液相色譜法測(cè)定土壤中滅多威和滅多威肟*

吳彥冬，白 雪，段路路

(上海化工院檢測(cè)有限公司，上海 200333)

氨基甲酸酯類農(nóng)藥發(fā)展于上世紀(jì)下半葉，最早在1926年毒扁豆生物堿被發(fā)現(xiàn)有殺蟲效果。由于該化合物具有類似于有機(jī)磷類農(nóng)藥的殺蟲機(jī)理(抑制生物體內(nèi)的乙酰膽堿酯酶)，且有機(jī)磷農(nóng)藥是使用十分廣泛的殺蟲劑農(nóng)藥。所以，介于可以預(yù)測(cè)到的廣泛研究前景，該化合物被開始作為先導(dǎo)化合物進(jìn)行研究。通過(guò)美國(guó)化學(xué)企業(yè)的研究，發(fā)現(xiàn)了甲萘威、吡唑威、滅多威等一系列殺蟲劑。本世紀(jì)，滅多威占據(jù)了大部分在氨基甲酸酯類農(nóng)藥的市場(chǎng)銷售份額。這些殺蟲劑由于高毒性，不僅在殺蟲上有應(yīng)用，還具有殺螨、殺線蟲的活性。滅多威又稱萬(wàn)靈、滅多蟲，是一種廣譜性的速效殺蟲劑。滅多威肟，又名甲硫基乙醛肟，一般是合成滅多威的中間體。

滅多威是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中常見(jiàn)的殺蟲劑。目前滅多威的測(cè)定方法主要采用液相色譜法[1-3]。滅多威肟的測(cè)定方法主要有氣相色譜法和液相色譜法[4-5]。目前尚未見(jiàn)到相關(guān)土壤中滅多威和滅多威肟同時(shí)測(cè)定方法。本文針對(duì)土壤中滅多威和滅多威肟的檢測(cè)，建立了一種簡(jiǎn)便而快速地檢測(cè)的土壤中滅多威和滅多威肟的分析方法。

1 實(shí) 驗(yàn)

1.1 儀 器

LC-20A(包括PDA檢測(cè)器SPD-M20A、柱溫箱CTO-20A、自動(dòng)進(jìn)樣器SIL-10AXL)，日本島津；SHA-C水平震蕩儀；高速旋轉(zhuǎn)離心儀；篩網(wǎng)等試驗(yàn)設(shè)備。

1.2 試劑及標(biāo)準(zhǔn)品

滅多威和滅多威肟標(biāo)樣(100 μg/mL，溶于乙腈)，購(gòu)置于安譜公司。乙腈(HPLC純)，超純水(由超純水機(jī)制得)。

1.3 儀器參數(shù)

色譜柱：Shim-Pack VP-ODS C18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm)。流動(dòng)相A：乙腈，流動(dòng)相B：超純水。梯度洗脫見(jiàn)表 1。柱溫30 ℃。流速1 mL/min。檢測(cè)波長(zhǎng)232 nm。外標(biāo)法定量。

表1 梯度洗脫表Table 1 Gradient table

1.4 樣品前處理步驟

將采取的土壤在30 ℃以下風(fēng)干，去除其中的碎石、木片等雜質(zhì)，經(jīng)非金屬材質(zhì)的2mm篩網(wǎng)過(guò)篩，得到實(shí)驗(yàn)用土。取10 g實(shí)驗(yàn)用土，與實(shí)驗(yàn)用水按照質(zhì)量體積為1 g:10 mL的比例進(jìn)行混合，得到100 mL的實(shí)驗(yàn)混合液。利用0.05 mol/L的鹽酸溶液或0.05 mol/L的氫氧化鈉溶液將實(shí)驗(yàn)混合液pH調(diào)整到中性。將混合液放置于水平震蕩儀中常溫震蕩3 h，靜置后，取其中30 mL溶液離心20 min。取上清液經(jīng)0.45 μm濾膜過(guò)濾后，置于2 mL樣品瓶中，待進(jìn)樣。對(duì)于靜置后試驗(yàn)溶液分層或有機(jī)物干擾較大的情況，可利用正己烷萃取后，取水層溶液過(guò)濾后進(jìn)樣。

