血清T淋巴細胞亞群檢測在肝硬化合并真菌性血流感染中的診斷價值

郭武輝，張 華

(1.榆林市第二醫院醫學檢驗科，陜西 榆林 719000；2.西安市兒童醫院兒童重癥監護科，陜西 西安 710002)

每年死于乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)感染引發的肝衰竭、肝硬化后肝癌病例數可達80萬人，位居各類致死性疾病的第15位，提示HBV感染已成為全球性的公共衛生問題[1-3]。臨床實踐發現，個體感染HBV后，病毒會對機體造成持續而慢性的損傷，晚期患者可出現肝功能失代償、肝硬化或肝細胞癌等多種并發癥，因而臨床上建議及早對HBV感染患者開展干預[4-5]。血流感染是感染性疾病中的嚴重表現之一，此類患者血液中存在大量HBV，會產生毒素和代謝產物，引起嚴重毒血癥，常常會危及患者生命[6]。血流感染可區分為細菌性和真菌性兩大類，近些年隨著中心靜脈導管、胃腸外導管給藥以及內鏡技術的不斷發展，加之抗生素的濫用，局部真菌感染發生率明顯升高，相應地影響了真菌性血流感染的發生率。有報道[7-8]顯示，真菌性血流感染的病死率已達到35%左右。肝硬化患者長期處于免疫功能不全狀態，發生真菌感染的概率較常人更高。T淋巴細胞亞群測定是檢測機體細胞免疫功能的重要指標，對分析某些疾病發病機制、輔助診斷、觀察療效及監測預后有重要意義。因此，本研究探究血清T淋巴細胞亞群(CD4+、CD3+及CD4+/CD8+)檢測對肝硬化合并真菌性血流感染的診斷價值，以期為改善此類患者預后提供臨床參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年1月至2021年5月于我院接受治療的肝硬化合并真菌性血液感染患兒60例為研究組；選擇同期于我院接受治療的肝硬化患兒50例為病例對照組；選擇健康兒童50例為對照組。三組兒童性別、年齡、平均動脈壓(MAP)比較，差異無統計學意義(均P>0.05)，見表1。病例納入標準：①均符合《慢性乙型肝炎防治指南》[9]中關于乙肝肝硬化診斷標準且出現相應臨床癥狀；②意識清晰，能夠配合開展研究；③一般資料齊全。排除標準：①合并精神疾患；②近1個月內服用抗菌藥物；③合并惡性腫瘤；④合并其他病毒感染；⑤合并自身免疫系統疾患；⑥酒精性肝硬化；⑦合并其他肝臟疾病。本研究經醫院倫理學會批準實施。患者及其家屬對本次調研過程、方法、原理清楚并簽署知情同意書。

表1 三組兒童一般資料比較

1.2 研究方法 采集三組兒童清晨空腹肘靜脈血樣3 ml，應用乙二胺四乙酸二鉀抗凝，然后采用流式細胞儀(貝克曼CYTOMICS FC 500)檢測血樣CD4+、CD3+淋巴細胞及CD4+/CD8+；采用Sysmex XN-9000檢測白細胞(WBC)及中性粒細胞(NE)水平。同時，采集肝素鈉抗凝血4 ml，采用電化學發光法檢測血清降鈣素原(PCT)水平。

1.3 觀察指標 比較三組兒童T淋巴細胞亞群以及炎癥指標(PCT、WBC、NE)水平，分析T淋巴細胞亞群對肝硬化合并真菌性血流感染的診斷價值。

2 結 果

2.1 三組兒童T淋巴細胞亞群比較 見表2。研究組和病例對照組患兒CD4+、CD3+及CD4+/CD8+水平均顯著低于對照組，且研究組患兒CD4+、CD3+及CD4+/CD8+明顯低于病例對照組(均P<0.05)。

表2 三組兒童T淋巴細胞亞群比較

2.2 三組兒童PCT、WBC、NE水平比較 見表3。研究組和病例對照組患兒PCT、WBC以及NE水平均明顯高于對照組，且研究組患兒上述指標水平明顯高于病例對照組(均P<0.05)。

