羊布魯氏菌病的診斷與防治

朱應平

（山東省濟南市鋼城區農業農村局，山東 濟南271104）

布魯氏菌是一種對環境適應性強且對動物和人類侵害性大的致病菌，除了感染羊、牛、豬等家畜外，還可感染人類，在我國屬于二類動物疫病。致病菌可通過消化道、呼吸道、昆蟲叮咬和受損黏膜等渠道感染易感動物和人類[1]。

1 病原特點

羊布魯氏菌是一種短桿（球）狀的革蘭氏陰性嗜氧菌，無莢膜無芽孢，對環境的耐受力極強，在干燥或濕潤環境中均可存活數月。但對高溫、紫外線光照不耐受，當環境溫度超過100℃且濕度較小時，8 min可將其殺滅，在80℃的濕熱環境中6 min可被殺滅。紫外線光照4 h也可殺滅此菌。同時，羊布魯氏菌對大多數消毒劑不耐受。

2 流行病學

2.1 傳染源

感染羊布魯氏菌的病羊和隱性帶菌羊。

2.2 易感動物

牛、羊、豬和人類均可感染，母畜發病率高于公畜，成年動物發病率高于幼齡動物，尤其是第一胎母畜更易感。

2.3 傳播途徑

母羊產道分泌物、糞尿、乳汁、羊水、胎衣和流產組織，種公羊的精液，病死羊的肉、組織臟器、羊皮、羊毛等均含有大量的羊布魯氏菌。該致病菌可通過消化道、呼吸道、結膜或交配傳播，也可通過吸血昆蟲機械傳播。

2.4 流行特點

一是無典型的流行季節。但夏季高溫潮濕有利于布魯氏菌滋生。二是呈地方性流行。在老疫區，母羊流產率低；在新疫區，主要危害妊娠母羊，導致流產率高。

3 臨床癥狀

3.1 羔羊癥狀

羊布魯氏菌對羔羊危害不大，許多羔羊感染后不會出現典型癥狀。

3.2 母羊癥狀

羊布魯氏菌對母羊尤其是妊娠母羊危害大，發病初期，母羊食欲不佳、精神不振、逐漸消瘦，陰道分泌物呈黃色。一般在妊娠后3～4個月開始出現子宮內膜炎癥狀，陰道分泌物呈灰白色，突然流產，即使能夠分娩出胎兒也多為死胎，且產后胎衣不下的幾率非常高。未懷孕母羊感染后發情不規律，受胎率低。哺乳母羊感染后出現乳房炎，部分母羊還會出現關節炎等癥狀。

3.3 公羊癥狀

發病初期食欲和精神不振、喜臥，隨著病情發展，公羊睪丸發熱、萎縮，出現睪丸炎甚至壞死，精液品質明顯變差，甚至喪失種用功能。

4 病理解剖

4.1 母羊

妊娠母羊流產組織呈黃色，內含大量膠樣浸潤物質。流產胎兒有明顯的敗血癥狀，尤其是流產胎兒的皮下和肌肉組織出血明顯，胃腸黏膜充血。胎盤絨毛膜充血腫脹，并有許多出血點，部分組織呈糜爛狀。母羊肝臟有壞死灶，真胃黏膜出血明顯，脾臟淋巴結腫大。

4.2 公羊

公羊睪丸腫脹，陰囊皮膚上有少量出血點，病情嚴重的公羊睪丸上出現壞死灶。

5 診斷方法

5.1 顯微鏡診斷

無菌條件下采集病羊流產組織、胎衣、真胃內容物等制成涂片，用專用的布氏桿菌染色液對涂片進行染色，然后置于光學顯微鏡下觀察致病菌，若能發現短小桿菌且顏色呈紅色，即說明病料中含有布魯氏菌。

5.2 致病菌的分離培養

無菌條件下采集病羊血液，接種至血液增菌液中，混勻后37℃下培養3 d，若血增菌陽性報警則提示為陽性菌。可接種到巧克力瓊脂培養基上，置于二氧化碳培養箱內37℃下培養24～48 h，再置于超凈臺上觀察，若發現培養基表面有光滑濕潤的灰白色針尖狀菌落，則初步判定為布魯氏菌。

