SLIT/ROBO信號通路在腫瘤、宮頸癌中作用的研究進(jìn)展▲

陸 珊 胡曉霞 劉 珍

(1 右江民族醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)院，廣西百色市 533000，電子郵箱：673869247@qq.com；2 廣西壯族自治區(qū)人民醫(yī)院婦科，南寧市 530021)

【提要】 人類ROBO與其配體SLIT家族的成員是腫瘤發(fā)生發(fā)展中的重要信號分子。近年來研究顯示，SLIT/ROBO可作為促癌或抑癌因子參與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移等生物調(diào)控過程。SLIT/ROBO在宮頸癌組織中也有異常表達(dá)，且與啟動(dòng)子甲基化相關(guān)，具有促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞凋亡的作用。本文就SLIT/ROBO信號通路在腫瘤、宮頸癌中作用的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

宮頸癌是女性最常見的生殖器官癌癥之一。據(jù)統(tǒng)計(jì)，宮頸癌的發(fā)病率和死亡率均在女性腫瘤中排名第四[1]。因此，研究宮頸癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制，尋找其輔助診斷的焦點(diǎn)及治療的潛在靶點(diǎn)，對于提高患者生存率具有重要意義。SLITs(分泌型糖蛋白)是一個(gè)分泌蛋白家族，通過Roundabout(ROBO)受體發(fā)出信號，在發(fā)育過程中介導(dǎo)細(xì)胞與其環(huán)境之間的相互作用[2]。研究發(fā)現(xiàn)，SLIT/ROBO信號通路在惡性腫瘤細(xì)胞的生長中具有促進(jìn)或抑制作用,在宮頸癌組織中也有異常表達(dá)，且與啟動(dòng)子甲基化相關(guān)，具有促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞凋亡的作用[3-6]。本文就SLIT/ ROBO信號通路的組成與功能、與腫瘤的關(guān)系、在宮頸癌中的作用進(jìn)行綜述。

1 SLIT/ROBO信號通路的組成與功能

SLITs包括SLIT1、SLIT2和SLIT3，其基因分別位于人類染色體10q24.1，4p15.3，5q34-35.1；ROBO受體包括ROBO1、ROBO2、ROBO3和ROBO4，ROBO1和ROBO2基因位于人類染色體3p12.3，ROBO3和ROBO4基因位于人類染色體11q24.2。ROBO受體的下游信號分子主要是細(xì)胞質(zhì)激酶以及與肌動(dòng)蛋白聚合、微管細(xì)胞骨架重組相關(guān)的調(diào)節(jié)分子，包括Hakai、Myo9b等，它們都有助于細(xì)胞的遷移[7]。蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)研究表明，SLIT蛋白通過第二個(gè)富含亮氨酸類受體激酶結(jié)構(gòu)域與ROBO1的第一個(gè)免疫球蛋白結(jié)合來發(fā)揮調(diào)節(jié)血管生成，促進(jìn)炎性細(xì)胞趨化、腫瘤細(xì)胞遷移和轉(zhuǎn)移等作用[8]。ROBO2的細(xì)胞外免疫球蛋白4是二聚化結(jié)構(gòu)域，可促進(jìn)酶效應(yīng)因子的募集和激活，從而促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)[9]。ROBO3和ROBO4是兩個(gè)獨(dú)特的受體，具有很大的不確定性，尚不清楚其如何與SLIT配體結(jié)合來調(diào)節(jié)細(xì)胞活性[8，10-13]。SLIT與ROBO相互作用后，通過招募不同的銜接分子或蛋白質(zhì)引發(fā)信號通路級聯(lián)反應(yīng)，在肌肉細(xì)胞形成、細(xì)胞遷移、干細(xì)胞生長、血管生成、器官發(fā)育和腫瘤形成中發(fā)揮重要作用[7]。

2 SLIT/ROBO信號通路與腫瘤的關(guān)系

2.1 SLIT/ROBO信號通路具有抑制腫瘤作用 Kong等[3]發(fā)現(xiàn)，與鄰近的非腫瘤組織相比，肺癌組織中SLIT2的mRNA表達(dá)水平較低或無法檢測，且SLIT2過表達(dá)顯著抑制了肺癌細(xì)胞的遷移及裸鼠異種移植腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移。Huang等[14]發(fā)現(xiàn)，與鄰近的非癌組織相比，結(jié)直腸癌組織中SLIT2的mRNA表達(dá)水平降低,而ROBO1 mRNA表達(dá)水平?jīng)]有明顯差異；同時(shí)，他們觀察到結(jié)直腸癌細(xì)胞中SLIT2基因啟動(dòng)子高度甲基化，并發(fā)現(xiàn)SLIT2能以ROBO1依賴性方式抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞遷移。Bauer等[15]發(fā)現(xiàn)，SLIT2在口腔鱗癌組織中呈低表達(dá),且證明了SLIT2對表達(dá)P-鈣粘蛋白的口腔鱗癌細(xì)胞的抑癌作用是通過調(diào)節(jié)ROBO3的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。還有研究顯示，SLIT/ROBO信號通路在食管鱗癌[16]、乳腺癌[17]、卵巢癌[18]等腫瘤組織中表達(dá)下調(diào)，且SLIT/ROBO信號通路可作為抑癌基因抑制腫瘤的發(fā)生發(fā)展。由此看來，SLIT/ROBO信號通路在某些腫瘤組織及細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)并有抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展的作用。

