益氣軟肝方對小鼠急性肝損傷的護(hù)肝療效評價(jià)

曹 允

（北京農(nóng)業(yè)職業(yè)學(xué)院，北京 102442）

益氣軟肝方作為傳統(tǒng)中藥方劑在臨床應(yīng)用多年，有一定的抗纖維化、預(yù)防肝硬化的作[1]。本實(shí)驗(yàn)旨在評價(jià)益氣軟肝方對高濃度酒精造成的急性肝損傷的護(hù)肝療效，并為研究中藥對小鼠肝損傷的護(hù)肝效果提供方法和支持。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 藥物黃芪、白術(shù)、丹參、川芎、桃仁、鱉甲、生牡蠣、炙甘草（均購于北京宣內(nèi)藥品有限責(zé)任公司）、護(hù)肝片（202005074，0.35 g/片，葵花藥業(yè)）、白酒（46°，牛欄山）

1.1.2 實(shí)驗(yàn)動物SPF級昆明種小鼠20只，8～9月齡，雌雄各半，由北京維通利華公司提供。

1.1.3 儀器設(shè)備微納芯全自動生化儀、灌胃器、中藥煎煮鍋。

1.2 方法

1.2.1 藥物的制備（1）益氣軟肝方的制備：精密稱取黃芪250 g、白術(shù)100 g、丹參100 g、川芎50 g、桃仁75 g、鱉甲150 g、生牡蠣250 g、炙甘草50 g，于1 200 ml純化水中加入鱉甲和生牡蠣先煎煮1 h后，將其它藥材加入再煎煮1 h。煎煮后中藥藥液灌裝于密閉瓶中備用。（2）藥物對照品的制備：取5 g護(hù)肝片研細(xì)，加7 ml生理鹽水，每次灌胃前混勻。

1.2.2 小鼠肝損模型取小鼠60只，喂養(yǎng)2 d適應(yīng)環(huán)境。所有小鼠以46°白酒每天以0.015 ml/g進(jìn)行灌胃，連續(xù)灌胃1周，檢測其中15只小鼠的肝功能。

1.2.3 益氣軟肝方對肝損小鼠護(hù)肝的療效實(shí)驗(yàn)余下小鼠隨機(jī)分3組，每組15只。第1組每天以基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)，不給藥物作為陽性對照組；第2組每天以0.015 ml/g灌胃益氣軟肝方藥液，作為試驗(yàn)組；第3組每天以0.015 ml/g灌胃護(hù)肝片溶液，作為藥物對照組。所有小鼠連續(xù)灌胃1周后檢測肝功能。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析所有數(shù)據(jù)經(jīng)過Excel2010初步整理計(jì)算后，采用SPSS（Version16.0）軟件，對小鼠肝臟功能指標(biāo)進(jìn)行單因素方差分析。數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 小鼠肝損后肝功檢測指標(biāo)

小鼠經(jīng)高濃度白酒灌胃一周后，通過全自動生化儀檢測其肝功能后發(fā)現(xiàn)，小鼠的肝臟有損傷，主要表現(xiàn)在球蛋白（GLB）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、間接膽紅素的異常升高，對肝臟其它指標(biāo)如γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶（γ-GGT）未見明顯影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。

表1 小鼠肝損后肝功能指標(biāo)（n=15）

2.2 用保肝藥后小鼠肝功能檢測指標(biāo)

（1）肝損小鼠進(jìn)行一周灌藥護(hù)肝試驗(yàn)后，陽性對照組小鼠（未給藥）GLB無明顯改善，ALT、AST逐漸恢復(fù)，但依然在比較高的水平，間接膽紅素比之前還有所升高。

（2）試驗(yàn)組（益氣軟肝方）GLB略有下降但依然偏高，ALT和AST恢復(fù)到正常水平，恢復(fù)水平較陽性對照組差異明顯（P＜0.05）；間接膽紅素偏高但比陽性對照組回落的快，且差異明顯（P＜0.05）；對γ-GGT的影響與陽性對照組相較差異不顯著（P＞0.05）。

