辣木基質對云南羊肚菌栽培特性的影響*

張 慧，錢 泉，楊鉞戈，趙自愛，周錦燕，張 蕓，李 躍，李樹紅，曾千春，2**

（1.云南農業大學農學與生物技術學院，云南 昆明 650201；2.云南農業大學云南辣木研究所，云南 昆明 650201；3.云南省農業科學院生物技術與種質資源研究所，云南 昆明 650223）

羊肚菌（Morchella spp.）隸屬于子囊菌亞門（Ascomycotina） 盤菌綱 （Discomycetes） 盤 菌 目（Pezizales） 羊肚菌科 （Morohellaceae） 羊肚菌屬（Morchella），是珍貴的食用和藥用真菌[1-2]。隨著人們生活水平的日益提高，更多人選擇食藥同源的羊肚菌作為營養滋補佳品。20世紀80年代初，我國開始羊肚菌人工栽培技術的研究[1-2]，目前梯棱羊肚菌（Morchella importuna）、六妹羊肚菌 （Morchella sextelata） 在我國的栽培量位居前列[3-5]。辣木（Moringa oleifera Lam），屬辣木科 （Moringaceae） 辣木屬（Moringa）植物，多年生喬木，速生，且葉片、莖稈中含有豐富的礦物質、維生素和氨基酸[6-7]。在云南，菜用型辣木每年都要進行修剪，產生大量廢棄莖桿，將其添加至羊肚菌栽培基質中，可以充分利用辣木莖桿中的營養成分，也能解決辣木莖桿廢棄資源的轉化利用問題，豐富了羊肚菌栽培基質的原料來源，為栽培出更高產優質的羊肚菌提供更多可能。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

菌株YD1號（梯棱羊肚菌）、YD4號（六妹羊肚菌）來源于云南省農業科學院，生物技術與種質資源研究所食用菌研究中心。羊肚菌母種培養基選擇PDY培養基（葡萄糖20 g、瓊脂15 g、蛋白胨2 g、酵母粉2 g、磷酸二氫鉀0.2 g，水1 000 mL，自然pH），配好后用電磁爐加熱，使瓊脂溶解，裝入三角燒瓶，放入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌。接種后封口，放入23℃恒溫培養箱中培養，約7 d～10 d菌絲長滿，母種制備成功，放入4℃冰箱中儲存備用。

1.2 基質配比

栽培袋中的基質配比分為2組，配方組成見表1。

表1 基質配比Tab.1 Formula proportion

由表1所示，基質配方分為辣木組配方和對照組（雜木屑）配方，辣木屑[8]、雜木屑、麥殼提前潤濕12 h，將各個配方基質分別攪拌均勻后裝入18 cm×35 cm×0.05 cm的菌袋，每個菌袋裝基質500 g，每組12袋（每塊地可起3壟，每壟需播撒4袋，每袋500 g），控制含水量在55%～60%，放入滅菌鍋滅菌2 h（121℃、0.15 MPa）[3]，待冷卻后，在超凈工作臺上接入母種15袋，后放入菌絲培養室培養。

1.3 羊肚菌菌絲生長速率測定方法

接種后，每隔2 d～4 d用記號筆在菌袋上劃線記錄一次，直至菌絲長滿整袋。每組配方從中任意取出12袋計算平均速率，每2條相臨劃線間任取3段距離，計算平均值，得出菌絲平均生長速率；最后再將菌袋上所有相臨劃線間的平均生長速率取平均值，得到整個菌絲生長階段的菌絲平均生長速率。記錄菌絲生長過程中菌核的發生時間及成熟時間，菌核從白色小點逐漸變成黃色即為菌核成熟[9-10]。

1.4 羊肚菌大棚播種及管理

將菌株YD1號（梯棱羊肚菌） 和YD4號（六妹羊肚菌）播種于云南省農業科學院嵩明現代試驗基地大棚，羊肚菌菌絲長滿整袋即可進行大田播種栽培。大田播種時，將羊肚菌栽培袋撕開、捏碎放入小盆，播種深度約4 cm～5 cm。每小區播量為4袋（1.76袋/m2），播撒完畢后覆土，澆水，播種7 d后采用滴灌（每天打開滴灌澆水10 min或每2天澆水15 min，采用滴灌會降低澆水時對表面菌絲的傷害）[9-10]。

1.5 羊肚菌成分測定方法

大棚羊肚菌出菇后進行采收、稱重，得到每試驗組產量數據。將田間最先收獲的辣木基質栽培的羊肚菌及對照送至昆明市農業農村部產品質量監督檢測測試中心，測定其粗蛋白按照GB 5009.5-2016食品安全國家標準食品中蛋白質的測定[20]方法、總糖按照GB 5009.7-2016食品安全國家標準食品中還原糖的測定[21]方法、水分按照GB 5009.3-2016食品安全國家標準食品中水分的測定[22-23]方法、灰分按照GB 5009.4-2016食品安全國家標準食品中灰分的測定[24]方法、脂肪按照GB 5009.6-2016食品安全國家標準食品中脂肪的測定[25]方法的含量，每個檢測項目設置3個重復[11]。

1.6 數據處理

將菌種培養期間和栽培階段記錄的試驗數據，利用統計軟件Excel 2016和DPS 7.05對所得數據進行統計分析。對不同配方處理間的差異進行單因素方差分析和Duncan氏多重比較（P<0.05）。

