高血壓腎病早期血清Cys C、β2-MG和尿NAG、RBP水平檢測(cè)及臨床意義

張志斌，溫慶輝，張錫波

東莞市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 東莞523000

高血壓為危害人類健康的主要心血管疾病之一，病情進(jìn)展緩慢，可誘導(dǎo)多器官功能損傷，其中體循環(huán)動(dòng)脈壓持續(xù)升高為主要表現(xiàn)，常誘導(dǎo)腎臟組織受損，進(jìn)一步加重血壓升高，由此反復(fù)造成惡性循環(huán)[1]。研究表明，高血壓腎損傷早期病情隱匿，血尿常規(guī)基本正常，隨著病情加重，腎功能損傷逐漸加重，最終導(dǎo)致腎功能衰竭，增加臨床治療難度且效果差，遠(yuǎn)期生存率低，因此早診斷早治療是逆轉(zhuǎn)患者遠(yuǎn)期生存率的當(dāng)務(wù)之急[2]。傳統(tǒng)的血肌酐、尿素氮、腎小球率過濾對(duì)早期腎功能損害的敏感性并不理想，因此找到其他對(duì)高血壓早期腎損害的敏感性指標(biāo)迫在眉睫[3]。研究指出，誘導(dǎo)高血壓腎損傷的關(guān)鍵因素為腎小管的作用機(jī)制紊亂，尿β2-微球蛋白(β2-MG)和尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(尿NAG)、尿視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)均為腎臟損傷的標(biāo)志物，將其用于判定高血壓患者的腎損傷敏感性較高[4]。近年來有研究指出，血清胱抑素C(CysC)亦是反映腎小球?yàn)V過功能的敏感性指標(biāo)，其水平在診斷及判定疾病病情嚴(yán)重程度中發(fā)揮不可替代的作用[5]。鑒于此，本研究通過檢測(cè)早期高血壓腎病患者血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 水平，分析其在高血壓腎病中的診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019 年11 月至2020 年10月東莞市人民醫(yī)院收治的70 例高血壓患者作為研究對(duì)象，其中高血壓腎病40 例(HRD 組)，單純高血壓30 例(HBP 組)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①HRD 組患者均符合世界衛(wèi)生組織/國(guó)際高血壓聯(lián)盟(WHO/ISH)指南中關(guān)于疾病診斷及分型標(biāo)準(zhǔn)[6]；②患者積極配合研究；③患者知情本研究并簽署自愿參與書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并糖尿病、泌尿系統(tǒng)疾病者；②合并惡性腫瘤疾病或風(fēng)濕病者；③精神異常，無法正常溝通交流者；④合并主要臟器功能(肝、腎、心)嚴(yán)重障礙者；⑤合并高血脂、缺血性心臟病或繼發(fā)性高血壓者；⑥合并免疫功能、凝血功能異常者。HRD 組根據(jù)慢性腎病分期分為Ⅰ～Ⅱ期23 例[GFR≥60 mL/min·(173 m2)]，Ⅲ～Ⅴ期17例[GFR＜60 mL/min·(173 m2)]。HRD組患者中男性21 例，女性19 例；年齡45～65 歲，平均(54.11±3.29)歲；病程8～12年，平均(9.32±0.67)年。HBP組患者中男性19 例，女性11 例；年齡45～64 歲，平均(53.98±3.09)歲；病程8～11 年，平均(9.41±0.63)年。選擇同期在我院體檢的健康者30例作為對(duì)照組，對(duì)照組中男性18例，女性12 例；年齡45～66 歲，平均(54.98±3.29)歲。三組受檢者的性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 檢測(cè)方法 (1)采集高血壓患者及健康體檢者3 mL 靜脈血，低溫靜置10 min，以3 000 r/min 的速度離心處理(r=3 cm)5 min，分離血清保存待測(cè)，采用AU5811 生化分析儀(生產(chǎn)廠家：武漢盛隆生物科技公司)測(cè)定血清中CysC水平，步驟按說明書進(jìn)行。(2)采集受檢者晨起中段尿約10 mL，同樣以3 000 r/min 的速度離心(r=3 cm)5 min，分離血清，取上清液，采用散射免疫比濁法(生產(chǎn)廠家：廣州星馬科技公司)測(cè)定β2-MG、尿NAG、RBP水平，實(shí)驗(yàn)步驟以說明書為準(zhǔn)。

