長鏈非編碼RNA SOX2OT在肝細胞癌組織中的表達及與預后的相關性

廖豪杰 李 俊 熊海林 袁 霞 袁樂中

廣東省惠州市中心人民醫院 (廣東 惠州， 516000)

肝細胞癌(HCC)是常見的惡性腫瘤，是一種高死亡率的原發性肝癌。外科手術是臨床上HCC最有效的治療方法，術后1年及5年生存率分別可以達到80%及50%[1]。轉移及復發是影響HCC患者預后的重要因素，術后2年及5年復發率分別為50%、75%左右[2]。因此，尋找預測HCC患者預后的生物標志物具有非常重要的臨床意義。SOX2重疊轉錄本(SOX2OT)是定位于人類染色體3q26.33的長鏈非編碼RNA(lncRNA)。有研究發現，lncRNA SOX2OT在多種惡性腫瘤組織中異常表達，且通過不同途徑調控惡性腫瘤的生物學過程[3,4]，有望成為精準治療及預后預測的新型生物標志物。本文將探討lncRNA SOX2OT在HCC組織中的表達情況，及其與患者預后的相關性，為臨床決策提供參考。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 回顧性納入2017年1月至2019年6月于我院實施手術切除治療的120例HCC患者。病例入選標準：①均經過臨床及病理證實為HCC，年齡≥18歲；②術前均未進行相關放化療或生物治療；③均自愿接收HCC切除術；④臨床資料及隨訪資料均完整。病例排除標準：①合并其他惡性腫瘤；②臨床資料及隨訪資料不完整；③癌旁組織無炎癥表現。納入的120例HCC患者中，男98例，女22例；年齡20～85歲，平均(52.36±8.19)歲，72例(60.00%)患者腫瘤直徑>5 cm，76例(63.33%)患者發生遠處轉移，56例(46.67%)患者的血清甲胎蛋白(AFP)>400 ng/ml，80例(66.67%)患者的乙型肝炎病毒(HBV DNA)>1 000 IU/ml。

1.2 入選患者HCC組織及癌旁組織lncRNA SOX2OT水平檢測 采用RNA提取Trizol試劑盒提取患者HCC組織及癌旁組織總RNA，使用逆轉錄試劑盒合成cDNA，按照TOYOBO SYBR Green Realtime PCR Master Mix使用說明書進行qRT-PCR檢測，采用2-△△Ct法計算lncRNA SOX2OT mRNA的表達水平。lncRNA SOX2OT引物序列為：5′-GCTCGTGGCTTAGGAGATTG-3′，5′-CTGGCAAAGCATGAGGAACT-3′；以GAPDH作為內參，引物序列為：5′-GTCAACGGATTTGGTCGTGATT-3′，5′-AGTCTTCTGGGTGGGCAGTGAT-3′。

2 結果

2.1 HCC組織lncRNA SOX2OT表達情況 入選患者HCC組織lncRNA SOX2OT表達水平為3.78±0.41，癌旁組織表達水平為1.53±0.22，差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2 lncRNA SOX2OT表達與臨床病理參數及血清學指標的相關性 按照HCC組織lncRNA SOX2OT的中位表達水平，將120例HCC患者分為高表達組(72例)與低表達組(48例)。98例男性患者中高表達55例(56.12%)，22例女性患者中高表達17例(77.27%)；56例年齡<50歲患者中高表達34例(60.71%)，64例年齡≥50歲患者中高表達38例(59.38%)；lncRNA SOX2OT表達與性別、年齡均無明顯相關性(P>0.05)。lncRNA SOX2OT表達與臨床病理參數及血清學指標的相關性見表1。

表1 lncRNA SOX2OT的表達與HCC患者病理參數的相關性 [例(%)]

2.3 lncRNA SOX2OT表達與預后的相關性 每6個月對患者進行隨訪，隨訪時間1～60個月(中位24個月)。隨訪期間，死亡39例(32.50%)，復發31例(25.83%)。lncRNA SOX2OT高表達組患者3年無瘤生存率及總生存率分別為25.00%(18/72)、41.67%(30/72)，lncRNA SOX2OT低表達組分別為64.58%(31/48)、85.42%(41/48)，差異均有統計學意義(P<0.05)。見圖1。

圖1 不同lncRNA SOX2OT表達水平HCC患者的Kaplan-Meier生存曲線

2.4 入選患者生存危險因素的COX回歸模型分析 COX回歸模型分析顯示，低分化程度、有遠處轉移及SOX2OT高表達是影響HCC患者無瘤生存率及總生存率的獨立危險因素(P<0.05)。見表3。

表3 HCC 患者無瘤生存率及總生存率的COX回歸模型分析

3 討論

HCC屬于原發性肝細胞癌的一種，惡性程度高，患者預后差，已經成為臨床研究的熱點。目前，HCC的發病機制還不夠清楚，但是研究發現多種基因參與了HCC的發生發展過程，例如：lncRNA、circ RNA等[5]。lncRNA是廣泛存在于細胞核與細胞質中的一種線型RNA。近年來的大量研究發現，lncRNA能夠通過多種作用途徑參與惡性腫瘤的增殖、遷移及侵襲等生物學行為，從而患者的預后產生影響[6,7]。SOX2OT基因是定位于人類染色體3q26.33的一種lncRNA，具有多個轉錄起始點參與到多種人體生物學過程中。而且也有研究證實，lncRNA SOX2OT在多種惡性腫瘤的發生發展過程具有重要作用，并且與患者的預后存在明顯相關性[8,9]。

lncRNA SOX2OT在肝癌中的研究報道很少。有一項研究發現，在84例肝癌患者中，相對于癌旁組織，SOX2OT在肝癌組織中過表達[10]；而本研究中，lncRNA SOX2OT在HCC組織中的表達水平明顯高于癌旁組織；有研究顯示，SOX2OT與肝癌組織分化程度、TNM分期及靜脈侵犯均存在一定的相關性[11]；本研究中，lncRNA SOX2OT的表達與腫瘤病灶數目、分化程度、遠處轉移及HBV水平均存在明顯相關性。以上研究結果顯示，lncRNA SOX2OT在HCC組織中高表達可能預示患者的不良預后。lncRNA SOX2OT高表達HCC患者的無瘤生存率及總生存率均明顯低于低表達HCC患者，進一步COX回歸模型分析得出lncRNA SOX2OT高表達是營影響HCC患者生存的獨立危險因素；上述研究結果表明lncRNA SOX2OT是HCC患者預后的潛在生物分子標志物，但是作用機制尚清楚。有研究發現，SOX2OT能夠對惡性腫瘤細胞的活性進行明顯的抑制，通過SOX2OT的自我更新能力，能夠明顯降低惡性腫瘤細胞的增殖、遷移及侵襲等生物學能力[12,13]。

綜上所述，lncRNA SOX2OT在HCC組織中的高表達與患者的預后不良有關。但本研究屬于小樣本的回顧性研究，還需要多中心大樣本研究進行進一步證實，且還需要對lncRNA SOX2OT預測HCC患者預后的作用機制進行深入研究。