食管癌診斷、分期和預后中多腫瘤抑制基因-1、分泌素-3A1的表達研究

韓曉亮

（安陽市第五人民醫院消化內科，河南 安陽 455000）

食管癌又稱為食道癌，是發生在食管粘膜上皮組織的惡性腫瘤，占所有惡性腫瘤的2%[1]。隨著年輕群體生活習慣的改變，近年來食管癌的發病率呈上升趨勢[2]，因此，對食管癌的疾病相關的細胞分子進行研究對提高患者診斷、治療及預后具有積極意義。多項臨床研究表明：細胞周期的改變是導致組織發生癌變的主要原因，而癌基因及抑癌基因不僅在腫瘤的發生、發展中具有決定性意義， 而且在腫瘤的早期診斷及防治中扮演著越來越重要的角色[3-5]。有食管癌相關研究中發現，多腫瘤抑制基因-1（Multiple tumor suppress-1，MTS-1）及分泌素-3A1（Secretoglobin 3A1，SCGB3A1）在食管癌病程發展中發揮了重要作用[6]，但具體相關性尚未明確[7]。本研究通過對本院確診為食管癌的79例患者進行回顧性分析，探究MTS-1、SCGB3A1的表達在患者的臨床病理診斷及預后中的作用，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析我院2014年10月至2017年10月期間收治的79例食管癌患者的臨床資料，其中男性46例，女性33例，年齡21～74歲，平均年齡 61.38±7.21歲，病程為 1～18 m，平均病程為9.06±1.14 m。根據臨床分期[8]可知，31例患者處于鼻咽癌I～Ⅱ期，48例患者處于Ⅲ～Ⅳ期。

納入標準：符合食管癌診斷標準且經病理檢查結果證實[9]；術前未接受過抗癌輔助治療，臨床資料均完整。排除標準：伴嚴重系統性疾病；妊娠期或哺乳期女性；合并全身其它類型惡性腫瘤。本研究經醫院醫學倫理會審核通過，臨床資料均完整。

1.2 S-P免疫組化染色檢測MTS-1和SCGB3A1

1.2.1 組織標本采取

79 例食管癌患者均于我院在胸腔鏡下行微創手術治療，于術中留取79份食管腫瘤組織及79份癌旁 5 cm處正常食管黏膜組織標本作為研究對象。

1.2.2 檢測方法

采用S-P免疫組化染色法測定腫瘤組織以及癌旁組織MTS-1和SCGB3A1的表達情況。具體方法：組織切片經常規脫蠟和水化后，用3%過氧化氫去除內源性酶，經微波抗原修復，加入兔抗人MTS-1單克隆抗體和SCGB3A1單克隆抗體，行DAB顯色，蘇木精復染，光鏡下觀察結果。分別用已知的陽性食管癌組織切片作陽性對照，正常小鼠和兔血清及 PBS代替一抗作陰性對照。MTS-1、SCGB3A1蛋白免疫組織學結果判定[10]：由兩位病理科醫生在400倍光鏡下隨機選取10個視野對染色細胞數量和染色程度進行評分，其中陽性細胞數量＜1%為 0分，1%～10%為 1分，11%～50%為2分，50%以上為3分；染色無染色為0分，弱陽性顯黃色為1分，中等陽性顯淺棕色為2分，強陽性顯棕褐色為3分。將兩者所得分數合計：無表達或低表達：0～3分，高表達：4～6分。

1.3 統計學方法

應用SPSS 18.0統計學軟件對數據進行分析。計量資料以均數±標準差（±SD）表示，采用t檢驗；各項計數資料以百分比（%）表示，采用χ2檢驗。若P＜0.05，代表兩組比較存在明顯差異。

2 結果

2.1 MTS-1及 SCGB3A1蛋白在食管癌癌組織和癌旁組織的表達水平分析

MTS-1、SCGB3A1在癌組織中的高表達率分別為27.85%、77.22%，對應的癌旁組織中高表達率分別為79.75%和22.52%，癌組織中MTS-1的表達低于癌旁組織，SCGB3A1表達水平低于癌旁組織 (P＜0.05)，見表1、表2。

