杏鮑菇軟腐病研究進展*

常曉寧，郭紋余，鄭素月，王春霞，郭金英

（河北工程大學，河北 邯鄲 056038）

杏鮑菇（Pleurotus eryngii）屬擔子菌亞門（Basidiomycotina） 傘菌目 （Agaricales） 側耳科 （Pleurotaceae） 側耳屬（Pleurotus）[1]，因其野生條件下主要發生于刺芹植物枯死的根莖及周圍土層中，故又稱為刺芹側耳。因其肉質肥厚，質地脆嫩，味道鮮美，菌柄色澤雪白，粗長；組織致密、結實，口感獨特，因而被稱為“平菇王”“干貝菇”“草原上的美味牛肝菌”等[2]。目前，杏鮑菇是我國食用菌工廠化生產的主要品種之一[3]。我國杏鮑菇多為密集化生產，若發生病害，極易在大范圍內傳播，給企業帶來經濟損失[4]。近年來，國內外多地均爆發了杏鮑菇軟腐病，病原菌主要為假單胞桿菌（Pseudomonas tolaasii）及歐文氏菌（Erwinia sp.）。該病害在子實體上產生水浸狀病斑，病斑逐步擴散至整個子實體，其侵染速度快、危害程度大，給生產企業帶來了嚴重的經濟損失。因此，通過分析比較引起杏鮑菇軟腐病的不同病原菌類型，對未來杏鮑菇軟腐病病害的研究方向提供了參考依據。

1 病原菌種類

1.1 菠蘿泛菌

2007年，Kim首次報道了在韓國杏鮑菇上發現的杏鮑菇細菌性軟腐病[5]。染病的杏鮑菇子實體上會形成深褐色的水浸狀病斑，產生難聞氣味及嚴重的軟腐病，影響杏鮑菇的生長。其病原菌菌落為黃色、凸起、圓形、邊緣光滑、質地發亮。初步判斷該菌株屬于Y-變形桿菌的腸桿菌科。該病原菌與最早引起軟腐病的菠蘿泛菌（P.ananatis）相似，具有較高的同源性[5]。軟腐病在植物中較為常見，但這是首次報道在杏鮑菇上發生的細菌性軟腐病。

1.2 北京泛菌

馬元偉、劉宇等[6-7]在杏鮑菇中分離出了4株革蘭氏陰性菌，經驗證該菌株為泛菌屬（Pantoea），其發病特征為：杏鮑菇菌柄或菌蓋上顯露出水浸狀斑點，受害部位腐爛，并伴隨黃色膿狀物的產生，侵害嚴重時杏鮑菇會發生畸形形態；從子實體上分離的病原菌菌落為黃色、光滑的圓形和凸形；根據基因型及表型數據，此次在杏鮑菇上分離的病原菌為該屬中的新物種，并命名為北京泛菌（P.beijingensis）。這是在我國首次發現的杏鮑菇細菌性軟腐病病例。泛菌屬廣泛存在，有研究報道，泛菌屬中的成團泛菌（P.agglomerans） 會侵染火龍果，可引起火龍果細菌性腐爛病[8]。

1.3 歐文氏菌

張瑞穎[9]從北京和福建采集患軟腐病的杏鮑菇，研究發現，該病在杏鮑菇或原基上呈現出水漬狀斑點，逐漸危害整個子實體；病害加重時，受侵染部位逐漸變軟，子實體發生變形，病害部位接觸到其他杏鮑菇時，也會傳染使其致病；經試驗鑒定，發現該病原菌屬于革蘭氏陰性菌，該菌體形態特征表明其可能為歐文氏菌屬（Erwinia）的菌株。

歐文氏菌是革蘭氏陰性菌，是一類侵染植物的病原菌；其可以侵染多種蔬菜和植物，如紅椒、土豆、魔芋、黃瓜及一些觀賞性植物，如蝴蝶蘭等。這類細菌存在于土壤中，也存在于水及懸浮的空氣中，其引發的病害，給農民和企業帶來了巨大的經濟損失。歐文氏菌在植物生長階段入侵，會使植物組織發生軟化，繼而腐爛并產生難聞氣味[10]。

1.4 芽孢桿菌

2013年藥欣榮等[11]發現了在山西杏鮑菇生產企業中杏鮑菇的一種新型病害，當該病原菌菌液侵染杏鮑菇時，在染病子實體的菌柄和菌蓋表面，會表現出粘稠狀腐爛病癥；被侵染的菌絲表現為生長速度緩慢，密度變得稀疏；經試驗證明，該病原菌為革蘭氏陰性菌，病原菌菌落為淡黃色、邊緣整齊，無粘性，有輕微的腐爛味道；推測該病原菌可能是芽孢桿菌屬（Bacillus） 細菌（Bacillus sp.M_17）。

1.5 北京歐文氏菌

徐峰等[12]通過單拷貝核心基因構建的系統發育樹以及全基因組平均核酸序列一致性（ANI） 分析，運用新技術對北京地區杏鮑菇軟腐病病原菌屬進行重新鑒定，確定其屬于歐文氏菌新種，命名為北京歐文氏菌（E.beijingensis）。

從上述研究可以看出，至少有4種病原菌可引起杏鮑菇軟腐病，主要報道的病原菌是菠蘿泛菌、北京泛菌、歐文氏菌、北京歐文氏菌以及芽孢桿菌。雖然病原菌不同，但引起的發病癥狀類似，會引起不同程度的軟腐病。由此可見，引起杏鮑菇軟腐病病原菌較為復雜，其致病性、防治措施等有待深入研究。