1.3 觀察指標(biāo) (1)比較三組受檢者的CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 水平。(2)比較不同臨床分期患者的CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平。(3)比較CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 各指標(biāo)單獨(dú)與聯(lián)合檢測(cè)診斷早期高血壓腎病的靈敏度、特異性。(4)分析高血壓腎病患者血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS21.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，兩兩比較采用t檢驗(yàn)，多組比較采用方差分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，采用Pearson法對(duì)各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組受檢者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 水平比較 HRD 組患者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 水平明顯高于HBP 組和對(duì)照組，HBP 組患者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 水平明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 三組受檢者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平比較()

表1 三組受檢者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平比較()

注：與HBP組比較，aP＜0.05；與HRD組比較，bP＜0.05。

2.2 不同臨床分期患者的CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平比較 Ⅲ～Ⅴ期患者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 不同臨床分期患者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平比較()

表2 不同臨床分期患者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平比較()

2.3 各項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)與聯(lián)合檢測(cè)診斷早期高血壓腎病的靈敏度、特異性比較 CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 檢測(cè)的靈敏度、特異性均低于4 項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度、特異性，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

表3 各項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)與聯(lián)合檢測(cè)診斷早期高血壓腎病的靈敏度、特異性比較

2.4 高血壓腎病患者血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 水平的相關(guān)性 經(jīng)Pearson 法分析結(jié)果顯示，高血壓腎病患者血清CysC與尿NAG、RBP表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.981、0.671，P＜0.05)，而β2-MG 與尿NAG、RBP也呈正相關(guān)(r=0.617、0.751，P＜0.05)。

3 討論

高血壓是臨床多發(fā)疾病，其患病率在我國(guó)最高，伴隨病情進(jìn)展可累及多器官損傷，其中高血壓腎損傷是最常見的并發(fā)癥之一，致殘率、死亡率高[7]。數(shù)據(jù)顯示，持續(xù)高血壓可引起腎小球高灌注，進(jìn)而誘導(dǎo)腎小球動(dòng)脈硬化，出現(xiàn)腎損傷，進(jìn)一步降低患者生活質(zhì)量，因此高血壓引起的腎病已成為除糖尿病外造成終末期腎病的第二大原因[8]。因腎臟的代償功能較強(qiáng)，加之多數(shù)患者在無明顯特異性表現(xiàn)，腎功能檢查也無異常，但其實(shí)際已經(jīng)受損，可見其早期病情具有一定隱匿性、可逆性[9]。尿素氮、肌酐、尿微量蛋白是評(píng)價(jià)腎功能是否受損的常用指標(biāo)，但上述指標(biāo)受多種因素影響(如：食物、感染)其敏感性、特異性，當(dāng)腎功能受損＞50%則表現(xiàn)出異常[10]。故需尋找一種簡(jiǎn)易、敏感且可顯示早期腎損傷的指標(biāo)來提高高血壓腎損傷的早期診斷。

