NF-κB/P65與DNA結合抑制因子2在胃癌中的表達及其相關性*

王 真 朱 琳 舒 丹 羅中明

1 江西省上饒市廣信區人民醫院急診科 334000； 2 江西醫學高等專科學校臨床醫學系

胃癌是消化道常見惡性腫瘤之一，我國胃癌發病人數占全球所有新發胃癌病例的40%以上[1]。我國胃癌患者多數發現時已到晚期，失去手術機會，為進一步提高胃癌早期診斷率，胃癌診斷相關的生物學標志物在臨床越來越被重視[2]。DNA結合抑制因子2是人體內常見轉錄調控因子之一，在腫瘤細胞的增殖及遷移中具有重要作用[3]。NF-κB是多向性核轉錄調節因子，激活后能與靶基因結合，調節細胞因子、黏附因子及炎性介質表達，P50/P65二聚體是NF-κB最常見亞型[4]。研究證實，NF-κB/P65可以影響某些抗凋亡基因及細胞增殖基因表達，參與腫瘤發生過程[5]。近期研究顯示[6]，DNA結合抑制因子2能夠通過NF-κB信號通路參與免疫應答及腫瘤微環境改變。本次研究回顧性分析了168例胃癌患者的臨床資料，進一步探討NF-κB/P65與DNA結合抑制因子2在胃癌中的表達及兩者的相關性，為后續胃癌臨床診治提供更多參考，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集我院2016年1月—2017年12月收治的168例胃癌患者臨床資料。其中男107例，女61例，年齡32～74歲，平均年齡(58.72±4.89)歲；腫瘤位置：賁門及胃底83例，胃體27例，胃竇及幽門58例；TNM分期：Ⅰ期23例，Ⅱ期57例，Ⅲ期68例，Ⅳ期20例；分化程度：高分化10例，中分化35例，低分化123例；組織學類型：管狀腺癌36例，黏液腺癌20例，低分化腺癌84例，印戒細胞癌16例，其他類型12例。納入標準：(1)經病理確診為胃癌；(2)Hp感染陽性；(3)均在我院接受手術，病理資料完整。排除標準：(1)術前行新輔助放化療；(2)合并其他惡性腫瘤；(3)資料不全。

1.2 方法 檢測168例胃癌組織和30例癌旁正常組織的NF-κB/P65及DNA結合抑制因子2表達，其中癌旁正常組織指距腫瘤邊緣5cm以上的組織。采用PV6000二步法檢測兩者表達：組織蠟塊連續切片，切片厚度4μm，經脫蠟、水化、熱修復及H2O2封閉后滴加一抗(兔抗人NF-κB/P65多克隆抗體，1∶100，Abcam)，4℃過夜后再滴加二抗IgG，37℃孵育0.5h，依次行DAB顯色、蘇木精復染及透明封片。NF-κB/P65為細胞核表達，DNA結合抑制因子2為細胞質表達，陽性判定標準為陽性細胞比例≥10%。

1.3 統計學方法 用SPSS24.0軟件處理數據；計數資料以百分比(%)表示，用χ2檢驗或確切概率法；兩變量的相關分析采用Pearson相關分析，P<0.05時差異有統計學意義。

2 結果

2.1 NF-κB/P65與DNA結合抑制因子2表達水平 168例胃癌患者中NF-κB/P65表達陽性率為56.55%(95/168)，DNA結合抑制因子2表達陽性率為71.43%(120/168)，兩者癌旁組織表達陽性率均為26.67%(8/30)；胃癌組織NF-κB/P65和DNA結合抑制因子2表達陽性率均顯著高于癌旁組織(P<0.05)。

2.2 NF-κB/P65及DNA結合抑制因子2表達與臨床病理特征的關系 DNA結合抑制因子2及NF-κB/P65表達均與腫瘤直徑、分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移數目、遠處轉移及TNM分期相關(P<0.05)，見表1。

表1 NF-κB/P65及DNA結合抑制因子2表達與臨床病理特征的關系

2.3 NF-κB/P65與DNA結合抑制因子2表達相關性分析 Pearson相關分析顯示，DNA結合抑制因子2和NF-κB/P65在胃癌患者表達存在正相關關系(r=0.568，P<0.05)。

3 討論

NF-κB/P65廣泛參與了細胞生長、分化、炎癥、免疫應答等多方面的表達調控；同時還可直接作用于機體微環境，誘發或加重炎癥反應，激活癌癥干細胞，拮抗其凋亡，加快其增殖[7]。DNA結合抑制因子2是人體內廣泛表達的分化抑制因子，通過與bHLH蛋白結合，能夠干擾 bHLH與相關轉錄因子結合，從而調控細胞分化、凋亡、增殖、浸潤及轉移等多項活動[8]。已有研究表明[6]，DNA結合抑制因子2可作用于NF-κB信號通路，調控NF-κB活性，影響炎癥及腫瘤微環境。另外的實驗研究還證實[9]，腫瘤細胞株轉染DNA結合抑制因子2后可見NF-κB表達水平顯著提高，故推測DNA結合抑制因子2對于癌細胞增殖促進作用可能依賴于NF-κB/cyclin D1途徑。此外，DNA結合抑制因子2還被證實可通過TLR4/NF-κB信號通路對機體免疫應答作用進行調節[10]。但兩者在胃癌患者中應用仍有待進一步探討。

有報道證實[11]，胃癌組織中NF-κB/P65表達水平較癌旁正常組織更高。本次研究結果顯示，胃癌組織NF-κB/P65表達陽性率顯著高于癌旁組織(P<0.05)，與上述報道結果一致。研究證實[12-13]，DNA結合抑制因子2在結直腸癌等多種惡性腫瘤中處于高表達水平，且其高表達可能與臨床預后不良相關。本次研究結果顯示，DNA結合抑制因子2在胃癌組織中表達陽性率為71.43%，顯著高于癌旁組織(P<0.05)。通過分析臨床病理資料發現，DNA結合抑制因子2及NF-κB/P65表達均與腫瘤直徑、分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移數目、遠處轉移及TNM分期相關(P<0.05)。可見兩者均與胃癌的病情及病程有關。胃癌患者腫瘤直徑越大、分化越差、浸潤越深、淋巴結轉移數量越多、合并遠處轉移及TNM分期高，DNA結合抑制因子2及NF-κB/P65表達水平亦越高。通過相關性分析顯示，DNA結合抑制因子2和NF-κB/P65在胃癌患者表達存在正相關關系。提示兩者在促進腫瘤發展過程中可能具有協同作用。胃癌的發生可能涉及多條通路、多個靶點，NF-κB/P65 與DNA結合抑制因子2就是其中之一，兩者可能具有協同促進腫瘤發生發展的作用，但是其機制尚需要進一步采取體外研究證實。

綜上所述，NF-κB/P65與DNA結合抑制因子2在胃癌的發生發展過程中具有協同促進效應，兩者表達水平均與腫瘤直徑、分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移數目、遠處轉移及TNM分期相關，但具體分子作用機制仍有待后續更為深入研究確證。