不同滅菌工藝對茶麩微生物指標的影響

黃柳云 李秋芳 周傳檢 龍致科

（柳州兩面針股份有限公司，廣西柳州，545001）

茶麩是傳統洗發用品，在我國具有長遠的歷史使用記錄，其具有修復受損頭發、烏發等功效。茶麩，別名茶枯、茶籽餅、茶粕，富含有茶皂素、多種氨基酸以及天然茶油等，長期使用有止屑、止癢、去油、殺菌、修復受損發質的功效，還有明顯烏發、生發作用是大自然最佳的清潔劑之一。如果能夠以茶油、茶麩及中草藥復配，結合中醫藥理論，用生物化工技術進行資源開發具有功效性的洗發用品，不僅可以豐富洗發產品路線，還可以進一步提高農副產品的利用檔次，提升利用的技術含量，從而提高農副產品經濟附加值。

但是，茶麩作為天然中草藥資源以及農副產品，其自身的指標要求并不完善，例如微生物指標時常超標，蛋白質、油脂指標含量因相關處理后降低或偏低等。其中，微生物指標作為產品的衛生指標，是決定產品質量的重要因素之一。

本實驗擬采用3種常用滅菌方法[1-4]進行研究和對比，分析茶麩中主要有效成分（蛋白質：以氮含量表示、油脂）含量的變化，以及菌落總數變化情況，探討適合茶麩的處理工藝，并將茶麩應用于洗發用品配方中，為茶麩洗發用品的研發和生產提供技術支持。

1 實驗材料與方法

1.1 實驗材料

（1）實驗原料：茶麩，春季茶籽榨油后余下的渣料副產品。存放不超過6個月。

（2）化學試劑：濃硫酸、4%硼酸、硒片、20% NaOH、0.1mol/L HCl、乙酸酐、二氯甲烷、無水乙醚、卵磷脂-吐溫80營養瓊脂培養基等。

1.2 實驗方法

1.2.1 氮含量測定實驗

參考GB/T55ll—2008/ISO 20483:2006《谷物粗蛋和豆類 氮含量測定和粗蛋白質含量計算 凱氏法》進行實驗。

采用凱氏定氮儀進行操作。第一步：消化器消解。打開水源，預熱消化器；待達到預定溫度后，向消化管中加入0.7～0.9 g樣品，接著依次加入硒丸2個、25 ml濃硫酸；將消化管接到廢氣收集器上，打開吸氣器（先充滿、蓋上蓋子、再擰緊），消化器消化1 h后，將裝置從消化器移到冷卻架上，冷卻待用。第二步：蒸餾測定。按要求設置好參數后，啟動凱氏定氮儀上的“硼酸滴定”，記錄氮含量相關數據。

1.2.2 油脂含量測定實驗

參考GB/T 5539—2008《糧油檢驗 油脂定性實驗》4.3茶籽油的檢出進行實驗。

量取乙酸酐0.8 ml、二氯甲烷1.5 ml和濃硫酸0.2 ml于試管中，混合后冷卻至室溫,加約重0.21～0.23 g樣品于管中,混勻冷卻，如溶液出現渾濁，則滴加乙酸酐，邊滴邊振搖,滴至突然澄清為止。靜置5 min后加入10 ml無水乙醚注入顯色液中，立即倒轉一次使之混合，觀察顏色變化。約在1 min內,油茶籽油將產生棕色，后變深紅色，在幾分鐘內慢慢褪色。可在上述操作完成后，靜置5 min后，將試管置于冰水浴鍋中1 min,加入經過冰水冷卻的無水乙醚10 ml混合后再置于冰水浴中1～5 min,顏色深度可達最高峰，用已知油茶籽油含量的試樣與被檢試樣,選用最深的紅色進行比色定量。

