朱俊峰,于書云,楊建生
(1.江蘇省昆山市第一動物防疫站,江蘇 蘇州 215334;2.江蘇省昆山市畜牧獸醫站,江蘇 蘇州 215300)
豬偽狂犬病是一種危害全球養豬業健康發展的重大疫病。該病的暴發主要與引進帶毒種豬、不重視防疫工作、易感動物多、消毒管理不當及免疫接種不科學有關。由于豬偽狂犬病可導致新生仔豬死亡率、妊娠母豬流產率和產死胎率增高、育肥豬生長發育遲緩以及種公豬不育等不良后果,嚴重影響養豬業規模化和現代化發展。目前對豬偽狂犬病的診斷方法有很多種,可通過病毒分離鑒定、PCR或血清學診斷來提高診斷的準確率。同時,筆者結合生產經驗,總結出豬偽狂犬病的綜合防治措施。
豬偽狂犬病的致病原為豬偽狂犬病病毒,該病毒直徑約150~180nm,受gE、gD和gI等多個基因調控。如果敲除主控基因,可有效降低病毒毒力,這也是豬偽狂犬基因缺失苗的制備原理。豬偽狂犬病病毒對外界具有一定的耐受力,在冬季干燥環境下可存活46 d,夏季可存活30 d。豬偽狂犬病病毒對酸堿具有一定的抵抗力,pH4~9均能穩定存活,5%石炭酸溶液、1%氫氧化鈉溶液、乙醚或氯仿均能滅活,而且對紫外線具有較高的敏感性。
豬在冬季和春季氣溫較低時容易感染,如果處于分娩高峰期的母豬感染則仔豬出生也后會被感染。發病豬主要以15日齡內的仔豬為主,發病最早為4日齡,死亡率超過85%。隨著豬群年齡增長及抗病力增加,豬偽狂犬病的發病率和死亡率也會相應下降,成年豬的感染癥狀也會較輕[1],大多數呈現輕微發病,死亡率極低。
除了豬是豬偽狂犬病的易感動物外,牛、羊等反芻動物,貓、犬等家養動物也能夠感染,人偶爾也有發病報道。
偽狂犬病豬、偽狂犬帶毒豬及偽狂犬帶毒鼠類是該病的主要傳染源。豬偽狂犬病毒可隨著病豬的鼻液、唾液和乳汁等分泌物排出,也能夠通過尿液排出,動物感染后可持續排毒長達1年時間。帶毒鼠類也可作為傳染源將疫情擴大。
豬偽狂犬病毒可通過胎盤垂直傳染給胎兒,泌乳母豬感染該病7 d左右乳中有病毒出現,新生仔豬吸吮帶毒乳汁后即被感染;健康豬只直接接觸病豬破損的皮膚或與感染豬自然交配(或人工授精)均能感染;健康豬只接觸被病毒污的染物品(如飼料、飲水和用具)均能感染。
豬偽狂犬病的潛伏期為3~6 d,不同年齡豬只的發病率和死亡率不同,日齡越小的仔豬死亡率越高。
新生仔豬由于自身免疫力較低,感染后一旦出現神經癥狀,死亡率接近100%。仔豬感染后體溫升高至41~41.5℃,表現為興奮、流涎、流鼻涕、咳嗽、呼吸困難、全身肌肉痙攣及運動障礙,部分病仔豬狂躁不安、結膜發炎、眼球震顫及肌肉抽搐。病情嚴重的仔豬身體仰曲,最后昏迷衰竭死亡。如果治療及時,可在7 d內康復,而耐過仔豬會發育不良,最終成為僵豬[2]。
病豬主要表現為呼吸系統癥狀,即體溫略微升高、咳嗽、打噴嚏、流涎及體重增長緩慢,此外還會出現角弓反張和運動失調等精神癥狀。
適配母豬不發情或屢配不孕,返情率高;妊娠母豬流產率、產弱仔率和產死胎率均增高,同時伴有腹瀉和嘔吐癥狀,妊娠母豬流產率可達50%。
種公豬的睪丸萎縮或腫脹,精子活力下降,甚至完全失去種用價值。
