五種市售禽蛋中氯霉素類藥物殘留調(diào)查分析研究

馬曉艷，馮婷婷，張 爽

（浙江方圓檢測(cè)集團(tuán)股份有限公司，浙江杭州310018）

禽蛋主要包括雞蛋、鴨蛋、鵝蛋、鴿蛋和鵪鶉蛋等[1-2]，禽蛋是人們?nèi)粘ｏ嬍车闹匾M成部分，具有較高的營養(yǎng)價(jià)值，我國是禽蛋生產(chǎn)和消費(fèi)大國[3-5]。氯霉素類藥物屬于酰胺醇類抗生素，包括氯霉素、氟苯尼考和甲砜霉素，對(duì)革蘭氏陽性菌和陰性菌均有抑制作用[6-7]。在禽的飼養(yǎng)、疾病預(yù)防和治療過程中，未按規(guī)定使用或不遵守休藥期使用氯霉素類藥物，極易造成禽蛋中氯霉素類藥物殘留超標(biāo)[8-10]，這些殘留會(huì)直接影響消費(fèi)者的健康，由此引發(fā)的食品安全問題應(yīng)受到人們的重視。

在浙江省內(nèi)市場(chǎng)隨機(jī)采購了5種市售禽蛋370批次，采用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜方法對(duì)不同品種禽蛋中的氯霉素類藥物殘留進(jìn)行了檢測(cè)和分析，根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第250號(hào)《食品動(dòng)物中禁止使用的藥品及其他化合物清單》和GB 31650—2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》中對(duì)禽蛋中氯霉素類藥物殘留量的限量規(guī)定，總結(jié)出不同品種禽蛋中的氯霉素類藥物殘留情況，為廣大消費(fèi)者進(jìn)行禽蛋消費(fèi)提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

樣品在浙江省內(nèi)市場(chǎng)隨機(jī)采購，雞蛋231批次、鴨蛋103批次、鵪鶉蛋23批次、鵝蛋8批次、鴿蛋5批次，共計(jì)370批次。采樣地點(diǎn)包括超市、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和小食雜店等。

1.2 試驗(yàn)方法

采用GB/T 22338—2008《動(dòng)物源性食品中氯霉素類藥物殘留量測(cè)定》中的液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定，測(cè)定中采用空白試驗(yàn)、平行雙樣、加標(biāo)試驗(yàn)等進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量控制。

1.2.1 樣品處理

稱取5 g（精確至0.01）樣品于高速離心管中，加入100 μg/L氯霉素-D5內(nèi)標(biāo)100 μL和乙腈30 mL，勻漿，高速離心。將上清液移入分液漏斗中，加15 mL乙腈飽和正己烷，振蕩，靜置分層，轉(zhuǎn)移乙腈層至100 mL旋發(fā)瓶中。殘?jiān)性偌尤?0 mL乙腈，提取、萃取1次，合并乙腈層，并加入5 mL正丙醇，旋至近干，氮?dú)獯蹈桑尤? mL丙酮-正己烷（V∶V=1∶9）溶解殘?jiān)艋禾崛∫哼^LC-Si硅膠小柱，用5 mL丙酮-正己烷（V∶V=6∶4）洗脫接收，40℃水浴氮吹干，1.0 mL水定容，過0.22 μm濾膜后上機(jī)測(cè)試。

1.2.2 儀器條件

液相色譜條件：色譜柱Aglient RRHD SB-C18（2.1 mm×100 mm，1.8 μm）；柱溫40℃，進(jìn)樣量5 L，流速0.2 mL/min；流動(dòng)相A為乙腈，B為5 mmol/L乙酸銨溶液。

流動(dòng)相梯度條件見表1。

表1 流動(dòng)相梯度條件

質(zhì)譜條件：ESI源，負(fù)離子模式，離子源溫度550℃，霧化氣60 psi，輔助氣60 psi，氣簾氣35 psi，掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）。

氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考的質(zhì)譜參數(shù)見表2。

表2 氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考的質(zhì)譜參數(shù)

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確稱取氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶解后配制成質(zhì)量濃度為1.0 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，-18℃下保存。將3種標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋配制成1.0 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液；將內(nèi)標(biāo)稀釋為100 μg/L標(biāo)準(zhǔn)中間液。分別用初始流動(dòng)相配制0.5，1.0，2.0，5.0，10.0，20.0，50.0 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作液，內(nèi)標(biāo)為5 μg/L，上機(jī)檢測(cè)后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4 結(jié)果判定

氯霉素為家禽禁用藥，判定標(biāo)準(zhǔn)為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第250號(hào)《食品動(dòng)物中禁止使用的藥品及其他化合物清單》，甲砜霉素和氟苯尼考為家禽產(chǎn)蛋期禁用藥，判定標(biāo)準(zhǔn)為GB 31650—2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》，在禽蛋中均不得檢出。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線與相關(guān)系數(shù)

3種氯霉素類藥物標(biāo)準(zhǔn)溶液在質(zhì)量濃度0.5～50.0 μg/L范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

