血清TK1、SF、CA199聯合檢測在非小細胞肺癌診斷中的應用價值

楊 雪，許亞麗，張 蕾，古愛虎

在我國，肺癌發病率和病死率逐年上升，占癌癥死亡比例達20%以上[1]。非小細胞肺癌(nonsmall cell lung cancer,NSCLC)發生早期無特異性臨床癥狀，當確診時大多處于中晚期，且容易發生侵襲或轉移，患者5 年生存率較低[2]。胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)是一種DNA 修復酶，最初是在胎兒組織中被發現[3]。TK1 參與DNA 合成與修復，與細胞增殖有關，其可反映腫瘤治療療效和復發風險，在多種實體腫瘤中呈現高表達，這可能與腫瘤細胞轉化存在關聯[4]。TK1作為常見的腫瘤標志物，其在血清或胸腔積液中的變化在早期肺癌篩查中具有重要意義。血清鐵蛋白(serum ferritin,SF)一種以無機鐵化合物為輔基的大分子糖蛋白，通常在腫瘤患者體內合成活躍，使得濃度急劇增加，常作為腫瘤的血清標志物[5]；越來越多的研究提示SF 對肺癌的診斷靈敏度較高[6]。糖類抗原199(carbohydrate antigen 199,CA199)以唾液黏蛋白的形式存在于血清中，在正常情況下，外周血中含量極低，但當發生腫瘤細胞異常分化時，血清CA199水平會明顯上升[7]。CA199 在NSCLC 患者癌組織中的表達明顯多于癌旁組織[8]，這對早期診斷肺癌有重要價值。NSCLC 患者早發現、早診斷及早治療，已成為提高疾病療效、降低病死率和提高生存質量的關鍵。血清腫瘤標志物檢測作為非侵襲性檢查，為早診斷早治療提供了可能，單一指標檢測難滿足臨床精準診斷，且三項指標聯合檢測的研究尚缺乏。因此本研究旨在探討血清TK1、SF、CA199聯合檢測對于NSCLC診斷的臨床應用價值，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料 選取2017 年1 月-2021 年12 月蕪湖市第一人民醫院收治的90例NSCLC 患者作為研究對象。納入標準：①均經過胸部CT 檢查及病理學檢查確診；②在獲取血清實驗檢測前患者無放化療史。排除標準：①嚴重心肝腎疾病；②合并其他惡性腫瘤；③感染性疾病；④免疫系統疾病。NSCLC組有男性49 例，女性41 例；年齡40～82 歲，平均(61.34±8.70)歲；病理分型：鱗癌45 例，腺癌40 例，其他5 例；TNM 分期：I 期12 例，II 期34 例，III 期25例，IV 期19 例；分化程度：42 例低分化，29 例中分化，19 例高分化。選取同期收治的肺部良性疾病患者患者90例作為良性疾病組，有男性48例，女性42 例；年齡39～82 歲，平均(62.27±6.33)歲。選取同期到我院進行健康體檢的人群90 例作為對照組，有男性49 例，女性41 例；年齡38～82 歲，平均(61.53±5.16)歲。3 組研究對象的一般資料差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經過本院醫學倫理委員會批準（編號：20160108），所有患者均知情同意。

1.2 檢測方法 抽取所有患者清晨空腹靜脈血5 mL，室溫靜置1 h，離心儀（貝克庫曼爾特，Microfuge 20R）以3 800 r/min，離心半徑8 cm，離心10 min 后分離獲得血清。采用TK-1 檢測試劑盒（上海臻科生物科技有限公司）對TK-1 進行檢測，檢測方法為化學發光法。使用全自動化學發光分析儀（安圖公司，Auto-mo A2000）檢測CA199及SF水平。聯合檢測的陽性標準為三項指標有一項或一項以上檢測結果為陽性即為陽性。

1.3 統計學處理 應用SPSS 23.0 軟件對數據結果進行分析，計量資料以均數±標準差()表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗；三組比較采用方差分析(F檢驗)，進一步兩兩比較采用SNK-q 檢驗。計數資料用[n(%)]表示，組間比較采用χ2檢驗。采用多因素Logistic回歸分析篩選NSCLC疾病的獨立危險因素。診斷效能評價以靈敏度、特異度、準確度表示，以病理診斷為金標準來分析，計算各診斷效能指標，同時制作受試者工作特征(ROC)曲線，并計算曲線下面積。當P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組間一般資料比較 三組研究對象的年齡、性別均無統計學意義，具有可比性。在病理分型、TNM 分期、分化程度方面比較差異有統計學意義(χ2=5.551、4.541、4.530，P＜0.05)。見表1。

表1 三組研究對象一般資料比較[n(%)]

2.2 三組間血清TK1、SF、CA199水平的比較 NSCLC組患者血清TK1、SF、CA199 水平均顯著高于良性疾病組和對照組(F=32.274、27.783、20.135，均P＜0.05)。與對照組比較，良性疾病組患者血清SF 水平高于對照組（P＜0.05），TK1、CA199 水平無統計學差異。見表2。2.3 Logistic 多因素回歸分析 以是否患有NSCLC疾病作為因變量（否=0、是=1），以TK1、SF、CA199等單因素分析有統計學意義的檢驗指標為自變量，采用逐步回歸法進行二元多因素Logistic 回歸分析，結果顯示，TK1、SF、CA199 是影響患者患有NSCLC疾病的獨立危險因素(OR=1.589、1.384、1.493，P＜0.05)，得到的Logistic 回歸方程為Pre=1/[1+e-(0.463*TK1+0.325*SF+0.401*CA)]。見表3。

