超聲omniview技術聯合血清AFP、ApPrx2診斷胎兒神經管缺陷的價值及臨床意義

楊昕宇，葉 茜，郭 江

(四川省達州市中醫結合醫院超聲醫學科，四川 達州 635000)

據統計，我國每年全部新出生人口中，先天性殘疾嬰幼兒占3%左右，其中神經管缺陷(neural tube defect，NTD)最為常見，約1%[1-2]。NTD以腦及腦膜膨出、露腦畸形、顱腦畸形等為主要臨床表現，多數死胎或出生后夭折，存活患兒常伴不同程度身體、精神缺陷，給家庭、社會帶來沉重負擔[3-4]。超聲技術是臨床診斷NTD的首選方法。超聲自由解剖平面(omniview)技術可從任意方向和角度劃線切割容積數據，獲取任何想象平面，是對彎曲或不規則復雜結構研究的最理想的一種方法，評估胎兒腦部發育安全、有效[5]。另研究證實，孕NTD胎兒母體血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)、過氧化物氧化還原酶2(peroxiredoxin-2，ApPrx2)蛋白異常表達，對NTD有一定診斷價值[6-7]。本研究探討超聲omniview技術及血清AFP、ApPrx2診斷胎兒NTD的價值及臨床意義，旨在建立一套快速、簡單、高敏感度和特異度、無創的NTD早期診斷技術。報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年9月—2020年1月在我院接受規律產檢的孕婦3 107例，其中30例胎兒NTD(觀察組)，3 077例非胎兒NTD(對照組)。納入標準：單胎妊娠；孕14～25周；活胎、宮內孕；孕婦及家屬知情同意。排除標準：合并內外科嚴重疾病；心肺功能嚴重損傷；合并血液系統疾?。粐乐馗腥炯捌髻|性病變。

本研究經醫院倫理委員會批準。

1.2方法 ①超聲omniview技術：采用GE Voluson E8彩色多普勒超聲診斷儀和RAB 4～8 MHz三維容積探頭，先啟動二維模式，再選擇3D/4D條件用VCI技術采集胎兒腦部容積數據，對容積數據進行omniview成像。若懷疑或查出胎兒有NTD，根據需要調整容積數據，采用折線、直線、軌跡方式描記胎兒腦部復雜結構，獲取需要觀察的平面。由兩名經驗豐富醫師在雙盲下進行診斷，取兩者的一致結果作為最終結果，當意見不一致時，結合第三者意見確定最終結果。②血清AFP、ApPrx2：入組24 h內取空腹靜脈血5 mL，離心(3 000 r/min，5 min，離心半徑5 cm)，取血清，采用羅氏2010型全自動電化學發光儀測定AFP；采用雙向凝膠電泳及染色基礎上的定量方法測定ApPrx2 mRNA。

1.3觀察指標 ①臨床隨訪結果與超聲omniview技術檢出情況。②2組一般資料。③兩組孕婦血清AFP、ApPrx2 mRNA水平。④胎兒NTD影響因素的Logistic回歸方程分析。⑤血清AFP、ApPrx2 mRNA診斷胎兒NTD的ROC。

1.4統計學方法 應用SPSS 22.0統計軟件分析數據。計量資料比較采用獨立樣本t檢驗；影響因素采用Logistic回歸分析；診斷價值采用受試者工作特征(receiver operating characteristic curve，ROC)曲線，獲取曲線下面積(area under curve,AUC)、置信區間、敏感度、特異度及cut-off值，聯合預測實施Logistic二元回歸擬合，返回預測概率logit(p)，將其作為獨立檢驗變量。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1臨床隨訪結果與超聲omniview技術檢出情況 3 107例孕婦，經引產或分娩確診胎兒NTD 30例，包括無腦畸形4例，腦及腦膜膨出9例，腦積水6例，脊柱裂11例；非胎兒NTD 3 077例，包括心臟畸形6例，健康胎兒3 071例。

