miR-21調(diào)控gp130/JAK2對心肌梗死大鼠心室重構(gòu)、JNK信號通路及心肌保護(hù)的作用

馮月英 施惠華 戴蓉芳

心血管疾病發(fā)生與心肌梗死的發(fā)生密切相關(guān)，心肌梗死(myocardial infarction,MI)是心血管高發(fā)疾病，隨著生活壓力增加及生活習(xí)慣的改變，MI發(fā)病率逐漸升高并呈現(xiàn)年輕化趨勢，致死率較高嚴(yán)重威脅人們的生命安全[1,2]。心肌梗死及缺血性心臟疾病均可以導(dǎo)致心臟功能不全，受神經(jīng)內(nèi)分泌及細(xì)胞內(nèi)通路等因素改變會誘發(fā)心肌細(xì)胞與膠原網(wǎng)狀支架及細(xì)胞外基質(zhì)等發(fā)揮一系列形態(tài)結(jié)構(gòu)改變及功能重構(gòu)[3]。心室重構(gòu)發(fā)生發(fā)展與多種基因表達(dá)異常相關(guān)，Gp130是白介素-6家族受用的受體信號及傳導(dǎo)子，在全身組織內(nèi)均有所表達(dá)，在心肌細(xì)胞中可被檢測到，并可通過與上游相關(guān)配體結(jié)合后激活下游因子可加快心臟重構(gòu)[4]。Janus酪氨酸激酶(Janus kinase,JAK)屬于一類非受體型酪氨酸激酶，JAK2是其下游成員之一，在心血管發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。相關(guān)研究認(rèn)為，JAK2活性被抑制可誘導(dǎo)心肌組織損傷，進(jìn)一步參與心肌梗死及心力衰竭等相關(guān)疾病發(fā)生發(fā)展[5]。c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)是重要的絲裂原活化蛋白激酶，可發(fā)揮細(xì)胞信號內(nèi)外傳導(dǎo)作用并可調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、發(fā)育及死亡等多種生理反應(yīng)過程。在心肌梗死中JNK表達(dá)升高可增加心肌細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷加快凋亡[6]。文獻(xiàn)證實(shí)，在缺血心肌梗死的大鼠心肌組織中檢測出多種miRNA水平異常，其中miR-21水平顯著高于健康人，說明miR-21表達(dá)降低可增加后心肌損傷[7]。miR-21屬于miRNAs其中之一，起初被認(rèn)為具有加快癌細(xì)胞增殖擴(kuò)散的作用，目前已經(jīng)證實(shí)在心臟、肝脾及腸道組織中均發(fā)揮作用。研究表示，miR-21是心臟特異性小分子RNA，在成人心臟中有所表達(dá)，當(dāng)發(fā)生心肌梗死時(shí)miR-21激活可減少心臟重構(gòu)[8]。觀察miR-21通過調(diào)控gp130/JAK2對心肌梗死大鼠心室重構(gòu)、JNK信號通路及心肌保護(hù)的作用，為心肌梗死的臨床治療提供參考方法。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)大鼠 實(shí)驗(yàn)中均為(Sprague Dawley)成年40只雄性大鼠，體重240～260 g，鼠齡4～5周，在廣東省醫(yī)學(xué)SD大鼠中心購買。動物許可證號：SYXK(粵)2019-0020，在通風(fēng)且干凈的環(huán)境中對大鼠進(jìn)行飼養(yǎng)，5只大鼠1個(gè)籠子，溫度23℃左右，濕度50%左右，黑夜白晝交替循環(huán)，自由進(jìn)食標(biāo)準(zhǔn)顆粒飼料，飲干凈飲用水。于開始實(shí)驗(yàn)前，適應(yīng)環(huán)境飼養(yǎng)1周。動物實(shí)驗(yàn)的實(shí)施嚴(yán)格遵照《實(shí)驗(yàn)動物護(hù)理和使用指南》，在所有實(shí)驗(yàn)中嚴(yán)格遵守國際疼痛學(xué)會使用指南，盡可能減少大鼠的使用量，對大鼠的傷害以及導(dǎo)致的痛苦都相應(yīng)減少。

