雪峰山區域不同產地天麻化學成分含量比較研究

薛華麗 田玉橋 邱小燕 謝美鳳 林承雄 陳三春 楊珊

天麻（Gastrodia elata Blume）是我國四大名貴藥材之一，藥用歷史久遠，具有祛風止痛，化瘀通絡，平肝潛陽，平息肝風，制止痙攣的功效[1～3]。目前我國天麻主要有五種變型[4]，即松天麻（Gastrodia elata Bl.f.alba S.Chow）、紅天麻（Gastrodia elata Bl.f.elata）、綠天麻（Gastrodia elata Bl.f.viridis）、烏天麻（Gastrodia elata Bl.f.glauca S.Chow）和黃天麻（Gastrodia elata Bl.f.flavida S.Chow）。天麻素和天麻多糖是天麻的重要化學成分，天麻素具有保護人體神經元細胞、緩解疼痛、提高免疫力、抗氧化、鎮靜安定、促進睡眠和抗炎等作用，天麻多糖具有增強免疫力、抑制細菌生長、清除自由基、降低血壓的功效[5，6]。

本研究以雪峰山區域的紅天麻、烏天麻、烏紅雜交天麻和綠天麻四種不同變型天麻為研究對象，比較紅天麻、烏天麻、綠天麻、烏紅雜交天麻中的浸出物、天麻多糖、天麻素及對羥基苯甲醇總含量，為本區域的天麻含量評價提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料從湖南、貴州、湖北等地采集了12份不同變型天麻的新鮮塊莖，洗凈，蒸制15min，置于55℃烘箱中烘干，粉碎后過100 目藥典篩，備用。所采樣品由同一名專家鑒定，樣品信息見表1。

表1 樣品信息表

1.2 儀器與試劑DGG-9123A 型電熱鼓風干燥箱（森信儀器有限公司）；AL204 型電子天平（梅特勒-托利多有限公司）；UV-1800 型紫外-可見分光光度計（島津儀器有限公司）；Agilent 液相色譜儀（俊奇儀器設備有限公司）。蒽酮、無水乙醇、過氧化氫、氫氧化鈉、稀乙醇、鹽酸、濃硫酸（懷化科之源儀器有限公司）；天麻素標準品、葡萄糖標準品、對羥基苯甲醇標準品（上海詩丹德標準服務有限公司）；乙腈、磷酸（北京索萊寶科技有限公司）。

1.3 指標測定方法

1.3.1 浸出物含量測定 取天麻樣品2～4g，并記錄數據，加入到錐形瓶里，并加入75ml 稀乙醇，蓋好瓶塞并稱定其總重量，靜置1h，連接冷凝管后，打開電熱爐加熱錐形瓶，直到溶液沸騰，并保持微沸的狀態1h。等溶液冷卻后，將錐形瓶拿下并塞好瓶塞，再次稱定并記錄其總重量，加入稀乙醇，并使其總重量與第一次稱的總重量相等，混合均勻，過濾，將蒸發皿烘干，并使之達到恒重的狀態，蒸發皿中再加入25ml 濾液，轉移到水浴鍋上進行蒸干，調節干燥箱溫度為105℃，并將蒸發皿放入干燥箱中烘干3h，再放到干燥器中冷卻30min，然后快速地進行稱重。再計算出天麻樣品中浸出物的含量（%）。進行平行試驗。

1.3.2 天麻多糖含量測定 采用蒽酮-硫酸法測定天麻多糖[7]，在檢測波長為620nm 的情況下，得到標準曲線Y=0.6848X+0.0132，R2=0.9987，測定天麻樣品溶液的吸光度，再計算天麻多糖的含量。

1.3.3 天麻素及對羥基苯甲醇總含量測定 采用液相色譜法測定天麻素及對羥基苯甲醇總含量[8]，系統條件：固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相為乙腈-0.05%磷酸溶液（3:97）；檢測條件的波長為220nm。

1.4 統計學方法實驗數據采用Excel 2010 整理分析。運用單因素方差分析比較不同產地天麻的浸出物、多糖、天麻素及對羥基苯甲醇總含量的差異；采用SPSS 23.0 統計學軟件進行顯著性分析；采用OriginPro 2021 進行相關性分析。P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同產地天麻浸出物含量比較12 個不同產地的天麻浸出物平均含量為21.497%，變異系數為0.175%，變幅在15.673%～28.975%，極差為13.302%，標準差為3.770%。表明浸出物含量相對穩定。根據《中國藥典》規定[9]，天麻浸出物含量不得少于15.0%，本研究中不同變型天麻均符合要求，其中貴州畢節和大方的烏天麻浸出物含量顯著高于其他產地的天麻（P<0.05）。湖南綏寧的烏紅雜交天麻和湖北英山的綠天麻浸出物含量較低，顯著低于其他變型天麻的浸出物含量（P<0.05）。見表2。

2.2 不同產地天麻多糖含量比較12 個不同產地的天麻多糖平均含量為19.371%，變異系數為0.249%，變幅在12.926%～27.681%，極差為14.755%，標準差為4.825%。湖南洪江的紅天麻和湖北羅田的紅天麻多糖含量顯著高于其他產地的天麻（P<0.05）。湖南會同的綠天麻多糖含量較低，且顯著低于其他變型天麻的多糖含量（P<0.05）。見表2。