1.2.3 菌落總數測定實驗

參考《化妝品安全技術規范》（2015年版），第五章微生物檢驗方法中的菌落總數檢驗方法進行試驗。

1.2.4 茶麩微生物指標處理方法

采用臭氧滅菌、鈷-60滅菌、干熱滅菌3種方法對茶麩進行處理，對比處理前后微生物菌落總數值，以及三個月穩定性考察。

（1）臭氧滅菌方法：1 kg茶麩粉實驗使用設備：800 L臭氧滅菌罐；配套設備：60g臭氧發生單元，兩組8 L制氧單元（屬于800 L高配）；臭氧滅菌時間：210 min；臭氧濃度：80 mg/L。

（2）鈷-60滅菌方法[3]：現今對中藥粉進行滅菌最有效的方法之一。將1 kg茶麩粉放置于紙盒中，進行鈷-60滅菌，輻射劑量為1～10 kGy。

（3）干熱滅菌方法[4]：將1.5 kg的茶麩粉均勻分成3份，樣品平鋪在搪瓷托盤中，厚度約為3 cm，進行100 ℃、130 ℃、160 ℃三個溫度梯度，1 h、2 h、3 h三個時間的梯度的處理。

2 實驗結果

2.1 滅菌處理實驗結果

由表1～表4可知：

表1 臭氧滅菌處理及理化指標實驗結果

表2 鈷-60滅菌處理及理化指標實驗結果

表3 干熱滅菌處理實驗結果

表4 干熱滅菌理化指標實驗結果

（1）在實驗條件下，臭氧滅菌未能完全殺滅所有微生物，鈷-60滅菌以及130 ℃ 2 h以上條件滅菌對茶麩中微生物指標殺滅效果較好，菌落總數均<10 cfu/g。

（2）鈷-60滅菌、干熱滅菌對茶麩油脂含量幾乎無影響，而臭氧滅菌降低了茶麩中的油脂含量。

（3）三種滅菌方式均對茶麩中氮含量幾乎無影響。

2.2 三個月茶麩粉穩定性考察

在考察的3個指標中，微生物指標易受到環境因素的影響，在未能完全殺滅的情況下，微生物可能再次滋生。故本研究進行了微生物指標3個月常溫穩定性考察。結果如表5所示，3種滅菌方法處理后，茶麩微生物指標均處于穩定。

表5 茶麩粉微生物指標常溫穩定性考察結果

2.3 產品應用

根據上述結果，選用鈷-60（樣品1）、130 ℃2 h（樣品2）兩種滅菌所得的茶麩粉，按如下基礎配方制作茶麩洗發粉小樣，并進行3個月微生物指標穩定性考察。結果顯示，運用這兩種滅菌方法，并配合一定的防腐體系，通過微生物指標穩定性考察，可以保證產品的微生物指標的穩定。

表6 茶麩洗發粉基礎配方

表7 茶麩洗發粉微生物指標穩定性考察結果

3 討論

本文通過分析3種滅菌方法對茶麩粉3項指標的影響，有效地應用于茶麩洗發產品開發中，保證茶麩洗發產品的質量安全。結果顯示：臭氧滅菌法未能完全殺滅所有微生物，且影響茶麩粉原有的油脂含量，其工藝適用度較低；干熱滅菌法需在130 ℃2 h以上的滅菌條件，能有效殺滅微生物并通過穩定性考察，同時不影響茶麩粉油脂和氮含量，但基于生產實際，當添加量少或者有一定容量的干熱滅菌設備的時候更適用；鈷-60滅菌法，是現階段處理中草藥微生物指標的一個有效方法，經過實驗發現鈷-60滅菌法能有效殺滅茶麩粉中的微生物并通過穩定性考察，也不影響其油脂和氮含量，添加量大時也具有較強的適用性。再根據結果，選擇干熱滅菌和鈷-60滅菌原料制作洗發粉小樣，通過了3個月微生物穩定性考察，為茶麩洗發用品原料微生物指標的生產工藝提供了技術支持。