2.2 SLIT/ROBO信號通路具有促腫瘤作用 Ma等[4]發(fā)現(xiàn)，與非復(fù)發(fā)子宮內(nèi)膜癌患者相比，復(fù)發(fā)患者腫瘤組織中SLIT2和ROBOl的表達(dá)升高，這不僅可促進(jìn)腫瘤血管生成，還與子宮內(nèi)膜癌的預(yù)后因素如國際婦產(chǎn)科學(xué)聯(lián)合會分期、分化程度、肌層浸潤、血管浸潤、淋巴結(jié)受累、組織學(xué)類型密切相關(guān)，因此認(rèn)為SLIT2/ROBOl信號通路可能在腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)中發(fā)揮作用。Zhao等[19]發(fā)現(xiàn)，骨肉瘤組織中SLIT2和ROBO1的表達(dá)上調(diào)，并且ROBO1的高表達(dá)與總體存活率降低相關(guān)；體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明，SLIT2/ROBO1信號通路可促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞增殖，抑制其凋亡。Pircher等[20]發(fā)現(xiàn)，與良性前列腺組織相比，ROBO4及其配體SLIT2蛋白在前列腺癌組織中的表達(dá)明顯升高，ROBO4和SLIT2高表達(dá)與前列腺癌的高級別病變有關(guān)，ROBO4過表達(dá)可促進(jìn)前列腺癌細(xì)胞的增殖能力。研究顯示，SLIT/ROBO信號通路在胃癌[21]、膀胱癌[22]等腫瘤組織中的表達(dá)上調(diào)，且可作為癌基因促進(jìn)腫瘤的發(fā)生發(fā)展。綜上，SLIT/ROBO信號通路在某些腫瘤組織和細(xì)胞中的表達(dá)上調(diào)，并表現(xiàn)為促腫瘤生長的作用。

3 SLIT/ROBO信號通路與宮頸癌的關(guān)系

3.1 宮頸癌中SLIT/ROBO信號通路的表達(dá)情況 有研究顯示，SLIT2和ROBO1/2在宮頸癌組織及癌前病變組織中表達(dá)降低，并存在不同程度的缺失[5]。Narayan等[23]發(fā)現(xiàn)，SLIT和ROBO mRNA在宮頸癌組織和宮頸癌細(xì)胞中不表達(dá)或低表達(dá)。Singh等[24]發(fā)現(xiàn)，在正常宮頸組織、宮頸癌前病變組織、宮頸癌組織中，SLIT2 mRNA的表達(dá)水平依次降低；與正常宮頸組織相比，SLIT2蛋白在宮頸病變組織中表達(dá)降低。由此可見，宮頸癌組織中SLIT/ROBO呈低表達(dá)狀態(tài)。

3.2 宮頸癌中SLIT/ROBO信號通路表達(dá)與甲基化的關(guān)系 Narayan等[23]檢測了浸潤性宮頸癌組織及癌前病變組織中SLIT/ROBO基因的啟動(dòng)子甲基化情況,發(fā)現(xiàn)高頻率的啟動(dòng)子甲基化導(dǎo)致侵襲性宮頸癌組織中SLIT/ROBO基因表達(dá)下調(diào)；通過對宮頸癌前病變組織的分析，進(jìn)一步證明SLIT/ROBO通路的啟動(dòng)子高甲基化發(fā)生在腫瘤進(jìn)展的早期；SLIT2基因的甲基化頻率在正常宮頸組織、宮頸癌前病變組織、宮頸癌組織樣本中依次增高，提示SLIT2基因的甲基化可能在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。Mitra等[5]發(fā)現(xiàn)，在宮頸上皮內(nèi)瘤變組織、早期浸潤性宮頸癌組織中，SLIT/ROBO表達(dá)下調(diào)且存在啟動(dòng)子甲基化；通過對宮頸癌SiHa細(xì)胞和HeLa細(xì)胞進(jìn)行去甲基化實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證了啟動(dòng)子甲基化是宮頸癌中SLIT2和ROBO1/2的失活機(jī)制之一。在Narayan等[23]發(fā)現(xiàn)浸潤性宮頸癌中SLIT/ROBO的表達(dá)下調(diào)、啟動(dòng)子區(qū)域存在高度甲基化基礎(chǔ)上，袁立芹等[25]發(fā)現(xiàn)，高級別病變宮頸組織中SLIT2基因甲基化水平明顯高于低級別病變和正常宮頸組織，且檢測SLIT2基因的甲基化水平能夠有效診斷高級別宮頸病變。上述研究說明，SLIT/ROBO信號通路在宮頸癌中的低表達(dá)與其甲基化相關(guān)。

3.3 SLIT/ROBO信號通路與宮頸癌細(xì)胞功能 SLIT/ROBO信號通路具有促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞凋亡的作用。黃小莉等[6]發(fā)現(xiàn)，SLIT2/ROBO1 mRNA及蛋白的表達(dá)水平在正常宮頸上皮組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變組織、宮頸鱗癌組織中呈逐漸下降的趨勢；過表達(dá)ROBO1或沉默SLIT2后的宮頸癌HeLa細(xì)胞在體外凋亡能力較未經(jīng)處理的宮頸癌HeLa細(xì)胞明顯升高或降低，提示SLIT2/ROBO1能促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞凋亡。目前，SLIT/ROBO信號通路對宮頸癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移的作用研究較少，還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 語

SLIT/ROBO信號通路在不同腫瘤組織中表達(dá)情況不一致，且對惡性腫瘤細(xì)胞既有促進(jìn)作用又有抑制作用。SLIT/ROBO信號通路在宮頸癌組織中呈低表達(dá)，其低表達(dá)與異常甲基化有關(guān)；SLIT/ROBO能促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞凋亡。目前，SLIT/ROBO信號通路在宮頸癌中的研究較少，對宮頸癌細(xì)胞增殖、侵襲、遷移的作用有待研究。隨著對SLIT/ROBO的進(jìn)一步研究，SLIT/ROBO信號通路有可能成為預(yù)防和治療宮頸癌的潛在靶標(biāo)。