核酸檢測技術在基層血站血液篩查中的應用

謝蘭倩

（欽州市中心血站，廣西 欽州，535000）

在臨床治療期間，血液需求量較大，因此保證血液安全對疾病治療與降低病原體傳染具有重要意義。基層血站為醫療機構提供血液，而其血液篩查能力會直接影響用血安全問題，需要高度重視對血液的篩查[1]。目前我國血液篩查方法包括核酸檢測與血清學檢查，其中酶聯免疫吸附法是血清學監測的主要方法[2]。而核酸檢測技術能夠直接檢測病原體基因組，最大限度的縮短病原體指標檢測窗口期，能夠提高血液檢測工作效率，降低病原體傳播[3]。自核酸檢測在我站開始推廣，從2017 年5月開始核酸檢測覆蓋獻血標本，為了解我市的獻血者NAT 陽性結果進行回顧性分析，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇112302 例2017 年5 月-2020 年12 月欽州市中心血站無償獻血標本進行研究，納入標準：①均符合《獻血者健康檢查要求》中獻血要求及標準；②接受酶聯免疫吸附法檢測，無任何反應。

1.2 方法

標本采集：每位獻血者留取2 管5ml 血液標本，采用EDTA-K2 抗凝劑，第一管為常規真空管，用于ELISA、ALT、血型等的檢測，第二管采用帶分離膠真空抗凝管，用于NAT 檢測。儀器與試劑ELISA 儀器與試劑：儀器：前處理標本處理儀：TECANEVO150/8，后處理全自動酶免分析儀FAME 24/30。ALT 儀器：邁瑞（BS-460） 試劑：HBV 檢測試劑盒（北京萬泰、珠海麗珠）；抗-HCV 試劑盒（英科新創、上海科華）；HIV 試劑盒（北京萬泰、法國BIO-RAD 公司）外部質控品為北京康切斯坦生物有限公司提供。ALT 試劑：深圳邁瑞生物醫療有限公司。核酸儀器與試劑核酸儀器：蘇州華益美血液核酸篩查系統AB-T-200和HAMLTONBONADUZ AG 科華血液核酸篩查系統。NAT 試劑：HBV、HCV、HIV（1+2）核酸檢測試劑盒（蘇州華益美）；HVB、HCV、HIV（1+2）（上海科華）。

檢測方法：使用兩種不同廠家的試劑對HBV、抗-HCV、抗-HIVAg/Ab、抗TP 進行ELISA 檢測，陰性結果采用核酸篩查系統進一步進行核酸檢測，NAT 反應性的標本為陽性。

1.3 觀察指標

對全部標本進行ELISA 檢測，對陰性的獻血者進行HBV、HCV 和HIV3 項進行NAT 檢測，對結果呈陽性的獻血者進行資料分析[4]。

1.4 統計學處理

本研究采用SPSS 18.0 統計軟件對本文數據進行分析，計量資料用χ ±s 表示，采用t檢驗，計數資料用百分比表示，采用χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 比較兩組患者

ELISA 總共檢測人份數：112302 例，不合格人份數：3087例，總合格人數：109208 例，不合格占總人數：2.75%。

其中HIV 不合格人數：68 例，HBV 不合格人數：929 例，HCV 不合格人數：152 例，TP 不合格人數：472 例，ALT 不合格人數：1303 例。

核酸檢測HBV-DNA：115 例，核酸檢測hcv：0 例，核酸檢測HIV：0 例。

3 討論

血液安全性與血站采集的血液標本有直接的關系，而基層血站在采集血液期間，可通過酶聯免疫吸附試驗，了解病毒抗體與病毒抗原產生直接的了解，但由于其檢測技術存在窗口期，使得檢測誤差較大[5]。近幾年，我國血液檢測技術發展逐漸加快，基層血站血液檢測工作中使用核酸檢測技術，對病毒核酸進行檢測，縮短檢測“窗口期”，使得血液安全性有一定提高[6]。這一技術的主要優勢在于高度自動化、高敏感性，能夠將血液樣本中含量極低的核酸檢測出來，病毒科在短時間內檢查出來[7]。

長期以來，我國都采用ELISA 方法進行兩遍的血液篩查，使輸血傳播疾病的風險大幅度降低，ELISA 敏感度較高，存在較多的假陽性和假陰性，并且檢測的“窗口期”比較長，存在漏檢的風險比較大[8]。本文通過將核酸檢測技術納入研究，結果顯示：HIV 不合格人數：68 例，HBV 不合格人數：929 例，HCV不合格人數：152 例，TP 不合格人數：472 例，ALT 不合格人數：1303 例。核酸檢測HBV-DNA：115 例，核酸檢測hcv：0 例，核酸檢測HIV：0 例。核酸檢測技術通過提取血液中核酸、檢驗血液標本中核酸的擴增等流程，使得核酸兩得到擴增，能夠快速檢測感染病毒的血液標本[9]。通過分析漏診的原因，主要在于：1.由于基層血站剛開始開展核酸檢測技術，可能工作人員對相關注意事項不夠了解，隨著逐漸推廣核酸檢測技術，可有效降低由于人為因素導致的誤診情況[10]。2.由于地域因素及人群分布等原因的影響，會造成不同地區之間血液樣本較大的差別。3.由于血液樣本在運送到實驗室途中保存不當會出現標本檢測異常，但目前我院已經采取全程溫控監視[11]。4.儀器在保養、檢測上存在一定要求，部分人員可能不夠了解。因此臨床檢測期間需要加大對操作的要求，最大程度的提高陽性確診率，提高臨床輸血安全性[12]。ELISA 檢測在受到病毒變異、隱匿性感染等因素影響下，血液檢測過程中存在一定漏診率，為了確保用血安全，運用核酸檢測技術與酶聯免疫吸附檢測互補，縮短窗口期，提升陽性率，為臨床用血與疾病治療提供了有利保障。

綜上所述，核酸檢測技術在基層血站中實施，能夠促進多項檢測靈敏度，使得基層血站篩差血液傳播性疾病水平明顯提高，與血清學配合檢測，能夠使得臨床用血安全性有一定提高，并確保在檢測期間按個要求，保障基層血站血液質量安全。