D-二聚體檢測方法及臨床應用進展

曾革寬

（融安縣中醫醫院，廣西 柳州，545400）

D 一二聚體是來源于纖溶酶溶解的交聯纖維蛋白凝塊，主要是對纖維蛋白溶解功能反映指標。目前機體D-二聚體水平升高原因較多，包括血液高凝狀態、靜脈血栓形成、彌漫性血管內凝血及肺栓塞等。因此，開展D-二聚體檢測對某些疾病預測具有較高參考價值。近些年來隨著臨床對D-二聚體相關研究開展增多，對其研究不斷深入，其臨床應用價值有了更多研究進展，如國內外多項研究顯示，D-二聚體檢測可有效預測腫瘤疾病及評估預后等作用等[1]。同時，臨床開展D-二聚體檢測優點為安全無創，且費用低廉、檢測方便快捷，上述均是D-二聚體檢測廣泛開展提供有利條件，患者對上述檢測更易接受[2]。本文就D-二聚體檢測方法及臨床應用情況如下分析，現報道如下。

1.D-二聚體概述

1.1 D-二聚體檢測原理依據D-二聚體測定過程中，主要涵蓋以下兩個部分：D-二聚體片段必須被單克隆抗體捕獲，并固定在微孔板、膜結構較大結構上，與乳膠珠、紅細胞連接。檢測單克隆抗體捕獲D-二聚體后，需要被定量檢測出現[6]。因此，D-二聚體分子必須具有兩個不同表位，通過此類測定法檢測，基于凝集測定中，相同單克隆抗體作為捕獲抗體又做為檢測抗體[7]。

1.2 D-二聚體檢測D-二聚體作為可溶的纖維蛋白降解產物，產生過程中涉及到凝血酶、活化因子XIII、纖溶酶三種酶的作用。目前對D-二聚體檢測方法較多，不同檢測方法所應用試劑及檢測標準不一致，據報道約有20 種不同單克隆抗體并涉及30 種不同測定方法應用于D-二聚體的測定[8]。常見包括酶聯免疫吸附試驗、酶聯免疫熒光試驗、全血凝集試驗、乳膠凝集試驗及免疫比濁法，不同檢測方式應用下各有優缺點，所適應檢測方向不同。全血凝集試驗使用與D-二聚體和紅細胞膜抗原結合位點的雙特異性抗體，當D-二聚體水平升高則發生紅細胞凝集。全血凝集試驗為一項定性試驗，可迅速確定結果。酶聯免疫吸附試驗、酶聯免疫熒光試驗、乳膠凝集試驗及免疫比濁法作為定量試驗可檢測及D-二聚體水平。酶聯免疫吸附試驗、酶聯免疫熒光試驗檢測方法的原理相同，但酶聯免疫吸附試驗操作費時、檢測時間長，而酶聯免疫熒光試驗在保證傳統酶聯免疫吸附試驗法的高敏感性、特異性前提下，極大縮短檢測時間，對單個樣本進行檢測[9]。乳膠凝集試驗依賴于包被于乳膠顆粒的單克隆抗體，對乳膠凝集稀釋度判斷和計算樣本中的D-二聚體含量，被認為為一種半定量檢測方法。乳膠增強免疫透射比濁法應用邁瑞EXC810 自動凝血分析儀，儀器性能良好、檢測準確、精密度高、參加室間質控取得優秀成績。為D-二聚體檢測提供質量保證。免疫比濁法基于乳膠凝集法基礎上利用自動凝血分析儀檢測透射光強度變化計算樣本D-二聚體含量，免疫比濁法靈敏度、精密度更高，避免人工加樣的偶然誤差，被廣泛應用于臨床。

2.D-二聚體的臨床應用

2.1 產科疾病診斷妊娠期女性血液呈現高凝狀態，纖溶活性上升維持纖溶、凝血動態平衡。因此，相比較非妊娠期女性，妊娠期女性D-二聚體水平明顯偏高。研究指出[10]，妊娠女性D-二聚體水平與孕周呈現正相關，當孕周時間越長則D-二聚體水平越高。研究指出[11]，D-二聚體水平與妊娠期糖尿病產生關系緊密，交聯纖維蛋白特異性產物水平與血管損傷呈現正相關，血管損傷越嚴重則特異性產物水平越高，會增加合并癥發生可能性。孕婦合并妊娠期糖尿病合并癥會導致機體內纖溶、凝血水平變化，妊娠期糖尿病患者C 反應蛋白、白介素以及腫瘤壞死因子隨血糖水平升高增加，改變血管內皮細胞結構，增加血管通透性，增加胰島素抵抗反應。同時，妊娠期D-二聚體水平與高血壓病情況呈現正相關。

