原發(fā)性干燥綜合征自身抗體譜陽性率比較及ANA、Ro60、SSB、Ro52及唇腺活檢聯(lián)合檢測的意義

陳曉丹，謝澤賢，李情操

干燥綜合征（SS）是一類以淋巴細胞浸潤外分泌腺為特征的慢性自身免疫性疾病，本病女性多見，男女比為1∶9～1∶20，在臨床上可以分為原發(fā)性、繼發(fā)性SS[1]。SS可累及血液系統(tǒng)、肺臟、肝臟等重要內(nèi)臟系統(tǒng)，主要臨床表現(xiàn)為口干眼干、齲齒、腎小管酸中毒、關(guān)節(jié)疼痛、腮腺腫大、皮疹及雷諾現(xiàn)象等[2-3]。SS發(fā)病機制比較復(fù)雜，目前認為主要是受基因易感性、環(huán)境刺激等影響引起機體細胞免疫及體液免疫發(fā)生異常反應(yīng)[4]。本研究回顧性分析原發(fā)性SS的患者的臨床資料，探討ANA、各項自身抗體及唇腺活檢在檢測SS中的應(yīng)用，擬為臨床提供相關(guān)數(shù)據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集寧波市醫(yī)療中心李惠利醫(yī)院2019年1月至2021年8月收治的原發(fā)性SS患者105例，均符合2002年SS國際分類（診斷）標準[5]。其中男10例，女95例；年齡29～86歲，平均（58.2±11.8）歲。同時選擇同期健康體檢者110例，其中男14例，女96例；年齡30～85歲，平均（52.1±12.4）歲。兩組一般資料差異無統(tǒng)計學意義（＞0.05）。

1.2 方法 空腹采集兩組肘靜脈血2～3ml，3500r/min離心10min，分離血清，立即檢測或－80℃保存。采用間接免疫熒光法（IIF）檢測抗核抗體，使用德國歐蒙試劑盒，嚴格按照說明書進行操作，血清起始稀釋度為1∶100，同時檢測1∶320、1∶1 000、1∶3 200，使用歐蒙EUROStarIII增強型熒光顯微鏡進行觀察，當血清稀釋度達1∶320或者更高時判定為陽性。采用磁微粒化學發(fā)光法檢測抗核抗體靶抗原，使用科斯邁SMART 6500全自動化學發(fā)光測定儀配合浩歐博試劑盒進行檢測，嚴格按照說明書進行操作，大于參考范圍0～20RU/ml即為陽性。由臨床醫(yī)生進行唇部小唾液腺采樣，由擅長灶性淋巴細胞浸潤和灶性指數(shù)計數(shù)的病理科醫(yī)生依照Daniels等的方案進行評分，唇腺灶性淋巴細胞浸潤，并且灶性指數(shù)≥1個灶/4 mm2即為陽性[6]。

1.3 統(tǒng)計方法 采用SPSS21.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計數(shù)資料2檢驗。＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組ANA、自身抗體陽性率比較SS組ANA檢出率高于健康組（＜0.05）。SS組自身抗體Ro60、SSB、Ro52、CENP-B、M2及nRNP/Sm的陽性率均高于健康組（均＜0.05），見表1。

表1 兩組ANA、自身抗體陽性率比較 例（%）

2.2 ANA、自身抗體聯(lián)合檢測檢出率比較 ANA+Ro60、ANA+SSB、ANA+Ro52、ANA+唇腺活檢、ANA+Ro60+唇腺活檢、ANA+Ro60+SSB+唇腺活檢的陽性率分別為89.5%、84.8%、88.6%、93.3%、98.1%、100%。見表2。

表2 ANA、自身抗體聯(lián)合檢測陽性率比較

3 討論

SS是一類好發(fā)于絕經(jīng)期之后或30～40歲女性的自身免疫性疾病，其發(fā)病率為0.3～0.4%。除了表現(xiàn)為口、眼干燥外，還可以影響腎臟、肺臟、神經(jīng)系統(tǒng)及消化系統(tǒng)等[7]。SS炎癥的始動因素是上皮細胞，當維持上皮細胞極性的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)或者位置發(fā)生改變時，炎癥被啟動[8-9]。原發(fā)性SS可能由于免疫功能紊亂和異常從而產(chǎn)生多種自身抗體，導致造血系統(tǒng)的功能受到影響，表現(xiàn)為血細胞分析參數(shù)紅細胞（Hb）、白細胞（WBC）、血小板（PLT）明顯減少[10]。有研究表明，對于血液系統(tǒng)的變化，單系統(tǒng)受累比較多見，占13.56%～33.33%，兩系或三系同時受累占6.78%～10.50%[11]。

間接免疫熒光法對ANA的檢測有重要價值，對自身免疫性疾病有輔助診斷價值。ANA存在于細胞核、細胞漿、細胞骨架以及細胞分裂周期中，不同的自身免疫性疾病擁有不同的抗核抗體譜[12]。ANA是臨床應(yīng)用最多的自身免疫疾病標志物，當ANA滴度＞1∶320時，對多種自身免疫性疾病的診斷有著重要的意義[13]，因此本次研究將ANA陽性的界定標準定為滴度≥1∶320，將滴度為1∶100的患者界定為陰性。自身抗體譜成員眾多，其中抗SSA、抗SSB被認為對SS診斷意義重大，同時在其他自身免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡，多肌炎、皮肌炎、硬皮病等也可出現(xiàn)[14]。SSA抗原是一個小核糖核蛋白.其中最重要的是52 kD（Ro52）和60 kD（Ro60）兩種蛋白；SSB抗原則是一個分子質(zhì)量為48 kD的磷酸化蛋白[13]。

本研究回顧性分析了105例原發(fā)性SS患者的ANA及各項自身抗體，與110例健康人群相比，SS患者ANA、Ro60、SSB、Ro-52、CENP-B、M2及nRNP/Sm的陽性率均高于健康人群（均＜0.05）；自身抗體譜以Ro-52、SSB及Ro60的陽性率最高，分別為65.71%、62.86%、28.57%。唇腺組織活檢可以提高原發(fā)性SS的陽性率[15]。本研究唇腺活檢陽性率為87.62%（92/105），高于ANA及自身抗體，與文獻[16]吻合。但有文獻報道由于唇腺增齡性改變與SS唇腺病理學變化相似、唇腺活檢病理分級標準不一致以及患者自身情況，如糖皮質(zhì)激素的使用改變唇腺病理表現(xiàn)等原因，造成唇腺活檢的靈敏度不高[17]。本研究聯(lián)合比較ANA+Ro60、ANA+SSB、ANA+Ro52、ANA+唇腺活檢、ANA+Ro60+唇腺活檢、ANA+Ro60+SSB+唇腺活檢的陽性率，發(fā)現(xiàn)ANA+Ro60+SSB+唇腺活檢的陽性率最高，達100%。

綜上所述，自身抗體Ro60、SSB、Ro52在原發(fā)性SS患者中檢出率較高，可與ANA聯(lián)合作為原發(fā)性SS的普查方式，聯(lián)合ANA+自身抗體+唇腺活檢的方式，可以提高疾病檢出率，減少漏診。