臺州獼猴桃潰瘍病防治藥劑篩選及應用

江景勇，潘仙鵬，劉守平，何玲玲

（臺州市農業科學研究院，浙江 臨海 317000）

獼猴桃細菌性潰瘍病是一種由丁香假單孢桿菌獼猴桃致病變種 [Pseudomonas syringaepv. actinidiae（PSA）]引起的毀滅性病害[1]。在新西蘭、意大利等世界獼猴桃主產區及我國的陜西、四川等主產區都有發生，并且都造成巨大的經濟損失[2]。近年來，臺州的獼猴桃尤其是紅陽獼猴桃的栽培面積快速擴大，但潰瘍病的發生日趨嚴重，個別果園甚至毀園，這給臺州獼猴桃產業帶來了巨大威脅。在生產中由于防治獼猴桃潰瘍病的藥劑種類繁多，防治效果差異較大且不明確，加上防治方法缺乏科學依據，導致獼猴桃潰瘍病的防治效果不理想。雖然在獼猴桃潰瘍病病菌對不同殺菌劑敏感性測定及防治方面已有研究報道，但由于獼猴桃潰瘍病病菌的多樣性，致病力和基因型的差異性[3]以及各地區的氣候條件不盡相同等原因，藥劑的防治效果出現較大差異，相同成分的藥劑在不同地區可能表現出不同的抑菌力，例如：3%中生菌素可濕性粉劑在貴州和陜西[4-5]、20%葉枯唑可濕性粉劑在重慶和陜西[5-6]對獼猴桃潰瘍病病菌的抑菌性試驗表現出了相反的結果。為此，筆者針對臺州地區的獼猴桃潰瘍病病菌和當地氣候條件，采用室內抑菌試驗和田間藥效試驗，開展了獼猴桃潰瘍病高效低毒防病藥劑的篩選，以期為臺州獼猴桃潰瘍病的科學防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 供試菌株與獼猴桃品種 供試獼猴桃潰瘍病菌株為2018年自臺州紅陽獼猴桃潰瘍病發病園重病植株上分離的菌株，經鑒定為獼猴桃潰瘍病病菌。供試獼猴桃品種為紅陽獼猴桃，選擇位于臺州市天臺縣的5 a齡果園中潰瘍病發病較嚴重的植株進行田間藥效試驗，獼猴桃的栽培株行距為2 m×3 m。

1.1.2 供試藥劑 通過產地調查與文獻查閱，綜合有關參考文獻后選擇32種藥劑（見表1）作為供試藥劑，其中有抗生素類殺菌劑6種、生物藥劑2種、無機殺菌劑4種、有機殺菌劑14種，植物源殺菌劑6種。

表1 供試藥劑的含量及劑型、類型及其生產廠家

1.1.3 培養基 選用NA培養基，其配方為牛肉膏3.0 g、蛋白胨10.0 g、NaCl 5.0 g、瓊脂15.0 g，加蒸餾水定容至1 000 mL，pH值7.0～7.2，121℃濕熱滅菌20 min。

1.2 試驗方法

1.2.1 室內抑菌試驗 采用平板紙藥碟測定法[7]，先將供試菌株在NA平板培養基上活化24 h，再接種于NA斜面培養基上培養72 h，然后在試管中加入10 mL無菌水，用無菌接種環刮下菌苔制成菌懸液備用。在直徑為9 cm的培養皿中倒入10 mL融化的固體NA培養基，搖勻后制成平板，再取100 μL菌懸液均勻涂布在冷卻的NA平板上。將各供試藥劑按用藥指導說明推薦最大濃度用無菌水配制成藥液（表2），分別將直徑為6 mm的滅菌濾紙片置于各藥液中浸泡30 s后取出，50℃恒溫干燥后將干燥紙片轉移到含菌平板上，每個培養皿對角排放4片吸附同一藥液的紙碟，以無菌水浸泡的濾紙片為對照（CK），在25℃恒溫培養箱中培養48 h后觀察濾紙片周圍的抑菌現象，采用十字交叉法測量抑菌圈直徑，減去濾紙片直徑后算出每個培養皿4個抑菌圈的平均直徑凈增值。

1.2.2 田間藥效試驗 （1）涂抹防治試驗。根據室內抑菌試驗的篩選結果，選用27.12%堿式硫酸銅懸浮劑（銅高尚）、0.3%四霉素水劑、20%溴硝醇可濕性粉劑、3 000億CFU/g熒光假單胞桿菌粉劑和噻霉酮5種藥劑進行田間藥效試驗（表3）。噻霉酮選用1.6%噻霉酮膏劑，其他4種藥劑稀釋成20倍液，直接涂抹獼猴桃枝干病斑或在病斑處用刀縱刻1～3條刻痕（深至韌皮部）后再涂抹藥劑，涂藥后再涂一層黃油防止雨水沖刷，以涂抹清水為對照（CK），共6個處理，每個處理8株。于2019年2月上旬開始涂藥。2個月后觀察記錄病斑的愈合率并計算防效。（2）噴霧防治試驗。2019年2月、2020年3月，進行噴霧防治潰瘍病試驗。選用27.12%堿式硫酸銅懸浮劑（銅高尚）、0.3%四霉素水劑、20%溴硝醇可濕性粉劑、3 000億CFU/g熒光假單胞桿菌粉劑和3%噻霉酮水分散粒劑按表4稀釋倍數進行試驗，以噴施清水為對照（CK）。分別從2019年2月中下旬和2020年3月上旬開始噴施藥液，每隔7 d噴藥1次，連續噴2次，每株噴藥量0.3 kg，每處理10株，末次噴藥后15 d調查防治效果。