標(biāo)準(zhǔn)曲線與相關(guān)系數(shù)見表3。

表3 標(biāo)準(zhǔn)曲線與相關(guān)系數(shù)

2.2 不同禽蛋中氯霉素類藥物殘留總體情況分析

370批次禽蛋中，經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)共有9批次樣品檢出氯霉素類藥物殘留，總體檢出率為2.16%，其中雞蛋檢出率為0.43%，鴨蛋檢出率為5.83%，鵪鶉蛋檢出率為4.35%，鵝蛋和鴿蛋中均未檢出氯霉素類藥物，檢出項(xiàng)目均為氟苯尼考。氟苯尼考是新一代氯霉素類動(dòng)物專用抗生素，但繁殖毒性試驗(yàn)表明，氟苯尼考具有胚胎毒性，用藥后動(dòng)物還會(huì)出現(xiàn)厭食、腹瀉等不良反應(yīng)[11]。鴨蛋和鵪鶉蛋的氟苯尼考檢出率明顯高于其他禽蛋種類，存在較大的安全隱患。

不同禽蛋中氯霉素類藥物殘留情況分析見表4。

表4 不同禽蛋中氯霉素類藥物殘留情況分析

2.3 不同禽蛋中甲砜霉素的檢測(cè)情況分析

甲砜霉素為氯霉素類衍生物，抗菌譜和抗菌作用與氯霉素相仿，會(huì)抑制紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板生成，還具有較強(qiáng)的免疫抑制作用[12]。對(duì)采購的370批次禽蛋的甲砜霉素進(jìn)行了檢測(cè)分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)370批次禽蛋中均未檢出甲砜霉素，說明禽蛋中甲砜霉素藥物殘留較安全。

不同禽蛋中甲砜霉素藥物殘留情況分析見表5。

表5 不同禽蛋中甲砜霉素藥物殘留情況分析

2.4 鵪鶉蛋中氯霉素類藥物殘留情況分析

23批次鵪鶉蛋中，共檢出1批次氯霉素類藥物殘留超標(biāo)，超標(biāo)項(xiàng)目為氟苯尼考，檢出率為4.35%。根據(jù)GB 31650—2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》（2020年4月1日實(shí)施）標(biāo)準(zhǔn)，家禽的定義為包括雞、火雞、鴨、鵝、鴿和鵪鶉等在內(nèi)的家養(yǎng)禽，與之前農(nóng)業(yè)部235號(hào)公告中家禽定義比較，增加了鵪鶉。因此，2020年4月1日后上市的鵪鶉蛋可依據(jù)GB 31650—2019和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第250號(hào)進(jìn)行氯霉素類藥物殘留合格性判定。

鵪鶉蛋中氯霉素類藥物殘留情況分析見表6。

表6 鵪鶉蛋中氯霉素類藥物殘留情況分析

3 結(jié)論與討論

（1）結(jié)論。此次試驗(yàn)樣本來源為浙江省內(nèi)各市場(chǎng)隨機(jī)采購的370批次禽蛋，試驗(yàn)方法采用GB/T 22338—2008《動(dòng)物源性食品中氯霉素類藥物殘留量測(cè)定》中液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測(cè)定方法，標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)分別為氯霉素R2=0.998 82，氟苯尼考R2=0.999 77，甲砜霉素R2=0.999 83，測(cè)定中采用空白試驗(yàn)、平行雙樣、加標(biāo)試驗(yàn)等進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量控制，試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可信。在全部370批次禽蛋中，均未檢出氯霉素和甲砜霉素，說明氯霉素和甲砜霉素在家禽飼養(yǎng)期間控制使用較好。雞蛋、鴨蛋和鵪鶉蛋中均有氟苯尼考藥物殘留檢出，檢出率分別為0.43%，5.83%和4.35%，說明禽蛋中氟苯尼考藥物殘留檢出率較高，尤其是鴨蛋和鵪鶉蛋，需要重點(diǎn)關(guān)注。

（2）討論。鴨蛋中氟苯尼考檢出率較高，這可能與我國蛋鴨飼養(yǎng)方式有關(guān)，大多數(shù)蛋鴨養(yǎng)殖戶沿用鴨舍結(jié)合公共水域進(jìn)行放牧散養(yǎng)，在天然水源中較容易接觸病毒細(xì)菌污染源，從而導(dǎo)致蛋鴨用藥過量[13-14]。鵪鶉蛋中氟苯尼考檢出率較高，可能是因?yàn)橹叭鄙蠃g鶉蛋的氯霉素類藥物殘留判定標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)養(yǎng)殖戶對(duì)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和法律法規(guī)不熟。通過改進(jìn)蛋鴨的飼養(yǎng)模式，加強(qiáng)對(duì)養(yǎng)殖戶標(biāo)準(zhǔn)及法律法規(guī)的宣傳，降低這兩類禽蛋中的氟苯尼考藥物殘留檢出率，保證消費(fèi)者禽蛋消費(fèi)的食品安全。