急性心肌梗死患者miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達及臨床意義

蔣亞萍 葉麗君 喻長法

急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)指在冠狀動脈病變的基礎上，患者發生冠狀動脈血液供應急劇減少或中斷，使相應的心肌嚴重、持久的缺血壞死，可導致心律失常、休克或心力衰竭等嚴重并發癥。隨著全球人口老齡化進程的加劇，AMI的發生率及病死率呈逐年增長的趨勢，嚴重威脅著人們的生命安全，降低患者生活質量[1]。及時診斷和治療并恢復血液供應是降低AMI病死率的關鍵。微小RNA(miRNA)是由約18～25個核苷酸組成的內源性非編碼RNA，它與靶基因mRNA特異性結合，然后影響靶蛋白的表達水平，在蛋白質參與信號通路中發揮作用[2]。近年來隨著對miRNA研究的深入，有研究認為微小核糖核酸RNA-208a(miR-208a)在AMI患者血液中表達異常，對AMI的早期診斷有一定價值[3]。本研究旨在探討miR-208a、超敏肌鈣蛋白I(hs-cTnI)和單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)在AMI患者中的表達變化來指導AMI的診斷和療效觀察。

對象與方法

1.研究對象:選取2017年3月～2019年2月在臺州市第一人民醫院就診的96例經皮冠狀動脈介入(PCI)治療的AMI患者作為AMI組。納入標準：①胸痛時間≥30min；②心電圖檢查可見相鄰兩個及以上導聯ST段抬高；③經冠脈造影結果證實。排除標準：①合并嚴重感染；②自身免疫性疾病、血液系統疾病、惡性腫瘤等；③肝腎功能不全。AMI組中男性49例，女性47例，患者年齡 48～84歲，平均年齡為65.0±15.5歲。另選同期于筆者醫院體檢的健康體檢者45例設為對照組，其中男性24 例，女性21例，年齡47～82 歲，平均年齡為64.5±14.5歲。兩組研究對象性別、年齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)。

2.研究方法：測量患者靜息狀態下血壓、身高、體重，計算體重指數(BMI)。抽取空腹8h后靜脈血，用日立Labospect 008AS全自動生化儀檢測血糖、血脂；用貝克曼DXI 800全自動化學免疫分析儀測hs-cTnI；用ELISA法檢測MCP-1(上海西唐生物科技有限公司)；miR-208a檢測用7500 型實時熒光定量 PCR儀 (美國ABI公司)，RNA提取液(美國Qiagen公司)提取總miRNA，用反轉錄試劑盒(美國Qiagen公司)反轉錄成cDNA，引物及PCR擴增試劑(日本 TaKaRa 公司)，以 2-ΔΔCt法計算各組間 miR-208a 的相對表達量，反應條件為 95 ℃預變性 10min，95℃變性15s，退火60℃ 15s，40個循環。miR-208a、hs-cTnI和MCP-1的變化與可能合并的危險因素的關系按中位數分為高表達組和低表達組。

結 果

1.兩組血清miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達：AMI組患者miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達水平均顯著高于對照組(P<0.05)，詳見表1。

表1 兩組血清miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達水平比較

2.AMI組患者PCI治療前、后miR-208a、hs-cTnI、MCP-1變化：經PCI有效治療后，AMI組患者miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達水平顯著低于治療前(P<0.05)，詳見表2。

表2 AMI組患者PCI治療前、后miR-208a、hs-cTnI、MCP-1變化比較

3.miR-208a、hs-cTnI和MCP-1的變化與可能合并的危險因素的關系：miR-208a的表達水平與高血壓、高血脂有關，hs-cTnI的表達水平與糖尿病、高血壓有關，MCP-1的表達水平與糖尿病有關(P<0.05)，詳見表3。

表3 miR-208a、hs-cTnI和MCP-1的變化與可能合并的危險因素的關系

4.miR-208a、hs-cTnI和MCP-1對AMI的診斷效能評價：miR-208a、hs-cTnI和MCP-1對AMI的曲線下面積(AUC)分別為0.912、0.904和0.831，均具有較高的診斷效能(圖1)。

圖1 miR-208a、hs-cTnI和MCP-1對AMI的診斷效能

討 論

AMI是急性冠狀動脈綜合征中最嚴重疾病，主要臨床表現為持續性心前區壓榨性疼痛。急診科每年因胸痛就診的患者約占就診人數的5%～10%，漏診的可疑AMI患者比診斷為AMl入院的患者30天死亡的風險高兩倍[4]。歐美等國家是 AMI高發地區，中國近年來發生率呈現上升趨勢。有研究發現，血管阻塞后約30min心肌開始壞死，6～8h 可完全壞死，越早恢復血液供應，存活的心肌就越多[5,6]。因此，AMI的早期診斷顯得極為重要。

miR-208a在心肌細胞中特異性表達，其在心臟發生、心臟功能和病理學中起著重要作用。miR-208a位于重鏈肌球蛋白基因的內含子中，其功能為調節收縮蛋白的表達，miR-208a的表達上調，導致心律失常、加速細胞凋亡、纖維化、肥大和組織重塑[7]。TnI是心肌組織中特有的肌鈣蛋白，hs-cTnI并不是一類新的心肌生物學標志物，因其檢測下限遠低于傳統的肌鈣蛋白而得名[8]。MCP-1是由76個氨基酸殘基組成的堿性蛋白質，對單核-吞噬細胞可起到特異性的趨化激活作用，導致炎性反應的發生和發展。MCP-1可促進動脈粥樣硬化斑塊的不穩定和破裂，在AMI發生后心室重塑起著重要的作用[9]。本研究結果顯示，AMI組miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達水平顯著高于對照組；經PCI有效治療后，AMI組患者miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達水平顯著降低(P<0.05)；miR-208a的表達水平與高血壓、高血脂有關，hs-cTnI的表達水平與糖尿病、高血壓有關，MCP-1的表達水平與糖尿病有關(P<0.05)；miR-208a、hs-cTnI和MCP-1對AMI的曲線下面積(AUC)分別為0.912、0.904和0.831，均具有較高的診斷效能，與研究報道一致[10,11]。

AMI患者miR-208a在胸痛發作1h就開始明顯升高，3h達到高峰，與CK-MB和cTnI呈正相關[12]。AMI組miR-208a表達量顯著升高，與Gensini 評分顯著正相關，可作為早期診斷AMI的標志物，并有評價冠狀動脈粥樣硬化嚴重程度和進行危險分層的潛力[13]。miR-208a作為早期診斷ST段抬高心肌梗死和心肌梗死疾病監測的生物學標志物，不僅可用于AMI的診斷，還能用于梗死后的預后[14]。國外有研究報道，對于hs-cTnI 25%的急性冠狀動脈綜合征，由于其在低濃度下的高準確度，對于臨床應用具有重要的價值。AMI患者MCP-1表達顯著上調，MCP-1加強了中性粒細胞和單核-吞噬細胞的趨化、黏附和吞噬功能，加速了AMI的發生和發展[17，18]。血清 MCP-1表達水平與AMI患者PCI術后再狹窄有密切關系，監測其變化可在早期更加有效地預防AMI患者PCI術后發生再狹窄的風險[19]。

綜上所述，miR-208a、hs-cTnI和MCP-1在AMI組患者早期顯著升高，對AMI有較高的診斷效能，其動態變化對AMI的診斷有重要的臨床意義。