1.3 病害調查方法

獼猴桃潰瘍病分級標準參考張鋒等[8]的方法，0級，無病；1級，0～5%以下枝條、葉片發病，主干未見病斑；2級，5%～20%枝條發病或萎蔫死亡，主干有少量病斑；3級，20%～50%枝條發病或萎蔫死亡，主干病斑繞莖1/4～1/2；4級，50%～80%枝條發病或萎蔫死亡，主干病斑繞莖1/2～3/4；5級，80%以上枝條發病或萎蔫死亡，主干病斑繞莖大于3/4或者全株死亡。根據獼猴桃潰瘍病的分級標準，按照試驗方法分別統計施藥前后潰瘍病的各級發病數，再分別按公式（1）、（2）和（3）計算病情指數、防治效果和病斑愈合率。

式中，CK0為藥前對照區病情指數，CK1為藥后對照區病情指數，pt0為藥前處理區病情指數，pt1為藥后處理區病情指數。

1.4 數據統計分析

采用DPS 2000軟件進行統計分析。

2 結果與分析

2.1 不同殺菌劑對獼猴桃潰瘍病菌的抑菌效果

根據各種殺菌劑對潰瘍病病菌的抑菌圈直徑凈增值大小結果（見表2），32種殺菌劑對獼猴桃潰瘍病病菌的抑菌力有顯著性差異。各殺菌劑中對潰瘍病病菌的抑菌圈直徑凈增值大小平均在25 mm以上的有溴硝醇、四霉素和氯溴異氰尿酸3種，其中四霉素和氯溴異氰尿酸的抑菌圈凈增值都在40 mm以上，表現出較強的抑菌力和擴散能力；抑菌圈凈增值為15～25 mm的殺菌劑有熒光假單胞桿菌和蠟質芽孢桿菌2個生物藥劑；抑菌圈凈增值為9～15 mm的殺菌劑有噻霉酮、辛菌胺醋酸鹽、琥膠肥酸銅、氧化亞銅、堿式硫酸銅、腐皮康和腐必清7種；其他20種殺菌劑的抑菌力較低，抑菌圈凈增值平均在9 mm以下。

表2 各種殺菌劑的使用濃度及其抑菌圈直徑凈增值

2.2 田間藥效試驗結果

2.2.1 不同殺菌劑涂抹的田間防治效果 5種殺菌劑的田間藥效試驗結果（表3）表明：以0.3%四霉素水劑的防治效果最好，平均防效為70.3%，其次是1.6%噻霉酮膏劑、27.12%堿式硫酸銅懸浮劑和3 000億CFU/g熒光假單胞桿菌粉劑，其平均防效分別為59.4%、67.9%和60.1%，但這4種殺菌劑的防效沒有顯著性差異，而20%溴硝醇可濕性粉劑的防效僅為43.8%，顯著低于上述4種殺菌劑。

表3 5種殺菌劑涂抹對獼猴桃枝條潰瘍病的田間防治效果（%）

2.2.2 不同殺菌劑噴霧的田間防治效果 由表4可知，2019年的防治效果較差，5種殺菌劑的防效均在50%以下，但0.3%四霉素水劑和3%噻霉酮水分散粒劑的防效顯著高于其他3種種殺菌；2020年的防治效果較好，只有3 000億CFU/g熒光假單胞桿菌粉劑的防效低于50%，為36.8%，顯著低于其他殺菌劑，0.3%四霉素水劑、3%噻霉酮水分散粒劑和27.12%堿式硫酸銅懸浮劑的防效都達到65%以上，分別為71.3%、66.2%和65.1%，顯著高于其他殺菌劑，但這3種殺菌劑之間沒有顯著性差異。2019年的防治效果較差可能與當年的發病程度和氣候條件有關，試驗時臺州地區多雨，且正值獼猴桃潰瘍病集中發病期，過多的雨水和較低的溫度可能影響了藥劑的防治效果。

表4 5種殺菌劑噴霧對獼猴桃潰瘍病的田間防治效果

3 討 論

由于各地的地理環境和氣候條件不同，相同藥劑的防治效果可能存在差異，有研究表明，硫酸鏈霉素[8-10]和乙蒜素[11]對獼猴桃潰瘍病的防治效果較好，而筆者的試驗結果與焦紅紅[12]的研究結果均表明硫酸鏈霉素和乙蒜素沒有明顯的抑菌效果。筆者的試驗結果表明，用0.3%四霉素水劑涂干和噴霧對獼猴桃潰瘍病的防治效果都較好，這與胡榮平等[11]和陽廷密等[13]的研究結果一致。

根據該試驗結果結合生產實踐，建議防治獼猴桃潰瘍病時先使用石硫合劑冬季清園并進行涂白，2月中下旬開始噴施四霉素、堿式硫酸銅或噻霉酮等殺菌劑進行防治，也可選擇溴硝醇、熒光假單胞桿菌、琥膠肥酸銅等殺菌劑交替使用，間隔10 d噴1次，連噴2～3次；結合噴霧防治在1月下旬到2月上旬可用20倍四霉素或噻霉酮、堿式硫酸銅等藥劑涂抹枝干病斑。