2 結(jié)果與討論

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

通過(guò)分析一定質(zhì)量濃度的滅多威和滅多威肟標(biāo)準(zhǔn)溶液，通過(guò)紫外可見(jiàn)吸收光譜分析，發(fā)現(xiàn)滅多威肟在219～308 nm有較強(qiáng)的吸收峰；滅多威在215～245 nm有較好的吸收峰。綜合不同吸收波長(zhǎng)的液相色譜圖，經(jīng)過(guò)優(yōu)化，在232 nm波長(zhǎng)中兩個(gè)化合物有較好的吸收峰形。

2.2 提取方法選擇

由于滅多威肟遇酸分解為醛酮，故提取樣品時(shí)的水溶液pH值應(yīng)保持在中性或弱堿性條件，以防止滅多威肟分解。滅多威和滅多威肟均溶于水，故本方法中采用純水作為提取試劑進(jìn)行前處理。

2.3 工作曲線配置

分別取一定量滅多威和滅多威肟標(biāo)準(zhǔn)溶液，利用水稀釋后，得到10 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液。分別取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，利用實(shí)驗(yàn)用水稀釋后，制備滅多威和滅多威肟質(zhì)量濃度為5 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、100 μg/L、500 μg/L、1000 μg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列。待液相色譜穩(wěn)定后，將標(biāo)準(zhǔn)系列溶液由低濃度至高濃度按1.3節(jié)的儀器條件進(jìn)樣，以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中兩種化合物的濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，建立目標(biāo)化合物的校準(zhǔn)曲線。

在上述儀器條件下，滅多威和滅多威肟在5 μg/L～1 μg/mL濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，其線性回歸方程為：

ρ(滅多威)=149.910A-315.214， 相關(guān)系數(shù)R=0.9999

ρ(滅多威肟)=1258.32A-571.449， 相關(guān)系數(shù)R=0.9999

本方法測(cè)定滅多威和滅多威肟的最低檢出限為0.05 mg/kg。

圖1 滅多威和滅多威肟液相色譜圖Fig.1 Methomyl and Methomyl oxime LC separation

2.4 方法精密度

取不同濃度的樣品按照上述提取方法進(jìn)行平行試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如表2、表3所示。

表2 滅多威方法精密度表(質(zhì)量濃度≈0.05mg/kg)Table 2 Method precision table of Methomyl (consentration≈0.05 mg/kg)

表3 滅多威肟方法精密度表(質(zhì)量濃度≈0.05 mg/kg)Table 3 Method precision table of Methomyl oxime (consentration≈0.05 mg/kg)

取一定質(zhì)量的已知濃度的土壤樣品，加入一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按試驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)試，進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如表4、表5所示。

表4 滅多威回收率結(jié)果表Table 4 Recovery result of Methomyl

表5 滅多威肟回收率結(jié)果表Table 5 Recovery result of Methomyl oxime

由表2～表5可以看出本方法對(duì)于兩種化合物的相對(duì)平行偏差均小于1%，RSD為2.418%和7.382%，回收率均大于85%，平均回收率為96.7%和92.3%，具有良好的方法精密度及回收率，滿足測(cè)試方法要求。

3 結(jié) 論

通過(guò)試驗(yàn)結(jié)果表明，利用pH=7的水作提取劑，水平震蕩 3 h后，取上層清液過(guò)濾，離心過(guò)濾后待進(jìn)樣，采用乙腈和水梯度洗脫作流動(dòng)相，利用反相色譜的方式，在檢測(cè)波長(zhǎng)為232 nm，流速為1.0 mL/min的條件下，可以同時(shí)分離測(cè)定滅多威和滅多威肟?jī)煞N物質(zhì)。該方法檢出限為0.05 mg/kg，精密度及回收率測(cè)試滿足土壤檢測(cè)的方法要求。相較于采用甲醇、乙腈等有機(jī)試劑做提取劑的方法，該方法在保證檢出限在μg/kg級(jí)別的同時(shí)，具有操作方便的特點(diǎn)，適用于大批量的土壤樣品的測(cè)定工作。