血清PCNA、MIC-1及Hcy水平與非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的相關(guān)性分析

王慧敏 斯琴 王方穎 李曉華

非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)是肺癌最為常見的類型之一，約占肺癌病例總數(shù)的80%～85%，在我國發(fā)病率較高，已嚴(yán)重影響人類生命健康[1]。對(duì)于早期NSCLC患者而言，手術(shù)治療是首選治療方案，但由于發(fā)病早期無典型臨床癥狀，且病情進(jìn)展迅速，往往患者一經(jīng)確診便已處于中晚期，從而錯(cuò)過最佳手術(shù)時(shí)機(jī)，其5年生存率不足15%[2]。目前，血清腫瘤標(biāo)記物檢測由于具有檢測快捷、簡便等特點(diǎn)，常作為臨床上對(duì)NSCLC患者進(jìn)行早期診斷與預(yù)后評(píng)估的重要指標(biāo)[3]。臨床研究表明NSCLC患者血清PCNA、MIC-1及Hcy水平均有不同程度升高，且其水平升高與NSCLC患者病情轉(zhuǎn)歸及預(yù)后關(guān)系密切[4]，但用于評(píng)估NSCLC患者預(yù)后的相關(guān)性報(bào)道卻極為少見。為此，本研究選取2016年2月～2018年1月本院收治的123例NSCLC患者的臨床資料進(jìn)行回顧性研究，對(duì)血清PCNA、MIC-1及Hcy水平與NSCLC患者預(yù)后的相關(guān)性進(jìn)行探討，以期為NSCLC患者預(yù)后評(píng)估提供理論指導(dǎo)。現(xiàn)匯報(bào)如下。

資料與方法

一、一般資料

回顧性分析2016年2月～2018年1月本院收治的123例NSCLC患者的臨床資料，其中男性68例、女性55例，年齡49歲～78歲，平均(58.09±10.13)歲。病理類型：腺癌71例(占比57.72%)、鱗癌52例(占比42.28%)，TNM分期：Ⅰ期19例(占比15.45%)、Ⅱ期26例(占比21.14%)、Ⅲ期48例(占比39.02%)、Ⅳ期30例(占比24.39%)，分化程度：高分化32例(占比26.02%)、中分化64例(占比52.03%)、低分化27例(占比21.95%)。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴參照非小細(xì)胞肺癌NCCN指南2017第5版[5]對(duì)所有NSCLC患者進(jìn)行診斷，并經(jīng)病理學(xué)檢查加以確診；⑵所有NSCLC患者均為首次確診，且臨床病理資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴患者伴發(fā)其他惡性腫瘤；⑵患者有精神類疾病史；⑶患者伴有免疫系統(tǒng)疾病或嚴(yán)重感染性疾病；⑷患者伴有心肝腎等主要臟器功能不全；⑸患者有化療或靶向治療史。

二、觀察指標(biāo)及方法

收集所有NSCLC患者臨床資料，記錄兩組患者入院24h內(nèi)血清PCNA、MIC-1及Hcy水平。

患者入院24h內(nèi)清晨空腹抽取外周肘靜脈血5 mL于肝素抗凝管中，以轉(zhuǎn)速3000 r/min離心10 min分離血清，血清PCNA、MIC-1水平采用ELISA法測定、血清Hcy水平采用循環(huán)酶法測定。所用邁克生物全自動(dòng)生化分析系統(tǒng)C 800及配套試劑與試劑盒均由邁克生物股份有限公司提供。本研究中血清PCNA截?cái)嘀颠x取：以本研究中所有NSCLC患者血清PCNA水平中位數(shù)452 pg/mL為分界線；血清MIC-1正常參考值[6]：0～1000 pg/mL；血清Hcy正常參考值[7]：10～22 μmol/L。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié) 果

一、血清PCNA、MIC-1及Hcy水平與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系 不同性別、年齡以及病理類型的NSCLC患者血清PCNA、MIC-1及Hcy水平比較均無明顯差異(均P>0.05)；而不同TNM分期、分化程度NSCLC患者血清PCNA、MIC-1及Hcy水平比較均差異明顯(均P<0.05)(見表1)。

表1 血清PCNA、MIC-1及Hcy水平與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系

二、NSCLC患者預(yù)后影響因素的單因素分析

不同TNM分期、分化程度、PCNA、MIC-1、Hcy的DLBCL患者總生存期比較均差異明顯(均P<0.05)，說明TNM分期、分化程度、PCNA、MIC-1、Hcy可能影響NSCLC患者預(yù)后(見表2)。

表2 NSCLC患者預(yù)后影響因素的單因素分析

三、NSCLC患者預(yù)后影響因素的多因素COX回歸分析

以NSCLC患者預(yù)后(總生存期)為因變量，變量賦值表(見表3)，對(duì)單因素分析中NSCLC患者預(yù)后的可能影響因素(TNM分期、分化程度、PCNA、MIC-1、Hcy)進(jìn)行多因素COX回歸分析，結(jié)果顯示TNM分期、分化程度、PCNA、MIC-1、Hcy均為NSCLC患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(均P<0.05)(見表4)。

表3 多因素Cox回歸分析的變量賦值表

表4 NSCLC患者預(yù)后影響因素的多因素COX回歸分析

四、血清PCNA、MIC-1及Hcy表達(dá)水平生存曲線分析

采用Kaplan-Meier法繪制血清PCNA、MIC-1及Hcy表達(dá)水平ROC曲線，并計(jì)算總生存期，研究結(jié)果表明血清PCNA≤452 pg/mL患者總生存期(16.85±2.36)個(gè)月，明顯大于血清PCNA>452 pg/mL患者(9.53±1.48)個(gè)月(t=20.029,P<0.001)；血清MIC-1≤1000 pg/mL患者總生存期(18.29±2.92)個(gè)月，明顯大于血清MIC-1>1000 pg/mL患者(9.47±1.26)個(gè)月(t=23.289,P<0.001)；血清Hcy≤22 μmol/L患者總生存期(13.76±2.04)個(gè)月,明顯大于血清Hcy >22 μmol/L患者(11.61±1.68)個(gè)月(t=6.405,P<0.001)(見圖1)。

