男性精液參數(shù)與胚胎染色體異常性流產(chǎn)的關(guān)系分析

張艷普，曹文麗，夏邦世，葉飛君，方建偉，蔣雁，貝佳露

精液分析是目前判斷男性生育力最基本和最主要的檢查方法，精液參數(shù)對(duì)診治男性不育有重要臨床意義[1]。影響男性精液參數(shù)的因素眾多，常見的如酒精、煙草、農(nóng)藥甚至季節(jié)均會(huì)對(duì)其質(zhì)量產(chǎn)生影響[2]，目前較多研究主要從精液質(zhì)量影響因素入手，較少關(guān)于精液參數(shù)與胚胎染色體異常性流產(chǎn)關(guān)系的研究。胚胎染色體異常是第一代試管嬰兒（IVF）常見的流產(chǎn)誘發(fā)因素[3]，有相關(guān)研究數(shù)據(jù)顯示，胚胎染色體異常的流產(chǎn)率為10%～20%，通常發(fā)生在孕早期[4]。本研究旨在探討男性精液參數(shù)與胚胎染色體異常性流產(chǎn)的相關(guān)性，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2016年1月至2019年6月浙江省舟山市婦女兒童醫(yī)院收治的行常規(guī)IVF治療的不育男性患者249例，納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）妊娠障礙原因單純?yōu)槟蟹缴佟⑷跫盎尉影Y，男方精子濃度和活力及頂體酶活性符合常規(guī)IVF要求；（2）夫妻雙方年齡22～35歲；（3）雙方無吸煙、酗酒及其他不良生活習(xí)慣；（4）臨床資料完整無損。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）明顯外生殖器及輸精管異常者；（2）生殖系統(tǒng)感染者；（3）母體因素所致的流產(chǎn)者；（4）認(rèn)知功能障礙及其他精神疾病者。

按妊娠結(jié)局分為正常妊娠（A組，134例）和胚胎染色體異常性流產(chǎn)（B組，115例），兩組年齡、配偶年齡、配偶基礎(chǔ)卵泡生成素（FSH）值、配偶高促性腺激素（Gn）時(shí)間及配偶體質(zhì)量指數(shù)（BMI）差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），有可比性，見表1。

表1 兩組一般資料比較

1.2 方法（1）男性患者禁欲2～7 d，采用手淫法收集精液標(biāo)本，液化后進(jìn)行常規(guī)檢查，嚴(yán)格按照《WHO人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊》（第5版）執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)[5]。所有精液樣本采用西班牙Sperm Class Analyzer（SCA）系統(tǒng)進(jìn)行濃度和活力計(jì)數(shù)，形態(tài)學(xué)評(píng)估精子涂片采用改良巴氏染色法，精子活率采用苯胺黑染色法。DNA碎片、核蛋白組型及頂體酶活性等采用商品試劑盒進(jìn)行檢測。（2）女方使用長方案促排卵，在前次月經(jīng)周期的第22天左右開始注射促性腺激素釋放激素激動(dòng)劑，之后使用促排卵藥物，定期監(jiān)測卵泡及雌激素水平，B超引導(dǎo)下經(jīng)陰道取卵。（3）體外培養(yǎng)及受精后進(jìn)行胚胎移植。受精后18 h觀察原核，出現(xiàn)2個(gè)原核和2個(gè)極體為正常受精，反之則受精失敗，選擇優(yōu)質(zhì)胚胎進(jìn)行移植，移植后4～5周超聲檢查見胎心搏動(dòng)為臨床妊娠，常規(guī)給予女方地屈孕酮等藥物口服。監(jiān)測妊娠情況。

1.3 觀察指標(biāo)（1）記錄體外培養(yǎng)及受精后兩組受精率、卵裂率、可利用胚胎率及優(yōu)質(zhì)胚胎率。（2）比較兩組男性處理前精液參數(shù)，包括精子濃度、精子活率、精子活力、精子正常形態(tài)率、頂體酶活性、精子-透明質(zhì)酸結(jié)核率、DNA碎片率及核蛋白組異常型。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法 數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用2檢驗(yàn)。＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 體外培養(yǎng)及受精數(shù)據(jù)比較 兩組受精率及卵裂率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均＞0.05），B組可利用胚胎率和優(yōu)質(zhì)胚胎率均低于A組（均＜0.05），見表2。