1.2 主要試劑與儀器 miR-21-mimics、miR-21-NC-mimics(上海吉凱科技公司)；TRIzol 試劑(美國 Sigma-Aldrich公司)；GP130抗體(Abcam)；兔抗人JAK2抗體(Abcam)；JNK抗體(圣克魯斯生物技術(shù)有限公司)；山羊血清小鼠IgG二抗(北京百奧萊公司)；蘇木素-伊紅試劑盒(南京生航生公司)；FlexiWash全自動蛋白質(zhì)免疫印跡系統(tǒng)(環(huán)亞生物科技)；心電圖(上海海哲儀器設(shè)備有限公司)；反轉(zhuǎn)錄試劑盒試劑盒、TB GreenTM Premix ExTaqTMⅡ熒光定量試劑盒(日本Takala公司)。

1.3 心肌梗死建模方法 大鼠測量體重，清除氣管分泌物，腹腔注射60 mg/kg的阿托品，5 mg/kg的安定及30 mg/kg的氯胺酮麻醉，仰臥位后固定于操作臺上，暴露胸部連接小動物呼吸機(jī)，剔除左側(cè)胸腔毛發(fā)消毒后在第四、五肋間切開皮膚，置入開胸器暴露心臟，剪開心包，于肺動脈及左側(cè)心耳距離主動脈根部0.2 cm分別用4-0線及8-G手術(shù)針結(jié)扎左冠狀動脈前降支，建立心肌梗死模型，撤離開胸器，青霉素沖洗胸腔后2-0線縫合皮膚，大鼠清醒后拔出呼吸機(jī)。sham組除不結(jié)扎左冠狀動脈前降支外其余同上。

1.4 分組及干預(yù)方法 40只大鼠按照隨機(jī)數(shù)字方法分為4組，sham組、MI組、NC組及實(shí)驗(yàn)組，均10只。建模成功后30 min，NC組及實(shí)驗(yàn)組分別在冠狀動脈注射miR-21-NC及miR-21-mimics病毒載體，sham組及MI組用大鼠心臟冠狀動脈注射PBS緩沖液。

1.5 組織提取 上述實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，采用頸部脫臼處死大鼠，取大鼠心臟，剔除周圍組織置入甲醛溶液中固定，組織切片石蠟包埋，HE染色，200倍顯微鏡觀察大鼠心肌組織病理情況。

1.6 PCR檢測心肌組織中miR-21、GP130、JAK2及JNK mRNA 心肌組織研磨，加入0.125%胰蛋白酶消化，1 000 r/min分離20 min，采用Trizol法提取總RNA，無核酸酶溶解。將提取的RNA進(jìn)行轉(zhuǎn)錄為cDNA，獲得反體系，條件為：42℃作用60 min，72℃作用5 min，4℃終點(diǎn)。每個(gè)細(xì)胞設(shè)置6個(gè)復(fù)孔，以β-actin為內(nèi)參，反應(yīng)條件為95℃預(yù)作用3 min，95℃作用5 s，58℃退火，40個(gè)循環(huán)，用2-ΔΔCt的方法計(jì)算相對表達(dá)量。見表1。

表1 引物序列

1.7 TTC 染色觀察大鼠心肌組織梗死情況 4組大鼠心肌組織以PBS沖洗，沿著冠狀方向切為5片，1%的TTC染色液染色20 min，隨后放入4%多聚甲醛中固定24 h，以白色為梗死部位，Image-J軟件分析梗死面積，梗死面積 =白色區(qū)域/總面積× 100%。

1.8 膠原容積分?jǐn)?shù)測定 取心臟非心肌梗死區(qū)心肌組織，通過 HPIAS2000型醫(yī)學(xué)圖象分析系統(tǒng)對心肌膠原容積分?jǐn)?shù)(CVF)進(jìn)行測量，同時(shí)測量心肌血管周圍膠原面積(PVCA)。測量計(jì)算公式如下：CVF=心肌膠原面積/所測視野面積，PVCA=小動脈管腔周圍膠原面積/管腔面積，每張切片標(biāo)本中隨機(jī)選取4個(gè)非邊緣視野進(jìn)行測量，取其平均值為結(jié)果。

