Ⅰ型子宮內膜癌中L1-CAM的表達與臨床病理特征及預后的關系*

張 媛，張 競，劉 靜，劉夢君

(蚌埠醫學院第一附屬醫院腫瘤婦科，安徽 蚌埠 233004)

子宮內膜癌(endometrial carcinoma，EC)是女性生殖系統常見的惡性腫瘤[1]，在我國發病率僅次于宮頸癌。2019年國家癌癥中心統計，我國子宮內膜癌發病率為10.28/10萬，死亡率為1.9/10萬。根據EC的病因及臨床特征，將其分為兩種類型，Ⅰ型EC為雌激素依賴型，占3/4，預后較好；Ⅱ型EC為非雌激素依賴型，占1/4，預后較差。盡管近年來在EC治療方面取得了新進展，但EC的發病率和死亡率仍在增加[2]，即使早期EC患者也面臨著治療后腫瘤轉移或復發的風險，一旦出現轉移或復發，患者的總生存期將少于16周[3]，這也是EC患者死亡的主要原因[4]。因此，尋找有效的反映預后的檢測指標成為臨床上亟待解決的重要問題之一。

L1-細胞黏附分子(L1-cell adhesion molecule，L1-CAM)是細胞黏附分子免疫球蛋白超家族中一員，最初在神經系統中發現，在神經系統發育、神經元遷移、雪旺細胞突起生長，以及軸突束和髓鞘形成中起關鍵作用。研究表明，L1-CAM與多種腫瘤的發生發展相關，并參與促進腫瘤的增殖、遷移、侵襲和轉移[5]。本研究通過檢測EC中L1-CAM的表達情況，探討L1-CAM表達與Ⅰ 型EC臨床病理特征之間的關系及L1-CAM作為評價預后生物標志物的價值。

1 對象與方法

1.1對象 選擇2011年1月-2013年4月蚌埠醫學院第一附屬醫院腫瘤婦科手術治療的90例子宮內膜癌患者，年齡36～71歲，平均年齡(56.23±11.05)歲。所有病例經病理學證實為原發性子宮內膜癌，且病理類型為子宮內膜樣腺癌，即Ⅰ型子宮內膜癌。患者術前未接受過放化療及激素類藥物治療，無其他惡性腫瘤及嚴重合并疾病，能耐受手術。另選擇90例因子宮肌瘤行全子宮切除術患者，術后病理證實為正常子宮內膜組織作為對照組，年齡40～72歲，平均年齡(55.71±11.8)歲。本研究獲本院醫學倫理委員會批準。

1.2方法

1.2.1主要試劑 鼠抗人L1-CAM抗體購自Abcam公司，DAB顯色試劑盒及免疫組化試劑盒購自北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.2.2免疫組織化學染色方法 采用4 %的福爾馬林將標本固定，常規石蠟包埋處理，連續切片厚度為4 μm，置于烤箱中烤干。參照S-P試劑盒檢測各石蠟切片中L1-CAM的表達情況，具體步驟嚴格按照試劑盒說明書操作。一抗均按照1∶100比例稀釋，磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為陰性對照。

1.2.3結果判定 所有切片免疫組化結果由兩名病理科專業醫師診斷判定，盲法讀片觀察結果。L1-CAM在細胞質和(或)細胞膜中出現棕黃色顆粒判定為陽性，染色定位于腫瘤細胞邊緣，中心以及彌漫分布，根據細胞陽性比率和染色強度進行評定和分析，陽性比率評分0分(0 %)、1分(0～10 %)、2分(10 %～50 %)、3分(>50 %)，染色強度記分：0分(不著色)、1分(著色淡)、2分(著色中)、3分(著色深)。每張切片的陽性比率評分×染色程度評分結果為最后得分。0～1分為陰性，≥2分為陽性。

1.3隨訪 通過門診、電話方式對90例EC患者進行術后為期5年的隨訪，隨訪截止時間為2019年4月30日，記錄5年總生存期。總生存期(overall survival，OS)指自手術日到患者死亡日期或隨訪截止日期。

2 結果

2.1L1-CAM表達水平的比較 EC組織中L1-CAM的陽性表達率為48.9 %(44/90)，明顯高于正常子宮內膜組織中的13.3 %(12/90)，差異有統計學意義(χ2=26.54，P<0.05)。見表1、圖1。

表1 L1-CAM在子宮內膜癌和正常子宮內膜組織中的表達水平

圖1 子宮內膜癌組織及正常子宮內膜組織中L1-CAM的表達情況(SP法，×400)

