呼吸道腺病毒感染兒童血清PCT、SAA、25(OH)D的檢測(cè)及臨床意義

曾洲榆，官燕飛，倪文鵬，柯家龍，張熾倫

廣東省中山市博愛(ài)醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東中山 528403

腺病毒感染多發(fā)于兒童時(shí)期，發(fā)生率較高。呼吸道腺病毒感染易使機(jī)體發(fā)生細(xì)胞因子與淋巴細(xì)胞亞群紊亂，嚴(yán)重者可致全身炎癥反應(yīng)綜合征。故尋找有效判斷呼吸道腺病毒感染的血清學(xué)指標(biāo)對(duì)早期診斷發(fā)現(xiàn)疾病具有重要價(jià)值。呼吸道病毒感染的嚴(yán)重程度一般不由病毒本身決定，機(jī)體對(duì)病毒產(chǎn)生的免疫應(yīng)答才是影響感染后嚴(yán)重程度的主要原因。腺病毒感染后，機(jī)體體液免疫通過(guò)分泌抗體來(lái)保護(hù)組織器官，細(xì)胞免疫則作用于病毒內(nèi)蛋白而使感染終止，對(duì)抗腺病毒感染具有重要作用[1-2]。降鈣素原(PCT)為降鈣素的前體物質(zhì)，機(jī)體發(fā)生感染后在細(xì)菌內(nèi)毒素誘導(dǎo)下，血清中PCT水平迅速上升；淀粉樣蛋白A(SAA)為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，在健康人群體內(nèi)水平極低，發(fā)生感染后其水平急劇上升[3-4]。維生素D為脂溶性維生素，與機(jī)體免疫功能、炎性反應(yīng)等過(guò)程有關(guān)，25羥基維生素D[25(OH)D]為評(píng)估機(jī)體維生素D營(yíng)養(yǎng)狀況的最佳指標(biāo)[5]。本研究對(duì)本院呼吸道腺病毒感染患兒血清PCT、SAA、25(OH)D水平進(jìn)行檢測(cè)，以了解其血清水平并評(píng)估腺病毒感染特征。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019年2月至2021年3月于中山市博愛(ài)醫(yī)院住院患兒作為研究對(duì)象，臨床表現(xiàn)為咳嗽發(fā)熱、氣促、咽痛。分別采用間接酶聯(lián)免疫法及免疫熒光法檢測(cè)腺病毒IgM抗體與腺病毒抗原，將二者檢測(cè)結(jié)果均為陽(yáng)性的110例患兒納入腺病毒感染組，其中男61例，女49例；年齡為6個(gè)月至5歲，平均(29.57±9.12)個(gè)月。同期選取100例于本院體檢的健康兒童作為對(duì)照組，其中男57例，女43例；年齡為7個(gè)月至5歲，平均(30.05±9.72)個(gè)月。兩組一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2儀器與試劑 腺病毒IgM抗體來(lái)源于比爾塞有限公司；腺病毒抗原檢測(cè)試劑盒購(gòu)自海德診斷有限公司；Roche Cobas E601全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光儀來(lái)源于羅氏公司；干式熒光免疫分析儀為梅里埃全自動(dòng)熒光酶免疫分析儀；SAA試劑來(lái)源于廣州市微米生物科技有限公司。

1.3方法 腺病毒IgM抗體檢測(cè)：于清晨抽取患兒空腹靜脈血，離心后取其血清冷藏備用；采用間接酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清腺病毒IgM抗體，操作參考IgM抗體檢測(cè)試劑盒要求，結(jié)果呈陽(yáng)性標(biāo)本納入備選。腺病毒抗原檢測(cè)：取患兒鼻咽分泌物制成涂片，采用異硫氰酸熒光素標(biāo)記的針對(duì)腺病毒鼠單克隆抗體檢測(cè)腺病毒抗原，通過(guò)熒光顯微鏡觀察，以觀察到超過(guò)2個(gè)完整細(xì)胞有明亮黃綠色熒光作為陽(yáng)性，反之為陰性[6]。PCT、SAA、25(OH)D檢測(cè)：抽取患兒清晨空腹靜脈血，離心后備用；采用梅里埃全自動(dòng)熒光酶免疫分析儀及其配套試劑檢測(cè)血清PCT；使用干式熒光免疫分析儀測(cè)定SAA水平；采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清25(OH)D水平。

2 結(jié) 果

兩組血清PCT、SAA、25(OH)D水平比較 腺病毒感染組血清PCT、SAA水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，25(OH)D水平低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組血清因子水平比較

