HBV相關慢加急性肝衰竭血清AFP、GP73的表達與疾病預后關系分析*

楊 濤 蘇 忠 楊 奕 劉 劍 李高巖

秦皇島市第一醫院普外一科 (河北 秦皇島， 066000)

慢性乙型肝炎(CHB)是我國的高發疾病之一，主要是由于乙型肝炎病毒(HBV)感染所致，部分患者可在急性損傷或者其余某些誘因的作用下，在短時間內出現急性或者亞急性的肝功能失代償，形成慢加急性肝衰竭(ACLF)，短中期病死率可高達50%～90%[1,2]。尋找與HBV相關ACLF(HBV-ACLF)的指標在早期干預疾病、改善預后方面具有重要作用。甲胎蛋白(AFP)是原發性肝癌診斷中的特異性標志物，臨床上也多用于評價肝細胞再生情況[3]。高爾基體蛋白73(GP73)是近年來新發現的一類肝癌腫瘤標志物，有研究證實，血清AFP、GP73聯合檢測更有助于提高肝癌檢出率，了解肝細胞損傷程度[4]。但關于兩者在HBV-ACLF患者中的研究報道仍較少，因此，本研究通過觀察HBV-ACLF患者血清AFP、GP73的表達，旨在探討其與疾病預后的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2016年1月至2020年我院接診的60例HBV-ACLF患者、60例CHB患者臨床資料。

1.2 診斷標準 HBV-ACLF診斷標準參照《肝衰竭診療指南》[5]：有HBV感染病史，短期內出現極度乏力、消化道癥狀、黃疸、凝血功能障礙等癥狀，通過肝組織病理學檢查顯示有不同程度的肝細胞壞死性病變。CHB診斷標準參照《慢性乙型肝炎防治指南(2015年更新版)》[6]，并通過HBV血清學檢查、HBV DNA定量、實驗室指標等檢查確診。

1.3 納排標準 納入標準：①符合HBV-ACLF、CHB相關診斷標準者；②年齡18～60歲者；③臨床資料完整者。排除標準：①其余類型肝炎病毒感染者；②合并失代償期肝硬化者；③合并肝癌者；④由于藥物、酒精、自身免疫性疾病等所致的肝功能衰竭者；⑤患者合并其余對生命安全有影響的重大軀體疾病、臟器功能障礙等；⑥妊娠期、哺乳期患者。并選擇同期于我院體檢的60例健康人員作為對照組，該組人員體檢報告結果均正常，無肝炎病史及其他重大疾病。

1.4 檢測指標 收集3組受試者的性別、年齡等一般資料，收集清晨空腹靜脈血5 ml，凝聚2 h后，將血液樣本上離心機進行離心處理，轉速為3 500 r/min，時間15 min，完成后收集上層血清儲存于-80℃的冷凍箱中準備檢測。采用電化學發光法記錄乙肝表面抗原(HBeAg)陽性情況，定量PCR法檢測血清HBV DNA定量水平；血清AFP的檢測選擇羅氏公司生產的全自動生化免疫分析儀Coba6000及其配套的試劑盒，正常參考值<25 ng/ml；GP73的檢測使用酶聯免疫吸附法(ELISA)試劑盒，購自北京熱景生物技術有限公司，并根據標準濃度曲線進行計算最終結果。

1.5 HBV-ACLF組亞分組方法

1.5.1 不同病情程度 參照《肝衰竭診療指南》[6]，對HBV-ACLF組患者的不同病情程度進行分組。①早期組：有極度乏力以及明顯厭食、腹脹、嘔吐等嚴重消化道癥狀；出現黃疸進行性加深表現，血清TBil結果>171 μmol/L或者每日升高程度≥17.1 μmol/L；有出血傾向，PTA 31%～40%；尚未發生肝性腦病或明顯腹水。②中期組：在病情早期的基礎上，病情出現進展，具有下述兩項標準之一。a.發生Ⅱ度以下的肝性腦病，和(或)出現明顯的腹水；b.出血傾向明顯，有出血點或者瘀斑等癥狀，PTA 21%～30%。③晚期組：在病情中期的基礎上，病情進展，具有下述3項標準之一。a.發生上消化道大出血、肝腎綜合征、嚴重肝腎綜合征、感染、難以糾正的電解質紊亂等現象；b.發生Ⅲ度以上的肝性腦??；c.出血傾向嚴重，PTA≤20%。