2 致病性及防治研究進展

近年來，國外研究人員從致病基因的角度對杏鮑菇軟腐病致病機制展開了相關研究。2014年Kim等[13]通過構建轉座子突變體等方法證明了wzc基因為朝鮮地區杏鮑菇軟腐病的致病基因；用轉座子誘變方法破壞wzc基因后，病原菌減少了胞外多糖的產生并降低了病原菌毒力而使其致病力減弱。

2017年Kim等[14]通過PCR擴增，克隆了杏鮑菇軟腐病子實體PPE7菌株中的RcsA基因，并研究了其在胞外多糖（EPS）合成和毒力中的作用，證明了RcsA基因為菌株PPE7的致病基因。

含有活性氯的化合物是控制細菌性疾病常用的化學藥品，在抑制由假單胞桿菌引起的食用菌細菌性疾病時，次氯酸鈉的最低濃度為40 mg·L-1[15]。Kim等[15]發現，防治杏鮑菇軟腐病的次氯酸鈉濃度在175 mg·L-1～350 mg·L-1；活性氯含量為 175 mg·L-1的次氯酸鈣溶液可有效減輕杏鮑菇的軟腐病，而不會影響子實體產量，超過350 mg·L-1時會抑制菌絲的生長。在生產實踐中，通過發病期噴施次氯酸鈉的方式，可以較好地控制杏鮑菇軟腐病。

杏鮑菇軟腐病在我國食用菌產業中的發病時間較晚，對其發病原因、致病基因和防治方法等研究尚不全面。近年的報道指出，在大棚栽培杏鮑菇時，細菌引起的杏鮑菇腐爛病一般和高溫、高濕有密切關系。因此需及時調控大棚內溫度和濕度，發生病害時及時噴灑無公害的2%石灰溶液進行消毒、殺菌，可有效控制病害發生[16]。張瑞華等[17]發現，由細菌引起的杏鮑菇腐爛病，防治措施有2種，一是降低培養料中的精料的含量（如玉米粉）；二是合理控制濕度和溫度，使出菇房溫度低于15℃，濕度低于90%，保持良好的通風條件也可減少病害發生。

在對病原菌的研究上，榮成博等[18]發現引起杏鮑菇軟腐病的病原菌為北京泛菌，其適宜在25℃～30℃生長，其中最適生長溫度為28℃，同時發現北京泛菌在含有卡那霉素、硫酸鏈霉素等多種抗生素LB平板上不能較好生長，因此可以在致病機理研究中，應用這幾種抗生素誘導基因突變菌株。二氧化氯作為一種殺菌劑，可有效減小污染，當二氧化氯濃度超過50 mg·L-1時，可抑制北京泛菌生長，因此可在生產實踐中使用[18]。

3 問題與展望

杏鮑菇在生長過程中會發生多種病害，通常由細菌引起，如對稱擲孢酵母（Sporobolomyces symmetricus） 引起的杏鮑菇紅斑病[19]、假單胞桿菌造成的杏鮑菇細菌性褐腐病[20]及杏鮑菇細菌病[21]等病害。目前的研究表明，溫度過高、濕度過大會增加病害的發生頻率[16-17]。軟腐病在植物中普遍存在，經常發生于甘藍類、白菜類、馬鈴薯、胡蘿卜和辣椒等蔬菜中。常見的有大白菜軟腐病[22]、胡蘿卜軟腐病[23]、魔芋軟腐病[24]等，造成植物軟腐病的病原菌種類較多，如菊歐文氏菌（Erwinia chrysanthemi）引起的紅椒軟腐病[25]；胡蘿卜軟腐果膠桿菌（Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum） 引起的大白菜軟腐病[26]；胡蘿卜軟腐果膠桿菌巴西亞種（Pectobacterium carotovorum subsp.brasiliense） 引起的黃瓜細菌性軟腐病[27]等。

食用菌生長周期短，病害種類多。病害發生時，若不及時采取措施，會造成嚴重的經濟損失；若采取化學防治，見效快，但是易造成農藥殘留，影響消費者健康安全。因此其病害防治難度比其他植物更加困難。因為利用化學藥物防治病害的局限性，越來越多的學者嘗試利用生物技術防治食用菌病害；如利用醋糟乙醇提取液防治平菇黃斑病[28]；利用解淀粉芽孢桿菌B26代謝產物防治金針菇匍枝根霉引起的病害[29]；利用5.00%精制山杏殼木醋液控制平菇細菌性褐斑病[30]等。

細菌性軟腐病會對栽培作物的經濟效益造成巨大的損失。杏鮑菇作為一種食（藥）用菌，是當今國內市場上最具發展潛力的食用菌品種之一[31]。國內外關于細菌性軟腐病對杏鮑菇造成的危害認識和研究尚且不足。通過學習參考其他植物軟腐病的研究情況，未來杏鮑菇軟腐病研究可從以下角度開展試驗研究，一方面，可以利用現代生物學技術，如PCR、分子標記、全基因測序等生物技術，從致病機理、致病基因等方面入手對病原菌進行徹底的分析了解；另一方面，杏鮑菇生長周期較短，不適宜化學農藥，應該致力于研究其在生產階段的管理方法及生物防治等方面的措施。除此以外，在杏鮑菇生產實踐的不同生長時期，合理的調節溫度和濕度也是預防病害最經濟、有效的措施。