2 結果與分析

2.1 不同培養基質羊肚菌菌核菌絲生長情況

不同配方基質羊肚菌菌核及菌絲的生長情況見表2、表3。

表2結果表明，基質中添加60%辣木莖桿栽培的2種羊肚菌（MR1組和MR4組） 菌核出現時間均比對照組提前2 d；菌核成熟時間均比對照組提前3 d～4 d。2種羊肚菌菌絲生長速度MR1組為12.594 3 mm·d-1、MR4 組 （六妹羊肚菌） 為 15.932 1 mm·d-1，顯著快于對照組。不同栽培基質羊肚菌菌絲滿袋情況見表3。

表2 不同基質羊肚菌菌核菌絲生長情況Tab.2 Growth of Morchella spp.sclerotium in different substrates

表3 不同基質羊肚菌菌絲滿袋天數Tab.3 Full bag days of Morchells spp.mycelium with different substrates

由表3可知，添加辣木莖桿基質培養的羊肚菌首袋滿袋菌絲均早于對照2 d；末袋均早于3 d。

2.2 大棚播種生長狀態

2種羊肚菌不同基質栽培后移入大棚栽培5 d的生長情況見圖1。播種50 d后的生長情況見圖2。

圖1 播種5 d后羊肚菌生長情況Fig.1 Growth of Morchella spp.after sowing for 5 days

由圖1、圖2所示，在大田分別播種4種羊肚菌栽培種，播種5 d后，MR1組開始形成大量的菌霜，CK1無明顯變化；MR4組出現零散的少量菌霜，CK4無明顯變化；播種50 d后，MR1組發現土面有類似于羊肚菌原基的物質形成；播種69 d后，在MR1組土面出現羊肚菌幼菇，證明了用辣木莖桿作替代基質可以栽培羊肚菌；播種80 d后，CK1、CK4開始陸續出菇。

圖2 梯棱羊肚菌在辣木基質下的生長情況Fig.2 Growth of Morchella importuna under Moringa oleifera stem substrate

2.3 羊肚菌產量測定

供試4組羊肚菌各在21.12 m2樣地中的5次采收結果見表4。

由表4可知，樣地中梯棱羊肚菌（MR1組）添加辣木培養出的鮮菌總產量為8.4 kg，高于對照組2.3 kg；六妹羊肚菌（MR4組） 添加辣木培養出的鮮菇總產量為2.9 kg，對照組為3.3 kg，低于對照組。在第5次采收時，梯棱羊肚菌（MR1組） 還在持續有幼菇長出，六妹羊肚菌（MR4組）幾乎結束了整個生長周期。

表4 羊肚菌產量Tab.4 Yield of Morchella spp.

2.4 辣木基質栽培六妹羊肚菌成分測定

首次收獲的辣木基質培養六妹羊肚菌的成分含量統計見圖3。

圖3 辣木基質培養六妹羊肚菌成分含量Fig.3 Component content of Morchella sextelata cultured in Moringa oleifera substrate

由圖3所示，六妹羊肚菌辣木組（MR4組） 蛋白質、總糖、水分、灰分、粗脂肪含量依次為3.67%、0.42%、88.10%、1.09%、7.02%；與對照組（CK4組）相比，蛋白質含量提高0.27%，粗脂肪含量提高1.71%，灰分含量降低0.21%。從辣木基質培養羊肚菌的成分分析來看，辣木不僅可以作為替代基質來栽培羊肚菌，而且可以提高羊肚菌品質。

3 結論與討論

3.1 辣木基質對菌核菌絲生長情況的影響

以辣木莖桿為基質栽培梯棱羊肚菌和六妹羊肚菌，均能使菌核更早發生、更快成熟，并能加速菌絲生長，縮短菌絲培養時間。菌絲體和菌核的產生是羊肚菌子實體形成的重要階段，而不同的基質對菌絲和菌核產生的時間和數量有顯著影響[12]。研究中對照組的菌絲生長速度與賀國強等[13]研究結果一致。而采用辣木莖桿作基質栽培的羊肚菌菌絲生長速度有顯著提高，可以縮短生長周期。故在后續研究中，可嘗試不同比例的辣木配方栽培羊肚菌，為進一步篩選最適羊肚菌栽培的辣木配方。

3.2 播種后對羊肚菌產量的影響

研究結果證實了采用辣木莖桿作基質可栽培羊肚菌，并且可以提高梯棱羊肚菌的產菌量，帶來更高的經濟效益；與六妹羊肚菌相比，辣木配方更適宜于栽培梯棱羊肚菌。儲甲松等[14]采用12 m2的試驗地栽培野生羊肚菌 [Morehella esculenta （L.）Pers.]，其產量在1.11 kg～1.22 kg，與本研究中六妹羊肚菌的產量相近。對于羊肚菌的人工栽培，目前有較多研究，有的試驗產量很高，但重復性普遍較低，產量不能穩定[15]。因此，后續將進一步研究不同比例的辣木配方栽培梯棱羊肚菌品種，篩選出適宜于該品種生長的辣木配方，使其產量穩定。

3.3 辣木莖桿作基質對羊肚菌營養成分的影響

添加辣木莖桿作基質栽培羊肚菌的試驗組MR4和對照組CK4相比，提高了羊肚菌中蛋白質和粗脂肪的含量。研究表明，羊肚菌蛋白質包含19種氨基酸，其中含有多數人體必需氨基酸[16]，并且具有抗氧化、提高免疫力和抗癌的作用[17]，是營養和保健佳品。羊肚菌的脂肪酸成分中：亞油酸占56.0%、油酸占28.41%、硬脂酸占2.02%、軟脂酸占13.54%[18]，其中亞油酸含量最高，也是其主要藥用成分，具有預防動脈粥樣硬化、降低膽固醇、促進人體腎上腺皮質激素分泌、提高人體應激能力的功效[19]。因此，采用辣木莖稈基質栽培羊肚菌，可以提高其營養價值，但造成成分變化的因素還有待進一步研究。