過濾備用。

1.4.3 測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，用標準溶液連續進樣，當相鄰2針樣品峰面積變化小于1.5%后，按標準溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準溶液的順序進樣測定。

1.4.4 計算

根據標準品和樣品溶液中氟啶蟲酰胺(或聯苯菊酯)的峰面積，計算試樣中氟啶蟲酰胺(或聯苯菊酯)的質量分數ω(%)，計算公式如下：

式中：A1為標樣溶液中氟啶蟲酰胺(或聯苯菊酯)峰面積的平均值；A2為試樣溶液中氟啶蟲酰胺(或聯苯菊酯)峰面積的平均值；m1為氟啶蟲酰胺(或聯苯菊酯)標樣的質量，g；m2為試樣的質量，g；p為標樣中氟啶蟲酰胺(或聯苯菊酯)的質量分數，%。

2 結果與討論

2.1 流動相的選擇

根據氟啶蟲酰胺、聯苯菊酯以及懸浮劑的特征，選擇乙腈+水作為溶劑溶解樣品。并以乙腈+水作為流動相，由于氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯極性差別較大，在等度淋洗條件下保留時間差異大，容易造成氟啶蟲酰胺出峰過早，影響目標物與雜質等的分離效果；或聯苯菊酯出峰時間過晚，致使分析時間過長影響試驗效率。因此，本文采用梯度淋洗方式進行洗脫，并優化了梯度淋洗條件(表1)。在該條件下基線平穩，氟啶蟲酰胺、聯苯菊酯和雜質能夠有效地分離，且峰形對稱，保留時間適中，分析時間較短，是理想的分離條件。

2.2 檢測波長的確定

采用DAD檢測器，對氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯標樣在210~400 nm波長下進行紫外掃描，得到其紫外吸收圖(圖2)。由圖2可知，氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯的最大吸收波長分別為265 nm和219 nm。由于吸收波長在219 nm附近可能存在的雜質干擾比較多，而在265 nm時聯苯菊酯的吸收比較差，因此本文選擇氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯紫外吸收曲線的交叉點244 nm作為檢測波長。在此條件下，氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯都有較好的吸收，且無雜質干擾。

圖2 氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯標樣的紫外吸收圖

2.3 分析方法的線性相關性

分別配制5個濃度分別為0.439 1、0.864 4、1.093 8、1.339 1、1.685 3 mg/mL的氟啶蟲酰胺標準溶液，按本文操作條件進行測定。以氟啶蟲酰胺濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標，繪制標準曲線(圖3)。由圖3可見，氟啶蟲酰胺質量濃度與其響應值之間表現出良好的線性相關，其線性回歸方程為y=2 172.3x-3.165 4，相關系數R2=0.999 9。

圖3 氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯的線性關系圖

按照如上方法，配制5個濃度分別為0.360 5、0.516 1、0.638 3、0.758 5、1.138 7 mg/mL的聯苯菊酯標準品溶液進行測定，得到聯苯菊酯的線性回歸方程為y=7 339.2x+28.263，相關系數R2=0.999 2。

2.4 方法精密度

采用本方法對同一批次樣品中氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯的質量分數進行6次平行測定，測試結果見表 2。從表 2可知，氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯的質量分數平均值分別為10.47%和5.38%，標準偏差分別為0.056和0.041，變異系數分別為0.54%和0.76%。

表2 精密度測定結果

2.5 方法準確度

按照配方比例將除原藥以外的所有助劑混勻，配制成15%氟啶蟲酰胺·聯苯菊酯懸浮劑空白樣品，準確稱取空白樣品6份，分別加入一定量的氟啶蟲酰胺標樣、聯苯菊酯標樣，按照上述方法進行回收率測定，結果見表3。由表3可見，在氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯的添加量分別為 59.14~64.78 mg和 30.73~33.98 mg時，其相應的回收率范圍分別為 99.49%~100.50%和99.27%~100.25%，平均回收率分別為99.92%和99.85%。

3 結 論

本文采用高效液相色譜儀建立了同時測定15%氟啶蟲酰胺·聯苯菊酯懸浮劑中有效成分含量的方法。該方法具有分離效果好、出峰時間適中、準確定和精密度高及線性關系好等特點，是一種簡便、快速、準確檢測氟啶蟲酰胺和聯苯菊酯混劑產品中有效成分含量的方法，適用于該類產品的質量控制。