表2 三組間血清TK1、SF、CA199水平的比較

表3 影響NSCLC的多因素Logistic回歸分析

2.4 三者聯合對NSCLC 診斷價值的比較 應用ROC 曲線分別對TK1、SF、CA199 以及Logistic 回歸方程得到的聯合指標Pre 進行ROC 曲線分析，其中聯合指標Pre 的ROC 曲線下面積最大，表明該聯合指標的區分度較其他三個診斷模型更好。

此外，表4 為這4 個指標診斷NSCLC 的靈敏度、特異度及準確度。其中，聯合指標Pre 的診斷靈敏度、特異度及準確度最高，分別為82.8%、77.8%、88.5%，顯著高于利用TK1、SF 及CA199 單獨診斷的結果(P＜0.05)。

表4 4個指標對NSCLC診斷價值的比較(%)

圖1 4個指標對NSCLC的ROC的曲線分析

3 討論

NSCLC是最常見的一種肺癌類型，約占肺癌患者的80%以上。NSCLC 具有早期隱匿、缺乏典型性的特點，因此其早期診斷率很低，導致疾病的預后差、病死率高[9]。目前臨床上組織病理學檢測的特異性較高，但是該方法是一種侵入性操作，取材難度較大，患者的耐受性差，導致靈敏度不高。近年來，隨著分子生物學的快速發展，通過對腫瘤標志物的檢測，能有效對腫瘤疾病進行篩查、診斷、效果評估及預后監測，該方法操作簡單，且患者創傷小，對臨床有重要應用價值[10]。

TK 是嘧啶代謝循環中的一類關鍵酶，可催化脫氧胸苷形成脫氧胸苷酸，屬于DNA 修復酶，與細胞增殖有關，當TK1 含量和活性增加時，細胞DNA合成速度加快，在多種實體腫瘤中均可檢測到高表達[11]。王總飛等[12]研究表明，NSCLC 患者血清SF、基質金屬蛋白酶9(MMP-9)、STK1水平明顯上升，三者之間呈正相關，協同參與NSCLC 的發生、進展。SF 是人體內鐵代謝的重要蛋白質，血清鐵主要存在于肝、脾、骨髓中，在健康人體內，血清SF 含量很少，當發生炎癥、慢性疾病、惡性腫瘤時，SF 表達會上升[13]。NSCLC 患者血清SF 水平高表達直接影響了腫瘤增殖和侵襲[14]。莫飛等[15]研究表明，肺癌患者的SF 水平顯著升高，聯合其他腫瘤標志物可顯著提高診斷特異度和準確度。CA199 是一種黏蛋白型糖類抗原，無器官特異性、也無腫瘤特異性，起血清含量在多種惡性腫瘤中均顯著升高。在正常情況下，血清中CA199 含量極低，但是出現腫瘤細胞的異常分化情況時，CA199會大量合成進入外周血[16]。王莉等[17]研究表明，NSCLC 組患者CA199 水平顯著高于肺良性病變組與健康對照組；Ⅲ～Ⅳ期NSCLC 患者CA199 水平顯著高于Ⅰ～Ⅱ期；生存時間≥1 年患者CA199 水平顯著低于生存時間＜1 年患者，CA199 聯合其他指標的檢測對NSCLC 的早期診斷、分期及預后判斷具有一定臨床價值。

本文研究結果表明，NSCLC 組患者血清TK1、SF、CA199 水平均顯著高于良性疾病組和對照組，提示TK1、SF、CA199與NSCLC疾病有密切關系，同時血清腫瘤標志物的檢測對NSCLC 的輔助診斷具有一定鑒別意義。回歸分析發現TK1、SF、CA199是影響患者患有NSCLC 疾病的獨立危險因素，這可能原因是TK1參與細胞周期調控，與腫瘤細胞的轉化有關，其能導致S 期調控異常，G/S 期時，TK1水平持續上升，到M 期時水平達到最高值[18]；致癌因子能影響機體的鐵代謝過程，導致鐵排出量減少，鐵儲備量增多，因此血清SF 升高；腫瘤細胞會合成大量CA199，并隨著癌細胞的凋亡進入外周血，導致其血清水平上升。以上三項指標與NSCLC的發生、發展均有密切聯系，但是通過不同的途徑，后續有待進一步研究。本研究探討了TK1、SF 及CA199 三者聯合檢測對于NSCLC 診斷的臨床價值，結果顯示，3 項指標聯合檢測的AUC 最大，為0.845，三指標聯合靈敏度、特異度及準確度分別為82.8%、77.8%、88.5%，這均顯著高于TK1、SF 及CA199 單獨診斷結果。說明三者聯合檢測對NSCLC 的診斷價值及臨床效能評價均優于三指標單獨檢測，本研究認為，聯合檢測能夠起到互補作用，提高診斷敏感度和準確度，三者聯合檢測時對NSCLC的診斷更具有價值，這可能作為臨床篩查和治療NSCLC提供新的參考指標和方案。

綜上所述，血清TK1、SF 及CA199 聯合檢測對NSCLC早期診斷具有重要的臨床意義；聯合檢測對于早期發現、早期干預以及提高NSCIC患者的生存期具有一定的臨床指導性價值。