2.2子宮內膜癌組織中L1-CAM陽性表達與患者臨床特征關系 EC組織中L1-CAM陽性表達與患者年齡、絕經情況、腫瘤病灶大小、FIGO分期、術后輔助治療無關(P>0.05)，而與細胞分化、肌層浸潤深度、淋巴結轉移有關(P<0.05)。見表2。

表2 L1-CAM陽性表達率與子宮內膜癌臨床病理參數的關系

2.3影響子宮內膜癌患者存活率的單因素分析 對90例EC患者進行為期5年的隨訪，其中存活67例，死亡23例，5年患者總存活率為74.44 %。EC患者存活率與患者年齡、絕經情況、FIGO分期、腫瘤病灶大小、術后輔助治療之間無明顯相關性(P>0.05)。低分化、肌層浸潤深度≥1/2、有淋巴結轉移及L1-CAM陽性表達者存活率顯著低于高中分化、肌層浸潤深度<1/2、無淋巴結轉移及L1-CAM陰性表達者，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 影響子宮內膜癌患者存活率的單因素分析

2.4子宮內膜癌患者預后影響因素的多因素分析 多因素Cox比例風險回歸分析結果顯示，細胞分化、肌層浸潤深度、L1-CAM表達均是影響EC患者預后的危險因素(P<0.05)。見表4。

表4 影響子宮內膜癌患者存活率的Cox多因素分析(n=90)

3 討論

EC是原發于子宮內膜上皮的惡性腫瘤，近年來發病率逐年上升并呈年輕化趨勢[6]。雖然早期EC尤其是Ⅰ型子宮內膜癌預后良好，但中晚期、分化差的EC患者預后仍較差。因此有必要尋找一種新的臨床判斷預后指標，為EC患者制定更適宜的個體化術后治療方案，從而降低EC患者的復發風險，有效提高患者的存活率。

L1-CAM是一種促進細胞增殖、遷移、侵襲和轉移相關的神經細胞黏附分子，其表達與結直腸、胃、腎和乳腺等多種惡性腫瘤進展相關[7]。研究表明L1-CAM表達與Ⅰ 期EC的無進展生存期和總存活率有關。L1-CAM在復發性EC中表達水平較高，L1-CAM表達與低PFS相關，且在無病存活率較低的腫瘤組織中表達較強。研究證實，L1-CAM在腫瘤中的表達與低分化有關，L1-CAM陽性患者更有可能屬于較高的復發風險組[8-10]。

一些研究表明在EC中L1-CAM陽性表達與腫瘤侵襲、更高的復發風險、總存活率下降密切相關[11-15]。Zeimet等[15]通過多中心隊列研究表明，對于Ⅰ型子宮內膜癌FIGO分期為Ⅰ期患者，L1-CAM是最強的預測因子。本研究結果表明，90例EC患者中L1-CAM表達水平顯著高于正常子宮內膜組織，提示L1-CAM表達水平升高，可能與EC的發生發展相關。進一步探討L1-CAM表達與EC惡性程度的相關性，結果證實L1-CAM表達水平與EC患者細胞分化、肌層浸潤深度、淋巴結轉移有關(P<0.05)，而與EC患者年齡、絕經情況、腫瘤大小、FIGO分期及術后輔助治療無關(P>0.05)。低分化、浸潤深度≥1/2肌層、有淋巴結轉移的EC患者中L1-CAM陽性表達率均高于高中分化、淺肌層浸潤、無淋巴結轉移的EC患者(P<0.05)，表明L1-CAM陽性表達與EC惡性程度呈正相關。本研究通過對EC患者術后5年存活率統計，結果顯示L1-CAM陽性表達者總存活率低于L1-CAM陰性表達者，與該領域相關研究報道結論一致，表明L1-CAM表達水平與EC患者預后密切相關，其高表達可能提示預后不良。單因素分析結果顯示，低分化、深肌層浸潤、淋巴結轉移及L1-CAM陽性表達者存活率低于高中分化、淺肌層浸潤、無淋巴結轉移及L1-CAM陰性表達者。多因素Cox回歸分析表明，L1-CAM陽性表達、低分化、深肌層浸潤是EC患者影響預后的獨立危險因素，表明L1-CAM能為判斷EC患者預后提供一定依據。

綜上所述，L1-CAM陽性表達與EC惡性程度密切相關，通過檢測EC中L1-CAM表達水平，為患者病情進展情況、治療選擇和預后判斷提供一定理論依據。