圖1 血清PCNA、MIC-1及Hcy表達(dá)水平生存曲線

討 論

目前臨床上對(duì)于早期NSCLC患者多采用手術(shù)治療為主，化療為輔助的治療方案[8]。雖然近年來醫(yī)療技術(shù)的革新，使得靶向治療等新的治療方案不斷應(yīng)用于NSCLC患者臨床治療，但NSCLC在病情進(jìn)展過程中的生物學(xué)行為亦有其多樣性(轉(zhuǎn)移、突變等)，導(dǎo)致NSCLC患者預(yù)后普遍較差[9]。臨床研究表明[10]血清腫瘤標(biāo)記物(常見的有血清癌胚抗原、C 反應(yīng)蛋白等)參與了NSCLC發(fā)生發(fā)展以及轉(zhuǎn)移、突變等多個(gè)生理過程，且對(duì)其進(jìn)行檢測快捷、簡便，常作為臨床上對(duì)NSCLC患者進(jìn)行早期診斷與預(yù)后評(píng)估的重要指標(biāo)。在對(duì)血清腫瘤標(biāo)記物檢測過程中我們也發(fā)現(xiàn)受NSCLC患者吸煙、飲食以及感染等因素的干擾，影響血清腫瘤標(biāo)記物檢測的敏感度與特異度，導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果假陽性或假陰性率較高[11]；因此，如何尋找可以準(zhǔn)確預(yù)測、評(píng)估NSCLC患者病情及預(yù)后進(jìn)展的評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)NSCLC患者個(gè)性化用藥方案的制定以及治療效果評(píng)估具有重要的臨床價(jià)值[12]。

PCNA、MIC-1及Hcy,均是臨床上較為常見的血清學(xué)指標(biāo)[13]，但有關(guān)血清PCNA、MIC-1及Hcy聯(lián)合應(yīng)用于評(píng)估NSCLC患者預(yù)后的相關(guān)性報(bào)道卻并不多見。PCNA是一種在細(xì)胞核內(nèi)合成的DNA聚合酶δ輔助蛋白，其合成量多少與細(xì)胞周期關(guān)系密切，并參與了NSCLC腫瘤細(xì)胞增殖及遷移等多個(gè)過程，當(dāng)NSCLC發(fā)生后，機(jī)體內(nèi)PCNA表達(dá)水平會(huì)異常升高，因此可作為評(píng)估NSCLC患者細(xì)胞增殖、預(yù)后、復(fù)發(fā)的重要腫瘤標(biāo)志物[14]。MIC-1是人轉(zhuǎn)化生長因子β家族中的重要成員之一，NSCLC發(fā)生后患者血清MIC-1表達(dá)水平明顯上調(diào)，臨床研究表明MIC-1參與了NSCLC細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移以及凋亡等多個(gè)生物學(xué)過程，在NSCLC腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中，可起到調(diào)控作用[15-16]。而Hcy是人體中常見的一種含硫氨基酸，當(dāng)NSCLC發(fā)生后機(jī)體血清Hcy水平會(huì)異常升高，其產(chǎn)生的細(xì)胞、基因毒性，會(huì)對(duì)原癌基因的激活及細(xì)胞增殖過程(如鱗狀上皮化增生)起促進(jìn)作用，并參與了NSCLC的發(fā)生發(fā)展等多個(gè)生理過程[17]。在本研究中，不同性別、年齡以及病理類型的NSCLC患者血清PCNA、MIC-1及Hcy水平比較均無明顯差異，而不同TNM分期、分化程度NSCLC患者血清PCNA、MIC-1及Hcy水平比較均差異明顯，表明血清PCNA、MIC-1及Hcy水平與TNM分期、分化程度顯著相關(guān)。以NSCLC患者預(yù)后為因變量，對(duì)單因素分析中NSCLC患者預(yù)后的可能影響因素進(jìn)一步進(jìn)行多因素COX回歸分析，研究結(jié)果表明TNM分期、分化程度、PCNA、MIC-1、Hcy均為NSCLC患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可為NSCLC患者患者預(yù)后評(píng)估提供相應(yīng)參考。通過采用Kaplan-Meier法繪制ROC曲線及計(jì)算總生存期，本研究發(fā)現(xiàn)血清PCNA≤452 pg/mL、MIC-1≤1000 pg/mL、Hcy≤22 μmol/L的NSCLC患者總生存期明顯較長，提示血清PCNA、MIC-1及Hcy水平可作為對(duì)NSCLC患者進(jìn)行預(yù)后評(píng)估的腫瘤標(biāo)記物。本研究局限性：所納入的NSCLC患者樣本數(shù)偏少，可能會(huì)因血清PCNA、MIC-1及Hcy水平截?cái)嘀档倪x取引起統(tǒng)計(jì)結(jié)果的偏差，因此血清PCNA、MIC-1及Hcy水平與NSCLC患者預(yù)后的相關(guān)性仍有待于收集大量NSCLC患者的臨床資料進(jìn)行更深入探討。

總之，TNM分期、腫瘤分化程度較低、PCNA、MIC-1以及Hcy均為NSCLC患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，且血清PCNA、MIC-1及Hcy呈低表達(dá)水平的NSCLC患者總生存期較長。