1.9 TUNEL法檢測心肌組織心肌細(xì)胞凋亡率 石蠟包裹的心臟進(jìn)行切片，逐層乙醇脫水，加入PBS沖洗，沖洗5 min，反復(fù)3次，加入2020 μg/ml的蛋白酶K溶液，在23℃下進(jìn)行孵育30 min，PBS沖洗后，放入3%的H2O2，15 min后再次PBS沖洗，擦片后放入50 μl的TUNEL反應(yīng)液，37℃下孵育60 min。PBS沖洗，加入50 μl轉(zhuǎn)化劑POD、DAB顯色，采用蘇木精進(jìn)行復(fù)染色3 min，0.2%氨水反藍(lán)，逐層乙醇脫水，最后二甲苯透明樹脂封片，心肌細(xì)胞非凋亡呈現(xiàn)藍(lán)色，凋亡呈現(xiàn)棕黃色，每張切片選擇5個(gè)非重疊視野，計(jì)算心肌細(xì)胞凋亡率。心肌細(xì)胞凋亡率=凋亡/總細(xì)胞×100%。

1.10 免疫印跡檢測心肌組織GP130、JAK2及JNK抗體蛋白的水平 取適量蛋白樣品，經(jīng)十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠，電泳分離后轉(zhuǎn)移，轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上，再次浸于5%脫脂奶粉中封閉，37℃下孵育1 h，加入GP130(1∶500)、JAK(1∶600)及JNK(1∶300)及GAPDH抗體(1∶1 000)、過氧化物酶標(biāo)記二抗(1∶2 000)，雜交處理4 h后，經(jīng)化學(xué)發(fā)光后觀察蛋白條帶，利用Image J軟件進(jìn)行灰度分析，計(jì)算蛋白表達(dá)量。

1.11 細(xì)胞缺氧模型構(gòu)建及干預(yù)方法 將心肌細(xì)胞培養(yǎng)基植入低氧環(huán)境中，后通入5%N2+5%CO2混合氣體4 h，流速為2 L/min，與低糖培養(yǎng)基重復(fù)混合后，加入飽和無血清培養(yǎng)基，后將細(xì)胞放入37℃無氧環(huán)境下繼續(xù)培養(yǎng)4 h備用。將建立缺氧模型的心肌細(xì)胞分別加入miR-21-NC及miR-21-mimics轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染方法：將數(shù)量為1×104個(gè)心肌細(xì)胞，在EP管中放入200 μl轉(zhuǎn)染液體和4 μl脂質(zhì)體，后加入5 μg的 miR-21-NC及miR-21-mimics轉(zhuǎn)染，充分混合后，轉(zhuǎn)染6 h后備用。

1.12 熒光酶素報(bào)告 從人類基因組DNA產(chǎn)生全長GP130、JAK2,并通過退火合成的信號寡核苷酸產(chǎn)生突變體GP130′UTR、JAK2′UTR。DNA片段克隆到ph-TK載體，GP130′UTR WT、JAK2′UTR WT為野生型，GP130′UTR MUT、JAK2′UTR MUT為突變型，均轉(zhuǎn)染到細(xì)胞內(nèi)，同時(shí)使用pGL-3.0(熒光素酶)作為內(nèi)參照。使用 Lipofectamine 2000 TM檢測轉(zhuǎn)染效率在孢菌素酶活性的基礎(chǔ)上正常化。按照說明書，使用雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)試劑盒測量miR-21對GP130、JAK2的表達(dá)活性的調(diào)控能力。

2 結(jié)果

2.1 4組大鼠心肌組織中miR-21mRNA表達(dá)比較 與sham組相比，MI組大鼠心肌組織中miR-21表達(dá)降低(P<0.05)，MI組及NC組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，與NC組相比，實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌組織中miR-21表達(dá)升高(P<0.05)。見表2。