2.2 血栓性疾病D-二聚體被廣泛用于血栓性疾病預測及療效評估中有重要臨床意義。對肺栓塞疾病檢測中，D-二聚體具有重要臨床意義，對肺栓塞敏感性偏高，同時可有效進行陰性預測，因此臨床中將D-二聚體作為一項重要指標，被廣泛用于肺栓塞初篩中[13]。但臨床實際應用過程中，需避免將D-二聚體作為疾病篩查唯一診斷標準，要想提高疾病診斷結果，仍需與其他診斷結果聯合應用，如臨床表現、體征、影像學檢查等。多數手術患者在圍手術期，尤其為術后極易產生深靜脈血栓、肺栓塞等嚴重并發癥，影響手術效果及預后同時，甚至會對患者生命安全構成較大威脅。因此，需重視對圍手術期患者開展D-二聚體檢測工作，以便及時預測血栓類型的并發癥，做好相應預防及其治療工作。

2.3 心腦血管疾病D-二聚體在多數疾病中呈現升高，包括心房顫動、腦梗死及急性動脈夾層等。心房顫動患者血漿D-二聚體水平會高于非心房顫動患者，經臨床抗凝治療及成功負律后，患者D-二聚體水平呈現下降。對心房顫動患者D-二聚體水平更高患者會增加腦卒中風險發生率，但部分研究表明[12]，與其他生物標志物相比較，如肌鈣蛋白、N 端腦鈉肽前體及生長分化因子15 相比較，D-二聚體水平并不會增加心房顫動患者腦卒中風險預測模型的預測值。因此，D-二聚體水平對預測心房顫動患者腦卒中發生風險價值有限。同時，因D-二聚體地特異性影響下，僅依靠D-二聚體水平診斷急性腦梗死時，會增加假陽性發生率，為此臨床診斷急性腦梗死時，仍需進一步論證D-二聚體應用價值。快速診斷急性主動脈夾層可有效降低患者死亡率。研究指出[13]，對1557 例低風險急性主動脈夾層4 項研究數據分析中，當D-二聚體＜500ug/L 靈敏度為98%，陰性預測值為95%，可有效排除低風險患者急性主動脈夾層診斷。對非低風險患者僅依據D-二聚體水平難以對急性主動脈夾層排除。可見，臨床對急性主動脈夾層診斷中D-二聚體應用作用受限。

2.4 惡性腫瘤靜脈血栓栓塞癥作為惡性腫瘤患者發病及死亡主要原因之一，癌細胞經過直接和間接機制對人體微環境產生促血栓形成作用，臨床則表現為血栓形成。研究提出[14]，D-二聚體與高敏C 反應蛋白等生物標志物可有效確定惡性腫瘤相關血栓形成的最佳抗凝治療持續時間，在預測及治療方案制定中發揮著重要作用。研究指出[15]，D-二聚體水平納入惡性腫瘤患者評分系統中可改善惡性腫瘤患者靜脈血栓栓塞風險預測，同樣為預測最強因子之一。但目前對上述風險評估模型確定高危腫瘤患者初次預防血栓形成獲益情況，仍需臨床大量前瞻性管理研究及回顧性研究進一步確定。

3.小結

D-二聚體作為凝血及纖溶酶原標志，可有效且快速評估血栓活性，對臨床診斷靜脈血栓性疾病具有重要臨床意義，減少影像學檢查在多數疑似靜脈血栓性疾病或肺栓塞患者應用，為臨床制定更好抗凝治療方案提供檢驗依據。同時，D-二聚體在急性主動脈夾層及腦血管疾病中同樣發揮著一定價值。惡性腫瘤及妊娠疾病中應用價值逐漸凸顯，但患者因個性差異性，往往對D-二聚體水平影響仍需進一步深入探討及分析，及時排除對臨床疾病診斷假陽性干擾。D-二聚體與其他標志物聯合診斷下，有助于對某些疾病病情及治療效果精準評價，當臨床仍需大量大樣本回顧性研究及相關前瞻性研究證實。