1.5.2 不同預后 根據患者3個月后的病情轉歸情況分組，其中病情好轉出院或者病情得到穩定控制的患者分為生存組，病情惡化死亡的患者為死亡組。

2 結果

2.1 3組受試者基線情況比較 見表1。

表1 3組受試者基線情況比較

2.2 3組受試者血清AFP、GP73表達水平比較 見表2。

表2 3組受試者血清AFP、GP73表達水平比較

2.3 不同病情程度HBV-ACLF患者血清AFP、GP73表達水平比較 見表3。

2.4 不同預后HBV-ACLF患者血清AFP、GP73表達水平比較 見表4。

表3 不同病情程度HBV-ACLF患者血清AFP、GP73表達水平比較

表4 不同預后HBV-ACLF患者血清AFP、GP73表達水平比較

2.5 血清AFP、GP73和HBV-ACLF患者預后的Logistic回歸分析 將血清AFP、GP73作為自變量，將是否死亡作為因變量，經過Logistic回歸分析顯示，血清AFP、GP73水平均是影響預后的獨立危險因素(P<0.05)。見表5。

表5 血清AFP、GP73表達水平和HBV-ACLF患者預后的Logistic回歸分析

3 討論

研究顯示，亞洲國家中約70%ACLF患者由HBV感染所致，尋找一種有效評估病情及預后的可靠指標在挽救預后方面顯得極為重要[7]。HBV-ACLF的發病機制較為復雜，其中肝細胞的衰竭參與疾病的發生和發展。

AFP屬于一種單分子糖蛋白，是白蛋白家族成員，主要合成在胎兒時期，正常的成年人機體中所檢測出的AFP含量較少，但當肝細胞遭受到損傷后，抑制AFP合成的基因會發生激活，致使AFP大量合成于肝臟，并增加血清中AFP的表達[8]。目前AFP已成為臨床上具有較高敏感度的肝臟腫瘤標記物，其表達升高可提示肝臟存在著惡性占位性病變[9，10]。近年來研究發現，由于AFP參與著肝細胞的增殖及調控過程，而在肝衰竭過程中，AFP的升高提示可能與肝細胞的生長速度有關，并和患者的預后關系密切[11]。

GP73是美國學者Kladney等在對成人巨細胞肝炎病原學研究時所發現的一類跨膜糖蛋白，其基因主要位于第9號染色體，相對分子含量約為45 000，隨著之后臨床研究的不斷深入，GP73已被證實在肝癌的診斷中具有重要意義[12]。王春艷等[13]研究中指出，CHB患者血清中GP73的表明顯升高，但和肝臟炎癥程度、肝纖維化之間呈正相關。另也有研究指出，在HBV慢性病毒感染患者中，GP73的表達和HBeAg陽性、病毒載量之間無明顯關系，但與肝臟疾病進程之間密切相關，有助于判斷肝損傷程度[14]。

本研究結果顯示，和其余兩組相比，HBV-ACLF組患者血清AFP、GP73表達明顯升高，隨著病情的加重，血清AFP逐漸降低，而GP73逐漸升高，且兩者均是影響預后的獨立危險因素，顯示出血清AFP、GP73在HBV-ACLF患者的發生和發展過程中均具有重要作用，通過分析是由于有以下原因：①和CHB及健康人群相比，HBV-ACLF存在著肝細胞損傷現象，血清AFP的含量出現升高，而AFP又具有促進變異性蛋白含量增加、肝細胞再生等作用，隨著病情的加重，肝細胞壞死程度會更為嚴重，肝細胞再生能力越差，因此也就導致了AFP表達更低的現象，且在死亡患者中，肝細胞的再生速度遠遠不及其壞死速度，AFP的表達則呈急劇降低趨勢，李雷等[15]分析中指出，當AFP>121 μg/L時可提示急性肝衰竭患者預后較好，生存情況好，但當小于這個水平時則可提示患者預后較差，病死率較高；和本研究得出的結論有一定相似性；②和CHB患者相比，HBV-ACLF患者的肝臟會處于更為嚴重的炎癥及應激的狀態，可進一步加劇GP73大量釋放，而隨著GP73的過量表達，也可進一步加重肝損傷程度，影響肝細胞再生，形成一種惡性循環，且在病情較重及死亡的患者中，肝損傷程度和肝臟組織會發生重構及纖維化，細胞核及線粒體的正常生理功能遭受到破壞，此過程也會導致GP73的大量釋放。因此筆者認為，通過了解HBV-ACLF患者基線AFP、GP73的表達有助于判斷患者短期預后，而在今后的臨床中，也可通過動態監測AFP、GP73的表達變化，在指導臨床用藥上也具有積極意義。但本研究也存在不足，僅觀察了基線血清AFP、GP73的表達，未分析兩者在對HBV-ACLF診斷價值等內容，此后也需進一步深入研究。