3 討 論

腺病毒為雙鏈DNA無(wú)包膜病毒，首先從人腺樣組織培養(yǎng)物中分離出，分為6個(gè)亞群，共47個(gè)血清型。呼吸道感染為哮喘的主要誘因，病毒感染與哮喘發(fā)生密切相關(guān)。兒童由于呼吸系統(tǒng)生理與解剖結(jié)構(gòu)未發(fā)育成熟而較易發(fā)生呼吸道感染，腺病毒感染患兒病死率高且后遺癥程度重，對(duì)兒童健康成長(zhǎng)有嚴(yán)重影響，及時(shí)掌握呼吸道腺病毒感染特點(diǎn)及血清學(xué)變化和早期診斷并采取及時(shí)有效的治療方式對(duì)兒童成長(zhǎng)具有重要價(jià)值[7-8]。呼吸道腺病毒感染易導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)細(xì)胞因子與淋巴細(xì)胞亞群紊亂，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)綜合征。機(jī)體細(xì)胞免疫功能?chē)?yán)重下降時(shí)，相關(guān)細(xì)胞因子瀑布效應(yīng)出現(xiàn)及伴隨趨化因子參與，可導(dǎo)致整個(gè)免疫應(yīng)答網(wǎng)絡(luò)失控，加重全身炎癥反應(yīng)綜合征，發(fā)生膿毒血癥，病情惡化，引起多臟器功能不全綜合征。人體感染腺病毒后可通過(guò)體液免疫分泌出抗體以保護(hù)氣管等組織器官，還能通過(guò)細(xì)胞免疫作用于病毒內(nèi)部蛋白以抵御病毒感染。及時(shí)治療可促使患兒自身免疫調(diào)控恢復(fù)，促進(jìn)免疫應(yīng)答平衡，進(jìn)而治愈腺病毒感染。故研究腺病毒感染患兒免疫應(yīng)答變化情況對(duì)闡明腺病毒感染致病機(jī)制及腺病毒感染患兒治療具有重要作用[9]。

PCT是由116個(gè)氨基酸組成的糖蛋白屬于降鈣素前體，細(xì)菌脂多糖短期內(nèi)可誘導(dǎo)PCT大量生成，支原體與病毒感染后分泌的白細(xì)胞介素對(duì)PCT分泌具有阻斷作用，可導(dǎo)致其分泌量下降。PCT水平變化與細(xì)菌感染密切相關(guān)，對(duì)細(xì)菌感染性疾病診斷與治療具有一定價(jià)值，全身感染4 h后在促炎因子及內(nèi)毒素作用下PCT水平可逐漸上升，在6～24 h內(nèi)穩(wěn)定在高水平，不受激素與藥物影響，早期PCT水平上升后經(jīng)抗感染治療能降低其水平，故PCT為臨床中診斷感染性疾病的有效指標(biāo)[9-10]。早期健康人體中含有極低量的PCT，不受惡性腫瘤本身影響，當(dāng)發(fā)生細(xì)菌感染后2～3 h體內(nèi)PCT水平逐漸升高，與感染程度呈正相關(guān)，而在病毒感染時(shí)不升高。

SAA是由104個(gè)氨基酸組成的多肽，主要產(chǎn)生于肝臟，為敏感性較高的急性反應(yīng)蛋白，可反映機(jī)體炎癥程度，通過(guò)降低巨噬細(xì)胞與T淋巴細(xì)胞水平以減輕組織器官炎癥損傷。健康患兒體內(nèi)SAA水平極低，當(dāng)受到支原體、細(xì)菌等侵襲后，肝細(xì)胞產(chǎn)生大量SAA[11-12]。有研究顯示，研究組PCT、SAA水平明顯高于對(duì)照組，提示血清PCT與SAA可作為感染性疾病診斷參考指標(biāo)[13]。維生素D為機(jī)體內(nèi)重要類(lèi)固醇激素，在肺組織中能被激活，也能調(diào)節(jié)免疫功能，且可加速誘導(dǎo)肺部免疫應(yīng)答機(jī)制，減輕炎性反應(yīng)。機(jī)體正常免疫調(diào)節(jié)需通過(guò)淋巴亞群維持，維生素D能刺激中性粒細(xì)胞、呼吸道上皮細(xì)胞等表達(dá)以預(yù)防呼吸道感染[14]。25(OH)D3為體內(nèi)維生素D活性代謝產(chǎn)物，具有穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，能促進(jìn)骨代謝并維持鈣平衡，且能參與機(jī)體免疫調(diào)節(jié)。25(OH)D為反映機(jī)體維生素D儲(chǔ)備的存在形式，主要有25(OH)D2與25(OH)D3兩種亞型，多數(shù)研究以25(OH)D3水平表示機(jī)體內(nèi)維生素D水平。25(OH)D3可減輕肺泡嗜酸性粒細(xì)胞浸潤(rùn)程度并降低氣道高反應(yīng)性，當(dāng)25(OH)D3呈低表達(dá)狀態(tài)可導(dǎo)致肺抗感染能力下降，進(jìn)而誘導(dǎo)哮喘等疾病發(fā)生、發(fā)展。本研究中，腺病毒感染組血清25(OH)D水平低于對(duì)照組，說(shuō)明患兒體內(nèi)維生素D水平較低時(shí)，外周免疫球蛋白水平較低，呼吸道抵抗力下降，呼吸道感染可能增加。當(dāng)體內(nèi)維生素D水平上升時(shí)機(jī)體自身免疫力提高，這有助于腺病毒感染好轉(zhuǎn)，提示維生素D水平對(duì)腺病毒感染預(yù)測(cè)具有一定價(jià)值[15]。

綜上所述，與健康兒童相比，呼吸道腺病毒感染患兒血清PCT、SAA水平上升，25(OH)D水平下降，早期檢測(cè)對(duì)及早診斷和及時(shí)治療具有積極意義。