5.3 血清學診斷

5.3.1 酶聯免疫吸附實驗（ELISA）。ELISA實驗檢測儀器為酶標儀，可杜絕人為判斷造成的誤差，具有靈敏度和準確度高的特點，但是成本高。在96孔板中加入陰性、陽性和待檢血清，25℃孵育1 h后洗滌，加入酶標抗體，25℃下孵育30 min后洗滌，加入TMB底物，避光孵育20 min后加入終止液，在酶標儀上檢測450 nm處的吸光值，若S/P≥120%則為陽性。

5.3.2 虎紅平板凝集實驗 （RBPT）。RBPT實驗耗時短、操作簡便、成本低、靈敏度高，適用于羊群、牛群和生豬群體的普查。采集待檢羊血液樣本，離心收集血清，在玻璃板上加入虎紅平板凝集抗原（粉紅色）和等量待檢血清，用無菌牙簽混合后，4～5 min內觀察反應結果，若仍為粉紅色且無凝集則為陰性，若發現粉色變淡且出現凝集則為陽性。

5.3.3 補體結合試驗（CFT）。CFT實驗操作復雜，反應成分較多，但特異性和靈敏度高，假陽性率低。準備溶血素、抗原、補體、血清樣本（陰性、陽性和待檢血清）、2.5%紅細胞懸液這五種材料，若出現40%溶血即為陽性，若出現100%溶血則為陰性。

5.3.4 試管凝集實驗（SAT）。SAT實驗成本低、敏感性強，但操作復雜，容易受實驗人員主觀判斷的影響，因此不適于布魯氏菌的普查。

5.4 分子生物學診斷

熒光定量PCR方法具有靈敏度和特異性高的特點，且能定量，但是儀器設備成本高，對操作人員的技術水平有一定的要求，因此目前只局限于實驗室檢測。

6 防治措施

6.1 定期篩查、檢疫

每年對羊群進行2～3次布魯氏菌血清學檢測，若發現陽性病羊需要及時隔離和進行藥物治療，并對治療后的病羊進行多次血清學檢測，若3次以上均為陽性則需淘汰[2]。

6.2 自繁自養，降低外源性風險

養殖場最好采用自繁自養的飼養方式，這樣可以杜絕外源性病菌侵襲。若必須引種，則需要對引種區域的羊只做好流行病學調查，并核查產地檢疫證明。羊只到場后不能立即混群飼養，需要隔離30 d后進行布魯氏菌病篩查，只有結果為陰性才能合群。隔離期間由養殖場派專門人員進行飼養管理。

6.3 合理護理羔羊

若母羊妊娠后期感染布魯氏菌，則羔羊出生后體質較弱，也可能攜帶致病菌，因此需要做好羔羊護理工作。即羔羊出生后與母羊隔離飼養，初乳和常乳可以是其他非感染的健康母羊的乳汁。羔羊至5月齡后采集其血液樣本進行布魯氏菌篩查，若為陰性則繼續飼養；若為陽性則進行隔離，并根據治療情況決定淘汰與否。

6.4 環境消毒

由于布魯氏菌對大多數消毒劑較為敏感，養殖戶可通過日常消毒有效殺滅土壤和環境中的致病菌。羊舍、用具等可用2%氫氧化鈉溶液或10%石灰乳噴灑消毒。及時更換墊草，保障羊舍和運動場地面干燥無糞污。對病死羊及其污染物要做好無害化處理[3]。

6.5 人員防護

養殖場人員必須做好自身消毒，接觸羊群前后都需要用消毒液清洗衣物和手，并對衣物進行紫外照射消毒。

7 結語

綜上所述，羊布魯氏菌病傳播途徑廣、侵襲性強，養殖戶必須樹立正確的防控意識，采取科學的防范措施。只有做好羊群凈化工作才能從根本上降低疾病發生率。針對高發區域，可定期給羊只接種布魯氏菌疫苗，以提高羊群整體免疫力。