血管內(nèi)皮生長因子、Toll樣受體2與急性缺血性腦卒中頸動脈內(nèi)膜中層增厚的相關性分析

劉 琴

(四川省人民醫(yī)院廣漢醫(yī)院/廣漢市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，四川 德陽 618300)

缺血性腦卒中是由于腦部血液供應障礙導致局限性腦組織缺血性壞死或軟化，隨著醫(yī)療水平提高，其病死率雖有所下降，但致殘率仍較高、預后較差[1，2]。頸動脈粥樣硬化是是缺血性腦卒中發(fā)生進展的重要危險因素之一，目前臨床上主要通過超聲測量頸動脈內(nèi)膜中層厚度(carotid intima-media thickness，IMT)作為反應動脈硬化的窗口[3，4]。新生血管在缺血性腦損傷修復過程中起到至關重要的作用，卒中后側支循環(huán)形成能夠為腦缺血缺氧組織提供除腦動脈以外的含氧途徑及有效的血液[5]。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)與血管新生息息相關，有報道稱當顱腦缺血缺氧時，VEGF水平升高促進側支循環(huán)建立以改善缺血狀態(tài)[6]。另外，炎癥被公認與缺血性腦卒中發(fā)生、發(fā)展密切相關，而Toll樣受體2(Toll-like receptor 2，TLR2)參與機體炎癥反應、免疫應答過程，與血管新生也有關聯(lián)，有研究發(fā)現(xiàn)TLR2與缺血性腦卒中患者側支循環(huán)建立呈正相關[7]。目前，關于VEGF、TLR2在缺血性腦卒中患者中的表達較為多見，然而就兩者與患者頸動脈IMT增厚的相關性分析前所未有[8]。本研究旨在分析血清VEGF、TLR2水平與缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚的相關性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2019年1月至2021年1月我院收治的急性缺血性腦卒中患者296例。納入標準：符合急性腦梗死診斷標準[9]，且經(jīng)顱腦CT或MRI檢查證實；年齡>18歲，均為首次發(fā)病；病歷完整，可獲取研究所需相關資料；所有患者均知情同意。排除標準：影像學檢查顯示腦出血；近3月內(nèi)有顱腦外傷史；有出血傾向、血液系統(tǒng)疾病者；合并其他重要器官功能嚴重異常者；合并惡性腫瘤者。根據(jù)頸動脈IMT超聲結果分為IMT增厚組(n=205)和IMT正常組(n=91)。IMT增厚組男115例，女90例；年齡51～77歲[(63.41±8.49)歲]；梗死體積3～10 cm3[(6.46±2.13)cm3]；按腦梗死類型分為腔隙性腦梗死76例，非腔隙性腦梗死129例；按腦梗死部位分為基底節(jié)區(qū)梗死124例，非基底節(jié)區(qū)梗死49例，多發(fā)性梗死32例。IMT正常組男54例，女37例；年齡50～79歲[(64.03±8.66)歲]；梗死體積3～11 cm3[(6.87±2.36)cm3]；腔隙性腦梗死38例，非腔隙性腦梗死53例；基底節(jié)區(qū)梗死55例，非基底節(jié)區(qū)梗死22例，多發(fā)性梗死14例。兩組患者性別、年齡、梗死體積、梗死灶類型及部位等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究通過醫(yī)院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1頸動脈IMT測定 采用荷蘭Philips公司生產(chǎn)的HT-1彩色多普勒超聲診斷儀，使用線陣變頻式探頭，探頭中心頻率為7.0 MHz。受檢者取仰臥位，頭偏向檢查對側，探頭與頸部進行縱橫掃描，分別于舒張末期頸動脈頸總動脈遠端10～15 mm處、頸總動脈分叉處和頸內(nèi)動脈近端10 cm處測量IMT，取其平均值。將血管壁內(nèi)膜表面經(jīng)中層至中層與外膜相移行處的距離作為頸動脈IMT。診斷標準：IMT<1.0 mm，頸動脈內(nèi)膜無明顯異常；1.0 mm≤IMT<1.2 mm，頸動脈IMT增厚；IMT≥1.2 mm，頸動脈粥樣硬化斑塊形成。

1.2.2血清指標檢測 方法于治療前分別取兩組患者肘靜脈血3 ml，3000 r/min離心10 min后，取上層血清置于-20 ℃保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定血清VEGF、TLR2水平，試劑盒購自蘇州江萊ELISA研究所，嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.2.3資料收集 回顧性查閱患者臨床資料，主要內(nèi)容包括：性別、年齡、是否有吸煙史、高血壓病史、糖尿病病史、高脂血癥病史、高尿酸血癥病史，將各數(shù)據(jù)錄入課題組制作好的調(diào)查表，由專人統(tǒng)計分析。

1.3 觀察指標記錄兩組患者血清VEGF、TLR2水平；分析VEGF、TLR2水平與急性缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚的相關性；分析VEGF、TLR2水平診斷急性腦卒中頸動脈IMT增厚的最佳臨界值；對急性缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚進行單因素及多因素分析。

1.4 統(tǒng)計學方法應用SPSS 21.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析。計量資料以均數(shù)±標準差來表示，比較采用t檢驗；計數(shù)資料以例(%)表示，比較采用χ2檢驗；相關性分析采用Pearson相關分析；VEGF、TLR2水平診斷缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚的最佳臨界值采用受試者工作曲線(ROC)；急性缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚危險因素采用多因素Logistic回歸分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組IMT測量結果測定結果顯示，IMT增厚組IMT為(1.15±0.30)mm，IMT正常組IMT為(0.93±0.22)mm，差異有統(tǒng)計學意義(t=2.81，P<0.05)；ROC曲線顯示其曲線下面積為0.694，約登指數(shù)最大時的IMT值為1.046 mm。