超聲omniview技術檢出胎兒NTD27例，包括無腦畸形4例，腦及腦膜膨出9例，腦積水6例，脊柱裂8例；非胎兒神經缺陷3 080例。以臨床隨訪結果為“金標準”，超聲omniview技術診斷胎兒NTD的敏感度為90.00%(27/30)，特異度為100.00%(3 077/3 077)，準確率為99.90%(3 104/3 107)。見表1。

表1 超聲omniview技術檢出胎兒NTD情況Table 1 The detection of fetal NTD by ultrasonic omniview technology (n=3 107)

2.22組一般資料比較 2組年齡、孕周、體重指數、分娩史、月經情況、受精方式、多囊卵巢綜合征(polycystic ovary syndrome，PCOS)、寵物接觸史、孕期發熱、自然流產史、孕期用藥情況比較差異無統計學意義(P>0.05)；觀察組與對照組放射線接觸史比較，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 2組一般資料比較Table 2 Comparison of general data in two groups

2.32組孕婦血清AFP、ApPrx2 mRNA水平 觀察組血清AFP、ApPrx2 mRNA較對照組顯著升高，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 兩組孕婦血清AFP、ApPrx2 mRNA水平比較Table 3 Comparison of serum AFP and ApPrx2 mRNA levels of pregnant women in two groups

2.4胎兒NTD影響因素的Logistic回歸方程分析 以胎兒NTD與否為因變量(無=0，有=1)納入超聲omniview診斷結果(正常=0，異常=1)、放射線接觸史(無=0，有=1)、血清AFP、ApPrx2 mRNA作為自變量，其中血清AFP、ApPrx2 mRNA為連續變量，為便于數據統計和結果解讀，參考兩者均值進行分層，將血清AFP(<103.96 μg/L=1，≥103.96 1 μg/L=2)、ApPrx2 mRNA(<1.03=1，≥1.03=2)轉化為二分類變量；應用逐步回歸策略，結果顯示，超聲omniview結果異常者胎兒NTD的風險可能是正常者的4.230倍，有放射線接觸史者胎兒NTD的風險可能是無接觸史者的2.897倍，AFP≥103.96 μg/L者胎兒NTD的風險可能是<103.96 μg/L者的2.148倍，ApPrx2 mRNA≥1.03者胎兒NTD的風險可能<1.03者的1.731倍(P<0.05)。見表4。

表4 胎兒NTD影響因素的Logistic回歸方程分析Table 4 Logistic regression equation analysis of factors affecting fetal NTD

2.5血清AFP、ApPrx2 mRNA診斷胎兒 NTD的ROC以觀察組為陽性樣本，以對照組為陰性樣本，繪制血清AFP、ApPrx2 mRNA診斷胎兒神經管缺陷的ROC，結果顯示，血清AFP診斷胎兒神經管缺陷的AUC是0.863(95%CI：0.821～0.898)，截斷值>167.74 μg/L，敏感度為73.33%，特異度為85.99%(P<0.05)；血清ApPrx2 mRNA診斷胎兒神經管缺陷的AUC是0.900(95%CI：0.863～0.930)，截斷值>1.79，敏感度為70.00%，特異度為93.49%(P<0.05)，見圖1。

圖1 血清AFP、ApPrx2 mRNA診斷的ROC

3 討 論

NTD是最常見胎兒畸形，約占所有畸形的46%，其中僅20%左右病例與基因突變、染色體畸形、攝入致畸藥物、母親糖尿病史有關，多數病例確切病因尚不清楚[8-9]。目前，減少NTD發生的有效方法就是早期產前診斷，及時終止妊娠[10]。故尋找一種準確、安全、快速的產前診斷胎兒NTD的方法具有重要意義。