表3 三組兒童PCT、WBC、NE水平比較

2.3 T淋巴細胞亞群對肝硬化合并真菌性血流感染的診斷價值分析 見表4。ROC曲線分析顯示，CD4+、CD3+、CD4+/CD8+單項、兩項聯合以及三項聯合均對肝硬化合并真菌性血流感染具有較高的診斷價值，尤其是三項聯合最高，曲線下面積(AUC)為0.951。

表4 T淋巴細胞亞群對肝硬化合并真菌性血流感染的診斷價值

3 討 論

肝硬化是慢性肝病進展遷延的中間階段，其典型病變特點為肝細胞結節性再生、結締組織增生、纖維間隔形成等，其病因主要包括病毒性肝炎、酒精性肝炎或自身免疫性肝炎等[10-11]。肝硬化患者早期由于肝臟代償能力較強，臨床癥狀并不明顯，至疾病晚期可因肝臟失代償而出現諸如肝功能損傷、門靜脈高壓等表現[12-13]，同時多數患者會伴有多系統癥狀，常出現肝性腦病、上消化道出血、自發性腹膜炎[14]等并發癥，如不加以及時干預，可以發展為肝衰竭，威脅患者生命。近年受胃腸外導管給藥、局部真菌感染等因素影響，真菌性血流感染的患病率及病死率呈現明顯升高趨勢。已有研究[15-16]指出，真菌性血流感染患者早期病情較為隱匿，不易被患者察覺，但發展至晚期病死率可高達30%，建議及早準確地實施診斷。

本研究通過設立對照分組的方式，就CD4+、CD3+及CD4+/CD8+等T淋巴細胞亞群在肝硬化合并真菌性血流感染中的診斷價值進行了分析，結果顯示研究組和病例對照組患兒CD4+、CD3+以及CD4+/CD8+水平均顯著低于對照組，且研究組患兒CD4+、CD3+及CD4+/CD8+明顯低于病例對照組，提示隨著病情的改變，患兒T淋巴細胞亞群出現了明顯變化。何小慶等[17]通過對166例細菌或真菌性血流感染患者開展分析研究發現，受試者中真菌組CD4+T淋巴細胞降低較細菌組更為顯著，認為CD4+T淋巴細胞水平能夠較為直觀地反映個體免疫功能，其水平的降低往往代表個體免疫功能的下降，本研究與其基本一致。

肝硬化的常見病因主要為病毒感染，而病毒感染導致慢性病變的主要原因即為機體免疫調節降低，尤其是細胞免疫功能下降，導致機體無法徹底清除感染病毒。在細胞免疫進程中重要的免疫調控因子即為T淋巴細胞，臨床上也常將T淋巴細胞亞群作為反映機體免疫調節功能的金標準。有報道指出，在HBV感染機體的初期階段，機體免疫系統處于被激活狀態，其T淋巴細胞亞群水平會驟增，使機體產生免疫防御，而當HBV感染進入慢性感染期后，個體的T淋巴細胞亞群水平會明顯降低，CD4+、CD3+T淋巴細胞數量會大量減少，從而引起機體免疫力降低，如果CD4+和CD8+細胞亞群水平同時降低，則預示著免疫功能明顯減弱，肝硬化甚至肝衰竭將逐步出現[18-19]。本研究中進一步通過對比三組兒童的炎癥指標驗證了上述理論的真實性，相比于對照組，病例對照組PCT、WBC等指標已處于異常高表達狀態，而真菌感染進一步加重了機體的炎癥反應，導致大量炎性因子被釋放，對肝臟形成了二次打擊[20]。最后，本研究通過繪制ROC曲線圖發現，CD4+、CD3+及CD4+/CD8+對肝硬化合并真菌性血流感染具有較好的診斷價值，尤其是三項聯合檢測的診斷價值更大，可以考慮將上述三項指標聯合檢測作為肝硬化合并真菌性血流感染的診斷參考。

綜上所述，CD4+、CD3+及CD4+/CD8+聯合檢測對肝硬化合并真菌性血流感染具有較好的診斷價值，可以考慮將其作為該癥的早期診斷指標。