CysC是反映腎小球?yàn)V過功能的內(nèi)源性標(biāo)志物，近年來在臨床運(yùn)用較廣泛。資料表明，CysC為低分子量蛋白質(zhì)，主要由120個(gè)氨基酸殘基組成，是蛋白質(zhì)超大家族的主要成員之一，其在各機(jī)體組織中的所有核細(xì)胞紅均有表達(dá)，且在機(jī)體組織中的產(chǎn)生率相對(duì)比較恒定，可在循環(huán)中經(jīng)腎小球自由過濾，而腎臟組織則是清除循環(huán)中CysC 的唯一器官，被認(rèn)為是決定腎小球?yàn)V過率的典型內(nèi)源性標(biāo)志物[11-12]。NAG 屬于高分子糖蛋白酸性水解酶，集中來源于腎小管上皮細(xì)胞之中，當(dāng)腎小管遭受損傷時(shí)，且水平表達(dá)異常升高，故通過監(jiān)測(cè)其水平變化可反映腎小管受損嚴(yán)重程度，但需要注意的是NAG 在過濾中不能通過腎小球?yàn)V過膜[13]。β2-MG 為低分子血清蛋白，其分子質(zhì)量為11.8 kD，雖然其在腎小球?yàn)V過膜中較易通過，但幾乎全被曲小管細(xì)胞重新吸收和講解，故其在尿液中的含量極低。資料表明，β2-MG在早期腎小管間質(zhì)性疾病中的敏感性較高，當(dāng)腎小球和腎小管的早期屏障功能受損或出現(xiàn)障礙時(shí)，其表達(dá)水平會(huì)在短時(shí)間內(nèi)異常升高[14]。RBP 為臨床常見的經(jīng)肝臟分泌蛋白，其分子量為21 kD，同時(shí)具有降低RBP腎內(nèi)分級(jí)、腎小球?yàn)V過的作用[15]。在近年來的研究中發(fā)現(xiàn)，RBP 為脂肪細(xì)胞分泌而來，屬于新的脂肪細(xì)胞因子，被認(rèn)為是與胰島素抵抗正相關(guān)的脂肪因子[16]。MENG 等[17]研究指出，RBP 在肥胖、近端腎小管上皮細(xì)胞被分解代謝，且不能被腎小球過濾，僅有1/10的RBP經(jīng)腎小球?yàn)V出后會(huì)被腎小管重吸收，在正常人群中含量極低，并且在酸性尿中十分穩(wěn)定，被認(rèn)為是反映曲小管損傷的敏感性指標(biāo)之一。

本研究重點(diǎn)分析了上述四項(xiàng)指標(biāo)在高血壓腎病中的表達(dá)水平及意義。結(jié)果表明，HRD組患者的CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平明顯高于HBP組和對(duì)照組，表明高血壓腎病患者的CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平呈異常增高狀態(tài)。本研究進(jìn)一步分析了不同臨床分期高血壓腎病患者的血清CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平，結(jié)果表明Ⅰ～Ⅱ期患者的CysC、β2-MG、尿NAG、RBP水平明顯高于Ⅲ～Ⅴ期患者，提示隨著患者病情加重，上述指標(biāo)水平逐漸升高。經(jīng)Pearson法進(jìn)行相關(guān)性分析顯示，高血壓腎病患者血清CysC 與尿NAG、RBP表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.981、0.671，P＜0.05)，而β2-MG 與尿NAG、RBP 也呈正相關(guān)(r=0.617、0.751，P＜0.05)，即濃度越高腎損傷越嚴(yán)重。LIPKOWITZ等[18]研究指出，CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 各項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)用于診斷高血壓早期腎損傷，易受膽紅素、尿pH值等因素影響，導(dǎo)致其敏感性、特異性較低。鑒于此，本次研究分析了上述四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的敏感性、特異性，結(jié)果表明4 項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的敏感度為96.77%、特異性為83.33%，均分別高于上述四項(xiàng)指標(biāo)的單獨(dú)檢測(cè)的敏感度、特異性，可見此四項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)更有利于高血壓腎損傷的臨床診斷、治療。

綜上所述，CysC、β2-MG、尿NAG、RBP 可作為高血壓腎病早期損傷的標(biāo)志物，其濃度變化與病情嚴(yán)重呈正相關(guān)，四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)更有助于提高高血壓腎病早期損傷的治療及治療。