2種商品連翹的質(zhì)量比較

魏志華 郭婷婷 王新民

摘 要：分別采用HPLC法和UV-Vis法測定了不同產(chǎn)地連翹中有效成分（連翹苷、連翹酯苷A和總黃酮）含量及其浸出物含量。結(jié)果表明，各產(chǎn)地老翹和青翹中的浸出物、連翹苷含量和連翹酯苷A含量均符合藥典中的限量要求。青翹浸出物遠(yuǎn)高于老翹浸出物，老翹和青翹進(jìn)行無梗處理后，山西陵川無梗老翹中的浸出物含量提高較明顯，其余無梗老翹無明顯變化。山西陵川無梗老翹中，連翹苷和連翹酯苷A含量分別高達(dá)0.88%、0.69%，所有老翹和青翹樣品所含連翹苷和連翹酯苷A在去梗前后無明顯變化。老翹和青翹的總黃酮含量在去梗后均出現(xiàn)降低趨勢，而老翹總黃酮含量明顯低于青翹總黃酮含量。說明連翹有梗與無梗對連翹苷和連翹酯苷A含量的影響較小，連翹藥材在加工炮制時不需要進(jìn)行去梗操作。

關(guān)鍵詞：連翹;活性成分;HPLC;UV-Vis

中圖分類號 F311文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A文章編號 1007-7731（2021）22-0051-02

連翹為木犀科植物連翹[Forsythia suspensa （Thunb.） Vahl]的干燥果實，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有清熱解毒、消腫散結(jié)之功效。傳統(tǒng)上常常把連翹分為青翹和老翹2種商品規(guī)格，但目前市場上出現(xiàn)了有梗連翹和無梗連翹2種商品規(guī)格，兩者價格差異較大。《中華人民共和國藥典》中并未對有梗連翹和無梗連翹進(jìn)行區(qū)分，兩者質(zhì)量是否有存在差異也尚未見相關(guān)報道[1-3]。為此，本實驗通過研究有梗連翹和無梗連翹的質(zhì)量差異，為連翹生產(chǎn)及應(yīng)用提供參考。

1 儀器與試材

試驗所用主要儀器有萊伯泰科LC-600型高效液相色譜、北京普析TU-1810紫外分光度計、高速粉碎機(jī)、超聲波清洗器、烘箱及電子天平等。

試驗材料于2019年8月和10月分別采自山西陵川、河南濟(jì)源和河南欒川。8月采摘的尚未成熟的綠色連翹在鍋中蒸30min，取出曬干，加工成青翹，10月采摘的成熟果實曬干加工成老翹，每個產(chǎn)地的老翹和青翹一部分做去梗處理，一部分不去梗，備用。

連翹苷對照品（上海源葉生物科技有限公司），連翹酯苷A對照品（上海源葉生物科技有限公司），蘆丁對照品（上海源葉生物科技有限公司），甲醇（色譜純），乙腈（色譜純），65%乙醇（分析純），冰乙酸（分析純），磷酸（分析純），超純水。

2 試驗方法

2.1 樣品處理 把每個產(chǎn)地的有梗老翹、無梗老翹、有梗青翹、無梗青翹分別粉碎，過2號篩，備用。

2.2 浸出物含量測定 取樣品約4.0g，精密稱定，置250mL的錐形瓶中，精密加65%乙醇100mL，密塞，冷浸，前6h內(nèi)時時振搖，再靜置18h，用干燥濾器迅速濾過，精密量取續(xù)濾液20mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3h，置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱定重量。3次重復(fù)。

2.3 連翹苷和連翹酯苷A含量的測定 樣品溶液的制備：精密稱取各樣品粉末約2.0g，分別置于具塞錐形瓶中，加入95%甲醇30mL浸泡2h，超聲提取25min，放冷后用漏斗過濾，濾液再用0.45?m微孔濾膜過濾于標(biāo)記過的離心管中，待用[4]。

對照品溶液的制備：用十萬分之一電子天平精密稱取連翹苷和連翹酯苷A對照品2.25mg和2.16mg，分別置于10mL的容量瓶中，先用少量的無水甲醇溶解，再用超聲溶解法處理10min，放冷后用無水的甲醇定容，制成0.225mg/mL的連翹苷對照品溶液和0.216mg/mL的連翹酯苷A對照品溶液;經(jīng)0.45?m微孔濾膜過濾，待用[4]。

色譜條件：色譜柱LabTech-C18（150mm×4.6mm，5μm）;測連翹苷時流動相為乙腈-水（25∶75），檢測波長為277nm，測連翹酯苷A時流動相為乙腈-0.4%冰乙酸（15∶85），檢測波長為330nm;流速為lmL/min;柱溫為室溫[5，6]。

按上述色譜條件，各進(jìn)樣20?L，按照色譜峰峰面積計算含量。

2.4 總黃酮含量（以蘆丁計）的測定 蘆丁對照品溶液的制備：精密稱取蘆丁的標(biāo)準(zhǔn)品2.8mg，置于50mL容量瓶中，用80%甲醇溶解并定容，搖勻，所得濃度均為0.056mg·mL-1，備用。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：分別精密量取蘆丁對照品溶液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0mL置于10mL容量瓶中，定容至刻度線。在327nm波長處測其吸光度值[7]。以蘆丁濃度（mg·mL-1）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制蘆丁的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

