13C-嘧噻西啶呼氣試驗在病毒性肝炎肝硬化肝臟儲備功能的評估價值*

江振宇，蘇琪皓，黨 彤，孟憲梅

(包頭醫學院第二附屬醫院內蒙古消化病研究所，內蒙古 包頭 014030)

肝臟儲備功能在肝硬化治療中作為重要的評估指標，在臨床診治中起著至關重要的作用。臨床上對患者的肝臟儲備功能及預后使用CTP及MELD評分系統進行評估。然而，臨床指南認為[1-2]，CTP和MELD兩種評價系統受到各種不同的主、客觀因素影響，有可能在同一分級的不同病因肝硬化患者存在不同的差異，具有一定的不精確性。

外源性物質代謝酶系的細胞色素酶P450會受到各種不同因素的影響，例如，病毒性肝炎肝硬化能夠一定程度地降低其促炎細胞因子活性[3]。肝細胞中線粒體的檢測為進一步了解肝臟儲備功能提供了最有潛力的信息，從而能夠更好地評估肝臟的整體功能。13C-嘧噻西啶的代謝過程主要是依托細胞色素酶P450完成地，因此，13C-嘧噻西啶呼氣試驗(13C-Methacetin breath test，13C-MBT)作為肝臟線粒體動態功能的一種無創檢測方式，或能夠使我們很好地了解細胞色素酶P450的活性[4-5]。因此，本研究通過回顧既往病例情況，分析在病毒性肝炎肝硬化患者中13C-MBT與CTP評分的一致性，并對不同種類病毒性肝硬化13C-MBT進行比較，探索其在病毒性肝炎肝硬化肝臟儲備功能檢測的臨床應用可能。

1 對象與方法

1.1臨床資料 本研究對象選取2017年6月1日-2019年12月31日于我院消化科住院治療的病毒性肝炎肝硬化患者85例，男性53例，女性32例，年齡42～78歲，平均年齡為(61.6±7.2)歲(表1)。按照病因分類，乙型肝炎肝硬化患者68例，丙型肝炎肝硬化患者17例。對照組的選取為同時間段在我院進行健康查體人員10名，其中男性6例，女性4例，年齡26～67歲，平均年齡為(43.4±13.8)歲。納入標準：確診的乙、丙型肝炎肝硬化患者。排除標準：(1)慢性阻塞性肺炎、原發性肝癌、轉移性肝癌；(2)自身免疫性肝病；(3)肝豆狀核變性；(4)藥物性肝病；(5)肝性腦病；(6)幽門螺旋桿菌陰性。本次實驗研究通過我院醫學倫理委員會同意，研究對象簽署知情同意書。

表1 病毒性肝硬化患者人口學數據及特征

1.2實驗設備及材料 設備：德國瓦格納公司IRIS呼吸監測機；日本光電工業株式會社DDG-3300K 分析儀。

1.313C-嘧噻西啶呼氣試驗 入組患者于試驗前1 d 20：00后禁食、水。檢測在空腹安靜狀態下進行。(1)打開氣帽，口含氣嘴，呼中段氣，吹滿氣袋，旋緊汽帽，標記0 min作為空白對照；(2)將13C-嘧噻西啶50 mg充分溶于50 ℃ 100 mL綠茶中，患者1 min內飲盡，而后計時；(3)在第10、20、30、40、50、60、80、100、120 min分別按步驟1呼出氣體，并按時間標記集氣袋；(4)檢測孔與上述10個氣袋按順序進行連接，選擇肝功能檢測菜單選項，底物為13C-嘧噻西啶，記錄入組患者的年齡、身高及體重，進行自動檢測；(5)得出各時間段13CO2代謝速率(metabolisation velocity，MV)、累積豐度(cumulated dose，CUM)等指標。

2 結果

2.1病毒性肝炎肝硬化患者CTP分級與13C-MBT結果比較 Child A級、Child B級及Child C級各組顯效時間、MVmax40、CUM40、CUM120及肝儲備功能如表2所示，對肝儲備功能進行描述性分析可知，Child A組(M=0.40)>Child B組(M=0.22)>Child C組(M=0.11)，三組之間差異明顯，并隨分級嚴重程度，肝儲備功能逐漸減弱。