表1 食管癌癌組織中MTS-1的表達與患者臨床病理特征的關系（n（%））

表2 食管癌癌組織中SCGB3A1的表達與患者臨床病理特征的關系（n（%））

2.2 食管癌患者MTS-1、SCGB3A1蛋白的表達與臨床病理特征的相關性分析

經 Spearman相關進行分析，食管癌患者MTS-1、SCGB3A1的表達水平與腫瘤分期、淋巴結轉移程度呈負相關，與瘤分化程度呈正相關(P＜0.05)，見表3。

表3 食管癌患者MTS-1、SCGB3A1的表達與臨床病理特征的相關性分析

2.3 預后情況

隨訪2年后，79例結食管癌患者2年總生存率73.42%（58/79）。MTS-1高表達和低表達的2年總生存率分別為 95.45%（21/22）、64.91%（37/57），具有明顯差異（χ2=7.587，P=0.006）；SCGB3A1高表達和低表達的 2年總生存率分別為 94.12%（16/17）、67.74%（42/62），具有明顯差異（χ2=4.756，P=0.029）。

3 討論

我國是食管癌的高發地區，也是食管癌病死率最高的國家之一，由于食管癌早期的臨床癥狀不明顯，患者未引起重視，一旦確診，往往都已處于疾病的中晚期，對患者造成了不可逆轉的損傷[11]。

由于缺少對于危重疾病治療的輔助診斷和實時監控的有效方法，腫瘤治療一直是臨床上的熱點和難點[12]。目前臨床上核磁共振、超聲等影像學技術仍舊是檢測腫瘤發生的主要手段，而其費用較高、靈敏性較低，監測機體腫瘤病變情況有限[13]。近年來，隨著生物學研究的不斷深入，有不少研究發現[14-15]：腫瘤的發生與多種基因、蛋白及因子的水平表達有密切聯系，故近年來臨床上對相關基因、蛋白及因子的檢測逐漸成為對腫瘤診斷、病情及預后的評估的有效手段。

MTS-1是一種具有抑制腫瘤細胞生長作用的抑癌基因，已被證實與人體組織細胞發生癌病有著密切聯系[16]。對食管癌前病變的不同時期、不同類型的癌變組織以及正常食管組織運用免疫組化法檢測 MTS-1表達顯示，癌前病變組織中MTS-1的表達明顯低于正常組織，且隨病情的變化及加重，MTS-1的表達呈現下降趨勢；而在不同類型的癌變組織中無明顯差異[17]。而本研究結果顯示，MTS-1存在于癌旁組織及癌組織中，但在癌組織中的表達率顯著低于癌旁組織，結合上述研究可有效的說明，MTS-1基因的異常表達在食管癌發生早期即已經存在，且隨著病變的不斷加重其表達不斷下降，提示：該基因因子的缺失可能導致食管癌的發生，且在癌變病變過程中發揮著重要的作用。

SCGB3A1也是抑癌基因的一種，而國內外有相關研究對其在組織中檢測發現：在正常食管上皮組織、胃、乳腺組織中均呈高表達狀態，而在食管癌、胃癌、乳腺癌中其表達水平較低，甚至檢測不到[18-19]，SCGB3A1的表達在上述腫瘤組織中呈抑制狀態，可有效阻止細胞發生浸潤、轉移[20]。而在本研究中發現，SCGB3A1在癌旁組織中表達率顯著高于癌組織，這有效的驗證了上述研究的論點，且在腫瘤分期處于Ⅲ～Ⅳ期、伴隨淋巴結轉移、腫瘤分化為低分化的患者中SCGB3A1的

表達明顯低于腫瘤分期處于I～Ⅱ期、無淋巴結轉移、腫瘤高分化的患者，其表達與腫瘤分期、淋巴結轉移程度呈負相關，與瘤分化程度呈正相關，由此也進一步說明了SCGB3A1基因因子的表達率下降可能是引起食管癌惡化的重要原因之一。

此外，本研究對79例食管癌患者2年預后隨訪發現：MTS-1、SCGB3A1表達的差異與食管癌患者生存率有著一定聯系，其中MTS-1低表達與SCGB3A1低表達患者預后 2年生存率顯著低于MTS-1高表達和SCGB3A1高表達患者，由此提示，及時監測MTS-1與SCGB3A1的表達水平對評估食管癌預后生存具有一定臨床價值。

綜上所述，MTS-1、SCGB3A1在食管癌中呈低表達，且與其病理組織特征存在相關性，檢測兩者表達情況對臨床上食管癌診斷、治療以及病情評估具有一定指導意義。