表2 4組大鼠心肌組織中miR-21水平表達(dá)比較

2.2 4組大鼠心肌組織梗死面積比較 sham組、MI組、NC組及實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌梗死面積分別為(2.51±0.33)%、(31.25±4.15)%、(30.66±3.85)%及(14.36±2.06)%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與sham組比較，MI組大鼠心肌梗死面積增加(P<0.05)，MI組與NC組心肌梗死面積比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，與NC組比較，實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌梗死面積降低(P<0.05)。

2.3 4組大鼠非梗死區(qū)域的PVCA和CVF比較 與sham組比較，MI組非梗死區(qū)域的PVCA和CVF增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，MI組與NC組非梗死區(qū)域的PVCA和CVF無差異(P>0.05)，與NC組比較，實(shí)驗(yàn)組大鼠非梗死區(qū)域的PVCA和CVF降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 4組大鼠非梗死區(qū)域的PVCA和CVF比較

2.4 大鼠心肌組織病理形態(tài)比較 Sham組大鼠心肌細(xì)胞排列整齊，結(jié)構(gòu)完整，無炎癥浸潤；MI組及NC組大鼠心肌細(xì)胞紊亂及數(shù)目減少，排列紊亂出現(xiàn)大量肌肉絲溶解及炎癥浸潤，與NC組比較，實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌細(xì)胞紊亂有效改善，炎癥浸潤逐漸降低。見圖1。

圖1 4組大鼠心肌組織病理形態(tài)比較(HE染色×200)

2.5 4組大鼠心肌細(xì)胞凋亡率比較 sham組、MI組、NC組及實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌細(xì)胞凋亡率分別為(1.33±0.20)%、(30.10±2.33)%、(29.66±1.70)%及(16.20±1.85)%，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。進(jìn)一步兩兩比較，與sham組比較，MI組、NC組和實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌細(xì)胞凋亡率均增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，MI組與NC組心肌細(xì)胞凋亡率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，與實(shí)驗(yàn)組比較，MI組和NC組大鼠心肌細(xì)胞凋亡率均較高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見圖2。

圖2 4組大鼠心肌細(xì)胞凋亡率比較(TTC 染色×200)

2.6 4組大鼠心肌組織中GP130、JAK2及JNK蛋白比較 與sham組比較，MI組大鼠心肌組織GP130及JNK蛋白升高，JAK2蛋白降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，MI組與NC組心肌組織GP130蛋白、JNK蛋白、JAK2蛋白差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，與NC組比較，實(shí)驗(yàn)組大鼠心肌組織GP130及JNK蛋白降低，JAK2蛋白升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4，圖3。

表4 4組大鼠心肌組織中GP130、JAK2及JNK蛋白比較

圖3 4組大鼠心肌組織中GP130、JAK2及JNK蛋白比較

2.7 RT-PCR檢測4組大鼠心肌組織GP130、JAK2及JNK mRNA比較 與sham組比較，MI組大鼠心肌組織GP130及JNK mRNA升高，JAK2 mRNA降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，MI組與NC組心肌組織GP130 mRNA、JNK mRNA，JAK2 mRNA無差異(P>0.05)，與NC組比較，實(shí)驗(yàn)組GP130 mRNA及JNK mRNA降低，JAK2 mRNA升高(P<0.05)。見表5。

表5 4組大鼠心肌組織GP130、JAK2及JNK mRNA比較

2.8 熒光素酶結(jié)果 為了明確miR-21相關(guān)基因，使用生物信息學(xué)發(fā)現(xiàn)miR-21與GP130、JAK2存在相互結(jié)合的序列，兩者之間存在調(diào)控關(guān)系。為了驗(yàn)證miR-21與GP130、JAK2的3′UTR結(jié)合，將兩者均轉(zhuǎn)染到心肌缺氧細(xì)胞中，通過上調(diào)miR-21觀察對GP130、JAK2的熒光活性變化，證實(shí)：增加miR-21能夠抑制GP130活性，激活JAK2表達(dá)，miR-21能與GP130、JAK2的3′UTR特異性結(jié)合。見表6。