表2 肝炎肝硬化CTP分級與13C-MBT 參數比較

2.2病毒性肝炎肝硬化患者治療前與健康受試者13C-MBT結果比較 各組MVmax40、CUM40、CUM120、顯效時間如表3所示。根據所得數據兩兩比較結果可知，健康對照組(對照組)與乙型肝炎肝硬化組(乙肝組)(P<0.01)和丙型肝炎肝硬化組(丙肝組)(P<0.01)均存在顯著差異，健康對照組肝儲備功能大于乙型肝炎肝硬化組(M=24.27)和丙型肝炎肝硬化組(M=24.08)；乙型肝炎肝硬化組和丙型肝炎肝硬化組(P<0.01)兩者之間也存在顯著差異，丙型肝炎肝硬化組高于乙型肝炎肝硬化組(M=-0.16)檢測結果。對MVmax40, CUM40, CUM120分別進行兩兩對比分析，結果如表4所示，可以看出，健康對照組、乙型和丙型肝炎肝硬化組(P<0.01)均存在顯著性差異，且健康對照組大于乙型、丙型肝炎肝硬化組，乙型肝炎肝硬化組低于丙型肝炎肝硬化組，驗證了上文檢驗結果。

表3 健康對照組、乙型肝炎肝硬化組、丙型肝炎肝硬化組13C-MBT 結果統計

表4 健康對照組、乙型肝炎肝硬化組、丙型肝炎肝硬化組13C-MBT 結果比較

3 討論

在我國，對于肝臟功能的評估，主要是采用Child-Pugh(CTP)評分[2]，此評分系統主要取決于肝功能，如轉氨酶、血清白蛋白、膽紅素等相關指標，反映患者是否有肝臟的損傷，但在肝臟的總體儲備功能方面不能體現。呼氣試驗檢測肝臟儲備功能是通過測量代謝和清除某些肝臟降解的外源性物質的能力，能夠定量檢測肝臟儲備功能，同時也可以動態檢測功能性肝臟質量[6]。近年來，以呼氣試驗為基礎的肝臟儲備功能的檢測應用越來越廣泛[7-8]。本次試驗所選用的13C-嘧噻西啶是幾乎完全通過依賴于細胞色素P450的肝微粒體酶系統進行代謝的物質，其在O-脫烷基化后，轉化為乙酰胺磷和13CO2。在底物不變的情況下，13CO2的量與線粒體氧化活性正相關，從而進一步反映出肝細胞代謝能力的強弱與其完整性[9-10]。

本次研究顯示，在病毒性肝炎肝硬化患者中，13C-嘧噻西啶與Child-Pugh(CTP)評分呈明顯的相關性，與既往研究相似[11-12]。因此，13C-MBT可應用于病毒性肝硬化患者日常診療過程中作為評估肝功能的一個手段。既往研究顯示，在肝臟移植期間，13C-嘧噻西啶的代謝幾乎為零，證實了其在肝評估中的高度特異性[13]。同時，本次研究對比了乙、丙型病毒性肝炎肝硬化患者與健康對照組之間13C-嘧噻西啶檢測結果的差異。在健康的受試者中，各項檢測結果均維持在一個高水平，可以此作為100%肝細胞功能的陽性對照。乙、丙型病毒性肝炎肝硬化病患者與健康對照組相比，肝儲備功能均出現了明顯的下降，其中，乙型較丙型肝炎肝硬化組下降更為顯著，其原因可能與不同的病毒特性有關，值得進一步探究。既往針對不同性別13C-嘧噻西啶代謝能力差異呈現兩極化。有研究顯示，女性的肝線粒體代謝高于男性，這可能是由于性激素對女性肝線粒體功能產生影響[14]。然而，另有研究顯示，根據性別調整呼氣試驗的結果時，男性和女性呼氣試驗動力學參數無明顯差異[15]。由于本次研究樣本量有限，針對于不同性別病毒性肝炎肝硬化患者13C-嘧噻西啶代謝差異未做明確區別，未來可針對不同性別的患者進行研究，為臨床診治帶來更加詳盡的臨床數據。

綜上所述，13C-嘧噻西啶呼氣試驗對病毒性肝炎肝硬化患者的病情分級及肝儲備功能的評估具有重要的臨床價值和意義，同時，能夠對不同類型的病毒性肝炎肝硬化的肝臟儲備功能進行區別，為臨床診治帶來一定的指導意義。