蘆丁含量的測定：稱取各樣品粉末2g，分別置于標(biāo)記過的具塞錐形瓶中，精密加入60%乙醇30mL，密塞，在60℃超聲輔助提取50min，放冷，過濾，吸取提取液1mL，置于50mL容量瓶中，定容。在327nm波長處測其吸光度，根據(jù)回歸方程計算蘆丁濃度[7]。

3 結(jié)果與分析

中國藥典規(guī)定了連翹醇溶性浸出物含量，青翹不得小于30.0%，老翹不得少于16.0%。由表1可知，3產(chǎn)地的老翹和青翹中浸出物含量均符合藥典中的限量要求。3產(chǎn)地老翹和青翹中連翹苷含量在0.46%～0.88%，連翹酯苷A含量在0.40%～0.69%，分別大于0.15%和0.25%中國藥典的限量要求;而其總黃酮含量在19.03%～25.87%。

通過對3產(chǎn)地連翹浸出物含量比較，發(fā)現(xiàn)青翹浸出物遠(yuǎn)高于老翹浸出物，而山西陵川無梗青翹浸出物最大，達(dá)43.12%，而河南欒川有梗老翹浸出物含量最低為25.48%;3個產(chǎn)地老翹進(jìn)行無梗處理后，無梗老翹的浸出物含量有一定程度提高，3個產(chǎn)地中只有山西陵川無梗連翹中浸出物含量提高較明顯，河南濟(jì)源的無梗老翹和河南欒川的無梗老翹增幅不明顯。3個產(chǎn)地的青翹進(jìn)行去梗處理后其浸出物含量和老翹表現(xiàn)基本一致，均略有增加。

3產(chǎn)地老翹中山西陵川無梗老翹中連翹苷和連翹酯苷A含量分別達(dá)0.88%、0.69%，在所有連翹樣品中含量最高;而山西陵川無梗老翹中連翹苷和連翹酯苷A含量均為0.62%，在所有老翹中最高;河南欒川有梗老翹中連翹苷和連翹酯苷A含量分別為0.46%、0.40%，含量最低。所有老翹樣品所含連翹苷和連翹酯苷A在去梗前后無明顯變化，去梗后的老翹中連翹苷含量略有增加，青翹去梗后連翹苷和連翹酯苷A含量也無明顯變化。比較3個產(chǎn)地的老翹及青翹中2種成分含量，在老翹和青翹中均以山西陵川的含量較高;連翹苷和連翹酯苷A是連翹質(zhì)量的主要評價指標(biāo)，試驗結(jié)果與歷來認(rèn)為山西陵川連翹質(zhì)優(yōu)的觀點相符合。

本試驗中，3產(chǎn)地老翹中總黃酮含量低于青翹，河南欒川無梗老翹中總黃酮含量最低，為19.03%，而山西陵川有梗青翹總黃酮含量最高，為25.87%。3產(chǎn)地老翹和青翹總黃酮含量在去梗后均出現(xiàn)降低趨勢。

4 討論

無梗連翹是近年在中藥材市場出現(xiàn)的一種商品規(guī)格，去梗后的連翹從外觀上看更加潔凈，價格常高于有梗連翹，但通過實驗發(fā)現(xiàn)去梗后的連翹浸出物含量、連翹苷及連翹酯苷A等評價指標(biāo)變化并不明顯，對連翹藥材的質(zhì)量影響不大。另外，去梗需要耗費(fèi)大量的人工，增加人工成本，再者連翹在采收過程中由于機(jī)械外力作用，常常可以造成部分果梗脫落，無須專門做無梗處理。另外，不同產(chǎn)地的連翹質(zhì)量存在一定差異，連翹的成熟度不一樣，其主要質(zhì)量評價指標(biāo)差異較大，建議在臨床應(yīng)用時區(qū)別對待。

當(dāng)前，中國藥典中尚未規(guī)定連翹藥材中總黃酮含量測定項目。本實驗對其進(jìn)行了測定，老翹中總黃酮含量普遍低于青翹，可能與部分老翹成熟后果實開裂造成種子脫落有一定關(guān)系，也可能與黃酮類成分在連翹果實中的積累規(guī)律有關(guān)，尚需進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1]中國藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社.

[2]陳瑾，譚麗媛，張淑蓉，等.不同產(chǎn)地連翹主要成分分析及抗菌作用研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2018，29（2）：427-430.

[3]閻新佳，溫靜，項崢，等.連翹的化學(xué)成分研究[J].中草藥，2017，48（4）：644-647.

[4]郭偉良，由鵬飛，房晶，等.響應(yīng)面法優(yōu)化連翹苷超聲提取工藝[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2009，40（12）：919-923.

[5]李玉蘭，高美華.HPLC測定不同產(chǎn)地連翹中連翹苷和連翹酯苷的含量[J].中國醫(yī)學(xué)工程，2010，18（2）：46-52.

[6]齊迎春.連翹中蘆丁和連翹酯苷A的含量測定方法分析[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2014，8（11）：245-246.

[7]王潤梅，張永芳，劉麗敏，等.響應(yīng)面法優(yōu)化連翹總黃酮提取工藝研究[J].山西大同大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2017，33（02）：50-54.

（責(zé)編：張宏民）