甘肅栽培肉蓯蓉的鑒別研究

蘇學秀 張富嫻 賈存勤 滕澤學 楊 麗 陳小娟 楊世琴*

1.甘肅省白銀市藥品檢驗檢測中心，甘肅 白銀 730900；2.甘肅匯勤生物科技有限公司，甘肅 靖遠 730600

肉蓯蓉為常用的滋補中藥，具有補腎陽、益精血、潤腸通便的功能，常用于治療腎陽不足、精血虧虛、陽痿不孕、腰膝酸軟、筋骨無力、腸燥便秘等[1];具有調節免疫、抗氧化抗衰老、改善記憶[2]、抗病毒抗腫瘤等藥理作用[3]，主產于中國內蒙古、新疆、甘肅、寧夏等產區[4]。甘肅栽培肉蓯蓉為列當科植物肉蓯蓉CistanchedeserticolaY. C. Ma的干燥帶鱗葉的肉質莖，又稱荒漠肉蓯蓉[5]?！吨袊幍洹?015年版一部收載肉蓯蓉為列當科植物肉蓯蓉CistanchedeserticolaY. C. Ma或管花肉蓯蓉Cistanchetubulosa(Schenk)Wight的干燥帶鱗葉的肉質莖[1]。為了更好地鑒別甘肅栽培肉蓯蓉，本文建立了甘肅栽培肉蓯蓉顯微、薄層色譜鑒別方法，為鑒別甘肅栽培肉蓯蓉提供依據。

1 儀器設備及材料

詳見表1。

2 肉蓯蓉樣品

試驗用肉蓯蓉是2018年10月及2019年4月在甘肅種植產區酒泉市、張掖市、武威市、白銀市采挖的檢品，經筆者賈存勤正高級工程師鑒定為列當科植物肉蓯蓉 Cistanche deserticola Y. C. Ma的干燥帶鱗葉的肉質莖，見表2、圖1。

3 顯微鑒別

由于肉蓯蓉一般較為粗大，顯微鏡視野有限，采用顯微數碼成像技術建立了甘肅栽培肉蓯蓉的粉末顯微鑒別方法。

3.1 方法 取肉蓯蓉樣品粉碎過4號篩的粉末，用水合氯醛試液透化后[6]，使用電子成像顯微鏡，在40倍物鏡下觀察其顯微特征，并拍照見圖2。

表1 儀器設備及材料

表2 肉蓯蓉樣品信息

A.肉蓯蓉鮮品圖 B.肉蓯蓉飲片圖圖1 肉蓯蓉樣品性狀特征圖

A.導管；B.厚壁細胞；C.薄壁細胞；D.淀粉粒；E.纖維圖2 肉蓯蓉顯微特征圖

4 薄層色譜鑒別

4.1 色譜條件的優選

4.1.1 提取方法 對不同的取樣量(0.5 g、1.0 g、1.5 g)，不同的提取方式(水浴回流加熱、超聲)，不同提取溶劑(乙醇、乙醚、甲醇)，不同提取時間(10 min、15 min、20 min)，分別進行考察，確定了最佳的提取方法。

4.1.2 展開條件 對不同的點樣量(0.5 μL、1.0 μL、1.5 μL、2.0 μL、2.5 μL)，不同薄層板(G板、GF254板、聚酰胺板)，不同展開劑[甲醇-醋酸-水(2∶1∶7 )、甲醇-乙酸乙酯-水(2∶1∶7 )，不同溫濕度(T:17 ℃,RH:40%; T:22 ℃,RH:50%; T:25 ℃,RH:60%)，不同檢視條件(365 nm、254 nm)進行了比較，優化了薄層色譜條件(T：溫度，RH：干濕球法測定得的相對濕度)。

4.2 對照溶液制備

4.2.1 對照品溶液制備 精密取松果菊苷對照品11.20 mg(按89.7%計)、毛蕊花糖苷對照品12.04 mg(按92.5%計)，分別置于10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，分別制成每 1.00 mg/mL 的松果菊苷對照品溶液，1.11 mg/mL的毛蕊花糖苷溶液，作為對照品溶液。

4.2.2 對照藥材溶液的制備 稱取肉蓯蓉對照藥材粉末1.02 g，加甲醇20 mL，超聲處理15 min，濾過，濾液濃縮至近干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為樣品溶液。

4.3 樣品溶液制備 取5批次肉蓯蓉粉末各1.0 g，加甲醇20 mL，超聲處理15 min，濾過，濾液濃縮至近干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為樣品溶液。

4.4 展開 吸取“4.3”的5批次樣品溶液、“4.2.1”對照品溶液、“4.2.2”對照藥材溶液各 2 μL 點于同一聚酰胺薄層板上，在溫度為22～25 ℃，濕度為40%～50%條件下，以甲醇-醋酸-水(2∶1∶7 ) 為展開劑，展開，取出，晾干。

4.5 檢視 將“4.4”項薄層板置于紫外光燈( 365 nm) 下檢視，結果見圖3。

S1：肉蓯蓉對照藥材；S2：松果菊苷；S3：毛蕊花糖苷; S1-5:肉蓯蓉樣品圖3 肉蓯蓉薄層色譜圖

5 結果與討論

5.1 顯微鑒別結果 粉末呈棕褐色。薄壁細胞呈不規則多邊形，排列緊密，壁略彎曲。厚壁細胞呈類多角形，壁厚，隱約可見層紋。導管為螺紋、網紋導管。淀粉粒較多，為長卵形、球形、長圓形，長 8～40 μm，臍點多呈點狀、裂縫狀;復粒極少,由2分粒組成[7]。纖維長梭形，有的中間有隔。

5.2 薄層色譜鑒別標準 取本品粉末1 g，加甲醇20 mL，超聲處理15 min，濾過，濾液濃縮至近干，殘渣加甲醇2 mL使溶解，作為供試品溶液。另取肉蓯蓉對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。再取松果菊苷對照品、毛蕊花糖苷對照品，加甲醇分別制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述三種溶液各2 μL，分別點于同一聚酰胺薄層板上，在T:22～25 ℃，RH：40%～50%條件下,以甲醇-醋酸-水(2∶1∶7)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。5批樣品試驗結果，方法專屬性強、斑點清晰、分離效果佳、穩定性好。

6 結論

本文首次建立的甘肅栽培肉蓯蓉的顯微、薄層色譜鑒別方法，完善了質量控制標準，為甘肅栽培肉蓯蓉的鑒別提供了依據，建議可作為荒漠肉蓯蓉的品種鑒定依據。