表6 熒光素酶報(bào)告

3 討論

機(jī)體受先天及后天因素影響可導(dǎo)致心肌組織損傷，在此過程基因組發(fā)生一定程度的改變，基因改變會導(dǎo)致心肌細(xì)胞及心肌間質(zhì)改變導(dǎo)致心室重構(gòu)。心室重構(gòu)是心肌梗死患者最常見的并發(fā)癥，目前筆者發(fā)現(xiàn)其發(fā)生機(jī)制還不明確，且無有效防御方法。

心肌梗死發(fā)生過程中伴有神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的過度激活和心肌自分泌、旁分泌活動增多，主要表現(xiàn)內(nèi)源性血管活性物質(zhì)的升高，若長期激活可表現(xiàn)為一系列的促生長作用，如心臟體積增大、質(zhì)量增加、單位面積內(nèi)心肌細(xì) 胞數(shù)量減少等，多個(gè)因素疊加導(dǎo)致心室重構(gòu)，加速了病情的惡化[9]。心肌梗死心室重構(gòu)發(fā)生過程中存在多個(gè)指標(biāo)異常表達(dá)，PVCA和CVF是檢測心室重構(gòu)的主要指標(biāo)，心肌梗死過程中會出現(xiàn)膠原占比失調(diào)，PVCA和CVF占比升高可增加心肌膠原占比，增加心肌纖維化程度，嚴(yán)重影響心臟舒張及收縮功能[10]。鄒軍等[11]研究表示，在心肌梗死大鼠非梗死區(qū)域存在PVCA和CVF表達(dá)升高，治療后，其表達(dá)降低的同時(shí)一定程度上可減少心肌細(xì)胞凋亡，推測血管肽酶抑制劑omapatrilat可顯著改善心室重構(gòu)與減少心肌細(xì)胞凋亡相關(guān)。miR-21是具有高度保守性且具有抗凋亡的RNA，與心臟疾病存在一定的關(guān)系，主要存在于心肌、內(nèi)皮細(xì)胞中。在缺氧心肌細(xì)胞存在miR-21表達(dá)降低，并在已經(jīng)出現(xiàn)心肌梗死大鼠中心肌組織中miR-21表達(dá)降低，影響心臟功能及心肌結(jié)構(gòu)的改變[12]。相關(guān)研究證實(shí)，miR-21可對心肌梗死大鼠心室重構(gòu)產(chǎn)生影響，可能在于miR-21參與了心肌梗死后心室重塑過程，在心肌梗死后的心室重構(gòu)中miR-21含量的增加對心室重塑過程中的心肌組織具有一定的保護(hù)作用，并可以促進(jìn)心肌細(xì)胞的增殖，抑制心肌細(xì)胞的肥大而發(fā)揮作用[13]。本文研究表示，MI組大鼠非梗死區(qū)域中PVCA和CVF表達(dá)升高，實(shí)驗(yàn)組中上述指標(biāo)降低，說明miR-21的激活可以通過降低PVCA和CVF占比而減少心室重構(gòu)。這與廉銀珠等[14]的研究結(jié)論相似。

TCC染色是檢測心肌梗死大鼠梗死體積的主要方法，心肌梗死大鼠心肌組織會出現(xiàn)磚紅色危險(xiǎn)梗死區(qū)域及灰白色梗死區(qū)域，會隨著并心肌梗死疾病增加而白色梗死區(qū)域增大。心肌梗死缺血再灌注后中性粒細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)增加后會釋放大量的氧自由基等細(xì)胞毒性因子具有損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞及抑制血管擴(kuò)張，加快細(xì)胞結(jié)構(gòu)及功能損傷增加血管通透性而增加心肌組織水腫，導(dǎo)致心肌細(xì)胞凋亡。心肌細(xì)胞凋亡產(chǎn)生與鈣離子及線粒體發(fā)生異常相關(guān)。心肌梗死大鼠心肌組織存在氧化損傷而產(chǎn)生大量超氧負(fù)離子而增加細(xì)胞色素合成及釋放，能夠激活caspase等信號通路而增加P53過表達(dá)啟動細(xì)胞凋亡程序。在2006年受限發(fā)現(xiàn)相關(guān)miRNA與心血管疾病發(fā)生發(fā)展存在關(guān)聯(lián)。隨著研究的深入，目前已有大量文獻(xiàn)證實(shí)，miR-21可通過靶向某些基因而對心肌梗死及心肌細(xì)胞凋亡方面發(fā)揮調(diào)控作用[15]。對miR-21的深入研究表明，在血管平滑肌細(xì)胞中通過抑制miR-21表達(dá)加快血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，機(jī)制在于可抑制Bc12和PTEN的表達(dá)來調(diào)空細(xì)胞活性。在體外培養(yǎng)的心肌細(xì)胞中，加入miR-21激動劑可發(fā)揮心肌細(xì)胞保護(hù)作用，并通過抑制其靶基因PDCD4，從而使心肌細(xì)胞的死亡數(shù)目降低[16]。本文研究表明，通過miR-21上調(diào)可改善心肌梗死大鼠梗死面積，抑制心肌細(xì)胞凋亡而發(fā)揮心肌組織保護(hù)作用，研究機(jī)制可能在于是通過靶向調(diào)節(jié)GP130、JAK2而發(fā)揮作用。