目前，采用無創傷非侵入性手段對胎兒NTD進行廣泛產前診斷，已成為醫學界新的研究方向[11]。超聲Omniview技術是不同于三維渲染模式、三維容積斷層技術等其他僅定角度、定平面切割容積信息的三維技術，其與容積對比成像(Volume contrast imaging，VCI)這種優質的后處理技術聯合，可快速、簡單地獲取任意平面的優質三維重構圖像[12]。Omniview技術屬較前沿的超聲診斷技術，現階段其主要涉及產科及婦科超聲診斷方面，如胎兒顱腦、胎兒面部畸形、胎兒先天性心臟病、子宮與附件疾病、節育器異位等，可彌補其他三維超聲技術在不規則、復雜結構器官診斷的不足[13-14]。Omniview技術可采用折線、曲線、直線和任意平面或角度的軌跡等方式描記NTD胎兒腦部復雜結構，獲取任何想要觀察的平面，更好地對胎兒腦部不規則結構成像，顯示骨質缺損部位，尤其細微缺損，并可更清晰顯示自然脊柱弧狀結構[15]。本研究數據顯示，以臨床隨訪結果為“金標準”，超聲omniview技術診斷胎兒NTD出現3例漏診，診斷敏感度為90.00%(27/30)，特異度為100.00%(3 077/3 077)，準確率為99.90%(3 104/3 107)。Omniview技術主要通過形態變化來判定胎兒有無畸形，而胎兒羊水量、體位等均可對顯像、診斷產生直接影響，且部分染色體基因遺傳所致NTD可能不會引起胎兒形態改變，這可能是導致Omniview技術漏診的一個主要原因。羊水量充足的情況下，胎兒活動更加便利，三維超聲成像效果更好，利于NTD篩查[16]。有研究提出，三維超聲觀察胎兒面部結構的最佳時期是孕23～27周，部分羊水量充足的孕婦可提前至孕20周[17]。本研究中，所有孕婦均在孕14～25周進行超聲Omniview技術檢查，部分漏診可能與孕周較小，羊水量較少，胎兒活動少有關。本研究還發現，超聲omniview結果異常者胎兒NTD的風險可能是正常者的4.230倍，亦提示超聲omniview技術對胎兒NTD有較高預測價值。

為提高胎兒NTD的早期診斷準確率，有學者提出了影像學與血清學指標相結合的篩查方案[18]。AFP是與腫瘤相關的胎兒特異糖蛋白，主要由胎兒卵黃囊、肝臟合成，胃腸道與絨毛組織也可合成少量AFP，可經胎盤、胎膜進入母體血液[19-20]。目前，母血AFP水平升高與胎兒NTD的相關性已得到臨床普遍認可，AFP現已成為臨床篩查胎兒NTD的常用血清學標志物[21]。本研究也發現，觀察組胎兒NTD孕婦血清AFP顯著高表達，是AFP發生的影響因素。探求NTD的特異性蛋白質標記物一直是NTD研究領域的熱點。林瑞蘭等[22]對NTD胎兒和正常胎兒的孕母血清進行差異蛋白質組學研究，發現，PRDX2代表的ApPrx2蛋白連接度大，可能是維持整個系統的關鍵蛋白。在此基礎上，本研究發現，觀察組血清ApPrx2 mRNA較對照組顯著升高，且Logistic回歸方程分析顯示，ApPrx2 mRNA≥1.03者胎兒NTD的風險可能<1.03者的1.731倍，均提示ApPrx2蛋白可能與NTD形成有關。但其具體機制尚不清楚。另外，血清AFP、ApPrx2 mRNA診斷胎兒NTD的AUC分別為0.863、0.900，診斷價值較高。因此，omniview技術聯合血清AFP、ApPrx2診斷胎兒NTD，有望提高診斷價值。

綜上可知，超聲omniview技術、血清AFP、ApPrx2 mRNA均對胎兒NTD有一定診斷價值，三者聯合有望提高診斷效能，對提升出生人口質量具有重要價值。