2.2 兩組VEGF、TLR2水平比較IMT增厚組血清VEGF、TLR2水平低于IMT正常組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組VEGF、TLR2水平比較

2.3 血清VEGF、TLR2水平與缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚相關性分析血清VEGF、TLR2水平與缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚呈負相關(r=-0.614，r=-0.725，P<0.05)。

2.4 血清VEGF、TLR2水平診斷缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚臨界值ROC曲線分析結果顯示：VEGF臨界值為383.04 ng/ml時，約登指數(shù)最大為0.384；TLR2臨界值為4342.73 pg/ml時，約登指數(shù)最大為0.617，見表2、圖1。

表2 VEGF、TLR2水平診斷缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚臨界值的ROC曲線分析

圖1 VEGF、TLR2水平診斷缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚臨界值的ROC曲線分析

2.5 缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚的一般資料比較男性、年齡≥60歲、有吸煙史、高血壓病史、糖尿病病史、高尿酸血癥病史、血清VEGF≤383.04 ng/ml、血清TLR2≤4342.73 pg/ml缺血性腦卒中患者頸動脈IMT增厚發(fā)生率顯著較高(P<0.05)，見表3。

表3 缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚的一般資料比較 [n(%)]

2.6 缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚的影響因素分析年齡≥60歲、有吸煙史、糖尿病病史、高尿酸血癥病史、血清VEGF≤383.04 ng/ml、血清TLR2≤4342.73 pg/ml為缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚的獨立危險因素(P<0.05)，見表4。

表4 缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚的多因素分析

3 討論

隨著我國人口老齡化的加劇，缺血性腦卒中的發(fā)病率呈上升趨勢，其諸多病因中，臨床以動脈粥樣硬化最為常見[10，11]。頸動脈從正常到IMT增厚可反映出動脈硬化的發(fā)生進展過程，與缺血性腦卒中疾病控制、預后等息息相關[12]。因此探索與急性缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚相關的血清因子具有重要的臨床價值。本研究發(fā)現(xiàn)IMT增厚組患者血清VEGF、TLR2水平均明顯低于IMT正常組，并且血清VEGF、TLR2水平與缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚均呈負相關，這表明缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚患者血清VEGF、TLR2水平顯著降低，且二者水平越低，越易發(fā)生頸動脈IMT增厚。究其原因是VEGF是血管新生過程中強有力的促有絲分裂劑，具有促進血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞有絲分裂、新生血管形成、血管通透性增加的功能，可改善缺血區(qū)域血流灌注及微循環(huán)，減輕機體炎癥反應，以發(fā)揮保護血管內(nèi)皮的作用[13]。而TLR2同樣可促進新生血管形成及側支循環(huán)建立，改善機體缺血缺氧狀態(tài)，有利于血管內(nèi)皮功能正常工作，同時在一定程度上調(diào)節(jié)機體炎癥及免疫應答，減輕對血管內(nèi)皮的負擔[14]。因此，IMT增厚組患者血清VEGF、TLR2水平較低。

研究中，年齡≥60歲、有吸煙史、糖尿病病史、高尿酸血癥病史、血清VEGF≤383.04ng/ml、血清TLR2≤4342.73pg/ml為缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚的獨立危險因素，與鐘怡等[12]研究具有一定相似性。隨著年齡不斷增加，血管將發(fā)生退行性改變，加之暴露于多種危險因素之下，易使得動脈內(nèi)皮受損，脂質(zhì)沉積于血管內(nèi)膜下，從而更易引起IMT增厚，甚至斑塊形成。長期吸煙使血管不斷處于收縮狀態(tài)，易導致血管硬化、管壁彈性減弱，血管內(nèi)皮功能受損，內(nèi)膜下脂質(zhì)堆積，使血管變窄。高血糖狀態(tài)對血管內(nèi)皮細胞有一定毒性作用，且糖基化終產(chǎn)物在組織膠原及蛋白質(zhì)中的聚集可能導致血管組織功能及結構改變。尿酸可沉積于小動脈壁形成結晶損傷內(nèi)膜，也可促進血管平滑肌細胞增殖、通過氧化應激等反應損傷血管內(nèi)皮細胞，并且直接刺激單核細胞釋放炎癥因子白介素1、白介素6等促進血管粥樣硬化。除了上述常見傳統(tǒng)因素外，本研究新發(fā)現(xiàn)血清VEGF、TLR2低水平也是缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚的危險因素，分析原因可能是VEGF、TLR2在血管新生及側支循環(huán)建立、調(diào)節(jié)機體炎癥反應中均有重要作用，當兩種血清因子水平較低時，頸動脈有效血流及氧氣供給均明顯不足，血管內(nèi)皮營養(yǎng)及功能受限，同時炎癥反應失衡直接作用并損傷血管內(nèi)皮，導致血管內(nèi)皮細胞釋放舒血管因子減少、縮血管因子增加，致使其抗血栓作用下降。因此，血清VEGF、TLR2低水平也增加了患者頸動脈IMT增厚的風險。

綜上所述，急性缺血性腦卒中頸動脈IMT增厚的危險因素較多，除了常見傳統(tǒng)因素年齡、吸煙史、糖尿病病史、高尿酸血癥病史以外，血清VEGF、TLR2低水平也是其危險因素，并且患者VEGF、TLR2水平越低，越易發(fā)生頸動脈IMT增厚。