JNK屬于應(yīng)激激活蛋白激酶，心肌梗死時(shí)心臟可受到缺血再灌注損傷，JNK可進(jìn)一步激活提高ROS活性而加快心肌肥厚及心肌細(xì)胞凋亡。楊麗等[17]研究表示，在心肌梗死大鼠心肌組織中JNK可以以一種TrxR依賴性方式被激活而增加心室重構(gòu)，并當(dāng)采用JNK激酶抑制劑可通過增加Ito電流而發(fā)揮心肌保護(hù)作用。本文研究表明，miR-21上調(diào)可通過抑制其GP130水平，上調(diào)JAK2活性而進(jìn)一步抑制JNK激活而改善心室重構(gòu)，減少心肌缺血損傷，減少心肌細(xì)胞凋亡。楊義等[18]研究表示，在心肌梗死狀態(tài)下心臟會分泌出心肌營養(yǎng)素-1，可導(dǎo)致GP130受體活化而促進(jìn)心肌肥厚和心肌纖維化的發(fā)生。隨著對GP130研究深入，認(rèn)為心室重構(gòu)是一種炎性反應(yīng)，在此過程中白細(xì)胞介素-6及受體GP130可發(fā)揮信號通路作用，且高水平GP130加快心臟炎性反應(yīng)及心室重構(gòu)，抑制其表達(dá)可發(fā)揮改善作用。

JAK2在調(diào)節(jié)細(xì)胞生物學(xué)活性方法具有重要作用的同時(shí)與心肌損傷關(guān)系十分密切。毛友兵等[19]研究表示，在心肌缺血損傷模型大鼠中JAK2表達(dá)降低，當(dāng)采用丹參酮處理后心肌組織中JAK2表達(dá)激活，說明丹參酮可通過激活JAK2表達(dá)而改善心肌組織炎癥損傷。本文為了驗(yàn)證miR-21與GP130、JAK2的3′UTR結(jié)合，我們將兩者均轉(zhuǎn)染到心肌缺氧細(xì)胞中，通過上調(diào)miR-21觀察對GP130、JAK2的熒光活性變化，證實(shí)增加miR-21能夠抑制GP130活性，激活JAK2表達(dá)，miR-21能與GP130、JAK2的3′UTR特異性結(jié)合，證明miR-21可對發(fā)揮調(diào)節(jié)作用而發(fā)揮心室重構(gòu)保護(hù)作用。徐濤等[20]研究表示，熒光素酶報(bào)告基因分析證實(shí) miR-21靶向調(diào)控Jagged-1的表達(dá)，實(shí)驗(yàn)組心肌組織Jagged-1 的表達(dá)明顯下調(diào)，說明miR-21可靶向調(diào)控 Jagged-1 的表達(dá)以抗心肌纖維化。

綜上所述，上調(diào)miR-21可減少心肌梗死大鼠心室重構(gòu)，降低心肌梗死面積及心肌細(xì)胞凋亡率，并可抑制JNK信號發(fā)揮心肌保護(hù)作用，這與抑制gp130及激活JAK2表達(dá)相關(guān)。