自身免疫性肝炎患者外周血OX40/OX40L變化及臨床意義

張羽 楊靜 田嵐

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)多發于女性，屬于進行性炎癥肝病[1]。AIH患者早期沒有明顯癥狀，臨床缺乏有效的早期診斷指標[2]。T、B淋巴細胞異常激活及單核巨噬系統的活化與AIH的發生關系密切[3-4]。OX40在激活的 CD4+、CD8+T 淋巴細胞表面表達，OX40L多表達于激活的單核巨噬細胞、B淋巴細胞，OX40/OX40L在自身免疫性疾病的發生中具有關鍵作用[5-6]。然而，關于AIH患者外周血OX40/OX40L變化及臨床意義尚未完全清楚，故本研究開展上述問題的探討，詳情如下。

資料與方法

一、研究對象

選取2019年7月至2020年12月綿陽市中心醫院收治的85例AIH患者(研究組)及同時間段體檢的62例健康人群(對照組)為研究對象，經醫院倫理委員會批準。

納入標準：①研究組均符合《2019年美國肝病學會實踐指引和指南:成人和兒童自身免疫性肝炎的診斷與治療》[7]中關于成人AIH診斷標準者；研究組患者均為首次確診者；對照組近3個月未發生疾病；簽署研究知情同意書。

排除標準：伴有惡性腫瘤、心肝腎等重要臟器功能障礙、血液系統疾病及免疫缺陷者；近1個月內接受過激素、受體抑制劑等藥物治療者；處于哺乳期、孕期者；其他類型肝臟疾病、藥物性肝損傷患者等；參與其他研究者。

二、指標檢測方法

研究組治療前、對照組體檢時空腹采血3 mL，乙二胺四乙酸抗凝，抗凝全血分別加入2支試管，之后在1支試管中加入抗人CD4-FITC、抗人OX40-PERCP抗體，另1支試管加入抗人CD19-FITC、抗人OX40L-PERCP，最后避光孵育、離心、棄上清、洗滌，采用用美國貝克曼庫爾特公司的FACSCalibur式流式細胞儀檢測外周血OX40、OX40L情況。

三、資料收集

收集性別、年齡、吸煙史、飲酒史、合并癥、T淋巴細胞亞群、血清C反應蛋白含量、外周血白細胞計數、白細胞介素-6、白細胞介素-4、白細胞介素-21、趨化因子、谷丙轉氨酶、外周血OX40、OX40L陽性表達等資料。

四、統計學分析

結 果

一、兩組資料

兩組性別、年齡、體質量指數、合并癥、吸煙史、飲酒史對比差異無統計學意義(P>0.05)，兩組趨化因子、T淋巴細胞亞群、谷丙轉氨酶、C反應蛋白、白細胞計數、白細胞介素-6、白細胞介素-4、白細胞介素-21、OX40、OX40L對比差異具有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組資料(±s)

二、 影響AIH發生的多因素分析

以AIH是否發生為因變量(未發生=0，發生=1)，T淋巴細胞亞群比例、C反應蛋白、趨化因子、谷丙轉氨酶、白細胞計數、白細胞介素-6、白細胞介素-4、白細胞介素-21、OX40、OX40L為自變量，將自變量賦值為連續變量行Logistic回歸分析，顯示OX40、OX40L、白細胞介素-21是AIH發生的影響因素(P<0.05)，見表2。

續表1

表2 AIH的多因素分析

三、OX40/OX40L預測AIH發生的診斷價值

ROC曲線分析結果顯示，OX40、OX40L及二者聯合對AIH的發生具有一定診斷效能，其AUC分別為0.804、0.789、0.914，OX40聯合OX40L的AUC最大，具體見表3與圖1。

表3 OX40/OX40L預測AIH發生的診斷價值

圖1 OX40、OX40L及二者聯合對AIH診斷的ROC曲線

討 論

AIH患者病情惡化可形成暴發性肝衰竭、肝癌，早期有效診斷對于及時開展醫療措施極其重要[8-9]。AIH早期癥狀不明顯，多數患者確診時已展為肝炎。故臨床急需尋找有效的診斷指標以便早日診斷AIH，及時阻斷疾病進展，改善預后。

本研究發現OX40、OX40L水平是AIH發生的影響因素。AIH的發生與機體T淋巴細胞功能亢進、B淋巴細胞抗體分泌異常密切相關[10-11]。OX40在激活的 CD4+、CD8+ T 淋巴細胞表面表達，OX40L多表達于激活的單核巨噬細胞、B淋巴細胞，OX40/OX40L通路活化后，刺激CD4+ T淋巴細胞遷移、分化，CD8+ T淋巴細胞生理功能增強，B淋巴細胞異常增殖、分化，產生自身抗體。OX40 /OX40L可刺激機體OX40+ CD4+ T淋巴細胞過度表達，導致炎癥因子過度分泌，加重機體炎癥反應，當OX40通路受到有效抑制后，機體促炎反應明顯減弱[12-13]。OX40 /OX40L表達高，機體CD4+ T淋巴細胞生理功能則過度強化，自身抗體、炎性細胞因子異常分泌，且CD4+ 、B淋巴細胞表面應答協同刺激分子共同作用，免疫系統功能發生改變，導致機體過度免疫應答、自身抗體分泌過量，增加了自身免疫性疾病的發生風險[14]。ROC曲線分析顯示OX40、OX40L聯合診斷AIH的AUC最大，提示OX40、OX40L聯合診斷AIH的價值高于單獨診斷。臨床檢測外周血OX40/OX40L變化有助于監測自身免疫性疾病的發生、發展情況，二者聯合可全面發揮優勢，診斷價值較高[15]。

綜上，建議臨床動態監測外周血OX40/OX40L變化，有助于早期診斷AIH。OX40 /OX40L在AIH中的具體作用機制需后續多中心、大樣本量研究。