2.3 不同產地天麻的天麻素及對羥基苯甲醇總含量比較12 個不同產地的天麻素及對羥基苯甲醇的平均含量為0.389%，變異系數為0.293%，變幅在0.235%～0.603%，極差為0.368%，標準差為0.114%，表明天麻素及對羥基苯甲醇總含量在產地之間差異較大。貴州畢節和德江烏天麻的天麻素及對羥基苯甲醇總含量最高，顯著高于其他產地天麻（P<0.05）。湖北羅田的紅天麻、湖北宜昌的烏紅雜交天麻和湖南會同的綠天麻的天麻素及對羥基苯甲醇總含量較低，顯著低于其他產地天麻（P<0.05）。見表2。

表2 不同產地天麻的浸出物、天麻多糖、天麻素及對羥基苯甲醇總含量比較（）

表2 不同產地天麻的浸出物、天麻多糖、天麻素及對羥基苯甲醇總含量比較（）

2.4 相關性分析采用OriginPro 2021 軟件對12 個不同產地天麻的浸出物、多糖、天麻素及對羥基苯甲醇總含量進行相關性分析，浸出物含量與天麻素及對羥基苯甲醇總含量呈極顯著正相關（r=0.652，P<0.01）；浸出物含量與多糖、多糖與天麻素及對羥基苯甲醇總含量無顯著相關性（r=0.023、r=-0.061，P>0.05）。

2.5 聚類分析采用SPSS 27.0 軟件以“組件聯接”和“平方歐式距離”聚類方法對不同產地的天麻進行聚類分析，當歐式距離約為10.0 時，12 個天麻產地可分為三類。第一類包括湖南洪江、湖南溆浦、湖北羅田的紅天麻和湖北恩施的烏紅雜交天麻，該類產地的天麻多糖含量較高；第二類包括貴州大方和貴州畢節的烏天麻，該類產地天麻的浸出物含量較高；第三類包括貴州德江、畢節的烏天麻，湖南綏寧、湖北宜昌的烏紅雜交天麻，湖南新寧、湖南會同、湖北英山的綠天麻，該類產地天麻多糖含量相對較低。見圖1。

圖1 聚類分析

3 討論

不同產地及變型的天麻隨栽培土壤、氣候環境變化，其有效成分含量均有較大差異，隨著種植技術的突破和大健康產業的發展，天麻種植區域不斷擴大，本研究對雪峰山區域12 個不同產地的天麻浸出物、天麻多糖、天麻素及對羥基苯甲醇成分含量進行了比較分析。《中國藥典》2020 版規定天麻浸出物含量不得少于15.0%，本研究中的12 個不同產地、不同變型天麻浸出物含量均高于15.0%，其中貴州畢節的烏天麻的浸出物含量最高（28.975%），其次是貴州大方的烏天麻（26.754%）和湖南新寧的綠天麻（24.327%）。天麻多糖是天麻中重要的有效成分，也是一種衡量天麻品質質量的指標，不同變型和不同的環境因素造成天麻中多糖含量有所差異，本試驗中湖南洪江的紅天麻多糖含量最高（27.681%），其次是湖北羅田的紅天麻（26.337%）和湖南溆浦的紅天麻（24.983%），紅天麻的多糖含量高于烏天麻、綠天麻和烏紅雜交天麻，這與王銳等[10]的研究結果一致，產地相同時，紅天麻中天麻多糖含量與其他三個品種天麻中天麻多糖含量存在較大差異（P<0.05），而變型相同時，生長產地為云南的紅天麻中天麻多糖含量超過了生長產地為湖北和陜西的紅天麻。本研究中湖南洪江的紅天麻多糖含量最高，可能與其特殊的氣候環境因素有關，高海拔、晝夜溫差大使當地植物中糖分的含量相對于其他地區高。天麻素及對羥基苯甲醇總含量是評價天麻質量的重要指標，本研究中，烏天麻的天麻素其對羥基苯甲醇總含量相對較高，其中最高的是貴州畢節的烏天麻（0.603%），其次是貴州德江的烏天麻（0.575%）和貴州大方的烏天麻（0.489%）。王彩云等[11]研究表明，不同產地的天麻中天然活性成分對羥基苯甲醇和天麻素的含量有差異，可能是生長條件等因素導致。

通過對不同產地的天麻進行聚類分析，第一類包括湖南洪江、湖南溆浦、湖北羅田的紅天麻和湖北恩施的烏紅雜交天麻，該類產地的天麻多糖含量較高，第二類包括貴州大方和貴州畢節的烏天麻，該類產地天麻的浸出物含量較高，第三類包括貴州德江、畢節的烏天麻，湖南綏寧、湖北宜昌的烏紅雜交天麻，湖南新寧、湖南會同、湖北英山的綠天麻，該類產地天麻多糖含量相對較低。本研究為雪峰山區域不同變型天麻開發利用和產業化推廣提供數據參考。