（3）藥物對照組小鼠（護(hù)肝片）GLB、間接膽紅素?zé)o明顯改善且有提升，ALT和AST恢復(fù)到正常水平。

（4）試驗(yàn)組與藥物對照組相比，前者對GLB的療效較好，且差異顯著（P＜0.05）；對ALT和AST療效兩組均能恢復(fù)至正常水平；對間接膽紅素療效較藥物對照組好，且差異顯著（P＜0.05）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 藥物對肝損小鼠護(hù)肝療效比較（n=15）

3 討論與結(jié)論

（1）急性肝損傷是指肝細(xì)胞出現(xiàn)急性損傷或壞死，出現(xiàn)肝功能的異常。多數(shù)患者血清ALT、AST、GGT等會因?yàn)楦螕p傷而出現(xiàn)升高。導(dǎo)致肝損傷的原因較多，常見的病因有藥物、疾?。ㄈ绺窝祝┗蛘呔凭取Ｄ壳搬槍毙愿螕p傷常用的治療方案有對因治療、護(hù)肝降酶治療及防治并發(fā)癥。在治療急性肝損傷中，越來越多的中藥顯示出顯著的療效，比如虎眼萬年青總皂苷、草果、菱角殼水提混合物、阿銳布水提物對急性肝損傷有治療作用[2～4]。益氣軟肝方中包含黃芪、鱉甲有補(bǔ)氣固表、調(diào)節(jié)陰虛之功效；白術(shù)、炙甘草有健脾胃、調(diào)氣虛之功效；丹參、川芎、桃仁則有活血、強(qiáng)血行氣之功效；生牡蠣則有強(qiáng)肝解毒之功效。方劑中各類藥物配伍合用，發(fā)揮強(qiáng)肝補(bǔ)氣、活血解郁之效。

（2）肝功能檢測項(xiàng)目主要包括轉(zhuǎn)氨酶，如谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶，白蛋白，球蛋白、白球比值，膽紅素等多項(xiàng)指標(biāo)，每一項(xiàng)內(nèi)容和參考值結(jié)果對比分析，可以判斷出肝臟是否出現(xiàn)了問題及嚴(yán)重程度。急性肝損傷患者的ALT及AST指標(biāo)會明顯上升，尤其是ALT水平會顯著上升，GGT指標(biāo)變化不明顯[5]。在本試驗(yàn)中，經(jīng)過灌胃一周的小鼠ALT與AST都顯著升高，ALT升高幾乎1倍，說明肝細(xì)胞在受到高濃度酒精破壞后發(fā)生壞死。肝損傷后陽性對照組小鼠的ALT和AST逐漸恢復(fù)接近正常水平，但依然在參考值高限邊緣，提示戒除酒精后小鼠肝臟有一定自我恢復(fù)能力，但需要較長的時間；藥物對照組給1周護(hù)肝片后ALT和AST均恢復(fù)至正常水平；試驗(yàn)組給1周益氣軟肝方后ALT和AST也恢復(fù)至正常水平，但降低水平不及藥物對照組。

（3）膽紅素濃度越高，肝細(xì)胞的損傷越重，膽汁淤積的發(fā)生率越高。有些人群高間接膽紅素血癥肝功能損傷是可逆的[6]。在本試驗(yàn)中，灌胃一周的小鼠間接膽紅素有所升高，提示出現(xiàn)肝損傷后膽紅素代謝出現(xiàn)障礙；后期無論是給藥組或不給藥組對間接膽紅素效果均不佳，可能是護(hù)肝時間過短，膽紅素代謝障礙無改善。

（4）肝臟球蛋白升高主要見肝臟出現(xiàn)炎癥，本試驗(yàn)中酒精造成的肝損傷是出現(xiàn)球蛋白升高的主要原因。后期給藥與自愈都未在短期內(nèi)對炎癥有比較好的效果，益氣軟肝方組恢復(fù)的要稍強(qiáng)一些。

4 結(jié)論

中藥益氣軟肝方對酒精造成的急性肝損傷有一定的保護(hù)療效，能在1周內(nèi)恢復(fù)ALT和AST至正常水平。對于酒精造成的肝臟炎癥，中藥無法在短期內(nèi)改善，益氣軟肝方的恢復(fù)炎癥的效果相較于護(hù)肝片效果稍佳。因此，對于酒精造成的急性肝損傷，在臨床中應(yīng)該首先戒酒，然后建議使用中藥方劑保護(hù)肝臟。