表2 兩組體外培養(yǎng)及受精數(shù)據(jù)比較 例（%）

2.2 男性處理前精液參數(shù)比較 B組男性精子濃度、精子活率、精子正常形態(tài)率、頂體酶活性和精子-透明質(zhì)酸結(jié)合率均低于A組，DNA碎片率、核蛋白組異常型均高于A組（均＜0.05），兩組男性精子活力差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＞0.05），見表3。

表3 兩組男性處理前精液參數(shù)比較

3 討論

臨床較多生育障礙影響因素研究，主要集中在女性方面，如解剖學(xué)異常、內(nèi)分泌紊亂及免疫因素等[6]。隨醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，越來越多學(xué)者關(guān)注到男性因素在異常流產(chǎn)中的影響因素。精液參數(shù)異常與較低的受精能力和潛在的DNA異常有關(guān)，特別是在單純形態(tài)畸形精子癥中。研究顯示[7]，精子異常形態(tài)率與自然流產(chǎn)、胚胎停止發(fā)育及胚胎畸形有密切關(guān)系，并指出畸形率高為影響妊娠的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。精液參數(shù)的檢測有助于預(yù)測妊娠質(zhì)量，但目前該方面的研究暫缺乏足夠的臨床依據(jù)。

劉金皓等[8]通過對(duì)比不同男性精液質(zhì)量對(duì)妊娠結(jié)局的影響，結(jié)果顯示精液參數(shù)正常且穩(wěn)定的男性，妊娠結(jié)局較為理想，其參數(shù)與受精率、優(yōu)胚率有密切關(guān)系。本研究結(jié)果顯示，兩組受精率及卵裂率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），B組可利用胚胎率和優(yōu)質(zhì)胚胎率均低于A組（均P＜0.05）。B組男性精子濃度、精子活率、精子正常形態(tài)率、頂體酶活性和精子-透明質(zhì)酸結(jié)合率均低于A組，DNA碎片率、核蛋白組異常型均高于A組（均P＜0.05），兩組男性精子活力差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。說明男性精液參數(shù)一定程度上影響到妊娠質(zhì)量，且與胚胎染色體異常性流產(chǎn)關(guān)系密切。劉闖等[9]研究顯示，精子畸形率越高，對(duì)受精率和活產(chǎn)率影響越顯著，因?yàn)榫有纬蛇^程中魚精蛋白PRM1/PRM2的比例發(fā)生改變，使精子形態(tài)及其他精液參數(shù)發(fā)生不良變化，影響受精過程和胚胎質(zhì)量。研究表示[10]，精子DNA碎片的增加對(duì)輔助生殖結(jié)局會(huì)產(chǎn)生不良影響，導(dǎo)致胚胎質(zhì)量下降，染色體異常性流產(chǎn)率增加。本研究結(jié)果提示臨床檢測男性精液參數(shù)對(duì)妊娠質(zhì)量的預(yù)測有一定的指導(dǎo)作用，對(duì)部分精子活率低、精子正常形態(tài)占比小的男性需進(jìn)行一定程度上的治療來提高精子質(zhì)量，以提升妊娠成功率和優(yōu)良率。

本研究發(fā)現(xiàn)，異常形態(tài)中以精子頂體功能偏低對(duì)受精率和優(yōu)質(zhì)胚胎率影響最為顯著，分析其原因在于頂體部位含有多種受精作用必須的水解酶，其完整性直接關(guān)系到精子能否通過卵外各層膜進(jìn)入卵內(nèi)完成受精[11]。且已有研究證實(shí)，精子頂體酶活性與精液濃度、正常形態(tài)密切相關(guān)，其減壓可作為評(píng)估精液質(zhì)量的可靠指標(biāo)[12]，表示此參數(shù)的異常同樣減少了優(yōu)質(zhì)胚胎率。提示臨床IVF治療時(shí)，對(duì)男性精液參數(shù)中精子頂體酶活性、完整性等功能性檢查有必要性，輔助評(píng)估其生育能力，以減少染色體異常性流產(chǎn)發(fā)生。

綜上所述，男性精液參數(shù)與胚胎染色體異常性流產(chǎn)關(guān)系密切，對(duì)預(yù)測妊娠結(jié)局有指導(dǎo)意義。