剖檢后無典型病變。如果病豬出現運動失調及抽搐等神經癥狀,剖檢可見腦膜出現不同程度水腫、充血和出血癥狀;如果病豬有咳嗽癥狀,扁桃體可見多個灰白色病灶及化膿壞死性炎癥,肺部呈小葉性肺炎及出血性炎癥,肝臟有大量大小不等的壞死灶,腎有點狀出血炎癥,腦實質有點狀出血癥狀;如果病豬臨死前有腹瀉癥狀,則大腸內容物稀薄,仔豬腸內容物存在許多未消化的凝乳塊,腸系膜有炎癥。
根據病豬的臨床癥狀和剖檢結果可進行初步診斷,但是由于成年豬只的癥狀不典型,診斷難度較大,也容易誤診。因此需要在初步診斷的基礎上通過病毒分離鑒定、PCR檢測、免疫熒光標記檢測和血清學檢測等實驗室診斷進行確診。
采集病豬口腔及鼻腔分泌物,或流產組織或病變組織(若豬只未出現典型癥狀,可以采集病豬三叉神經節)分離病毒,接種至敏感細胞內,培養24~72 h。如果細胞的折光性增強,而且細胞多呈葡萄串狀聚集在一起,表明細胞發生融合而形成合胞體。將上述細胞傳一代,制作細胞懸浮液給家兔(豬偽狂犬病陰性)皮下注射。如果注射后不久,家兔的注射部位出現搔癢、紅疹和潰爛等癥狀,而且3 d左右發生死亡,可確診為豬偽狂犬病。
根據豬偽狂犬病毒基因序列設計特異性引物,采集病料,PCR擴增目的片段,或通過熒光定量PCR檢測熒光信號進行快速判斷。
采集病料,帶分子標記上熒光素的抗體與病料抗原發現結合反應,其反應復合物帶有熒光,置于熒光顯微鏡下可檢測出病毒。免疫熒光標記方法簡單、快速,和病毒分離鑒定結果一樣具有較高的可靠性,但不適合育肥豬或隱性帶毒豬,也不適合免疫熒光標記方法。
酶聯免疫吸附檢測是一種適合大量樣本篩選的檢測方法,檢測耗時短、成本低,特異性和靈敏度較高,可作為替代病毒中和實驗的診斷方法。
豬場發現病豬后要及時采取隔離措施,緊急免疫豬偽狂犬病基因缺失弱毒活疫苗,30~45 d后加強免疫1次。為了降低豬群的感染風險,要及時對被病豬污染的豬舍及用具用清水沖洗,用1%燒堿溶液帶豬噴霧消毒,豬舍地面和墻壁用5%燒堿溶液噴灑消毒。為了預防人員感染和帶毒出場,必須對人員的衣物及鞋帽進行噴霧和紫外線消毒。病死豬、流產組織、病死胎、排泄物和污染物必須經過嚴格的無害化處理。
仔豬35~40日齡可通過滴鼻免疫接種偽狂犬基因缺失疫苗,每只豬注射1.0 mL。如果新生仔豬接種,滴鼻劑量減半。如果豬場有發病史,可在豬群80日齡注射接種2.0 mL。后備母豬配種前30 d肌肉注射偽狂犬基因缺失疫苗,妊娠母豬產前25~30 d注射2.0 mL,種公豬每半年肌肉注射2.0 mL。如果豬場疫情嚴重,需要每個季度免疫1次,并定時做好全群抗體檢測工作。如果豬只多次的檢驗結果均為陽性,需要及時淘汰病豬[3]。
首先,豬場應分群管理,根據不同豬群的生長階段飼喂相應的飼料,保障飼料營養均衡,并有足量的維生素和礦物質攝入。其次,定期驅蟲,每個季度對豬場驅蟲1次,可在每100 kg飼料中拌入15 g伊維菌素粉劑,連續喂服1周,能夠降低豬的寄生蟲感染風險,縮短出欄時間。第三,豬場發現陽性豬只,隔離治療后要定期對病豬進行血清學檢測,如果連續檢測仍為陽性感染豬,則對病豬淘汰處理,凈化豬群,阻斷豬偽狂犬病毒的傳播途徑。