基于多重?zé)晒舛縋CR技術(shù)快速檢測桶裝水中大腸埃希氏菌和銅綠假單胞菌

◎ 龍 慧，帥淑芬，龍永艷，王 偉，吳 葵，鐘 淙

（南昌市疾病預(yù)防控制中心，江西 南昌 330038）

近年來，桶裝水安全備受關(guān)注，全國各地區(qū)針對桶裝水衛(wèi)生狀況進行監(jiān)測發(fā)現(xiàn)多處不合格。2014—2015年湖北省對桶裝飲用水微生物污染情況進行分析，結(jié)果顯示209批次桶裝飲用水總合格率僅為54.07%，其中菌落總數(shù)不合格率為44.50%、大腸菌群不合格率為8.61%[1]；2016—2017年海南省調(diào)研了桶裝飲用水微生物污染情況，結(jié)果顯示2016年桶裝純凈水的不合格率為10.8%、2017年桶裝純凈水的不合格率為12.9%，且銅綠假單胞菌和大腸菌群為主要污染源[2]；2019年廣西欽州市對桶裝飲用水銅綠假單胞菌污染狀況進行監(jiān)測，結(jié)果顯示銅綠假單胞菌檢出率為26.4%[3]。桶裝飲用水是人們生活中的必需品，加強衛(wèi)生監(jiān)督，保障公眾健康，監(jiān)測桶裝水的微生物安全勢在必行。

大腸埃希氏菌（Escherichia coli，E. coli）作為最有效的糞便指示菌，能夠直接預(yù)測桶裝水是否受到糞便污染[4-5]；銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa，P.aeruginosa）又稱綠膿桿菌，是社區(qū)水源性疾病感染的重要源頭[6-8]。根據(jù)相關(guān)研究報道，人類外露組織接觸或者誤吞食受到大腸埃希氏菌和銅綠假單胞菌污染的桶裝水，容易引起腹瀉、腹部絞痛、眼角膜炎、組織炎癥等疾病[9-11]。因此建立快速、有效的檢測方法對于監(jiān)測桶裝水中大腸埃希氏菌和銅綠假單胞菌污染具有重要意義。聚合酶鏈式反應(yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）是一種核酸信號放大技術(shù)[12]，通過特異性的引物，在聚合酶的催化下能夠在短時間內(nèi)實現(xiàn)信號放大。普通PCR技術(shù)需要對PCR產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳進行檢測，而新型熒光定量PCR技術(shù)通過熒光探針，能夠?qū)崿F(xiàn)實時熒光定量檢測[13]。……