血管內(nèi)皮生長因子在急性髓系白血病患者中的表達(dá)水平分析

馮硯平 王 楠 王偉佳 廣東省中山市人民醫(yī)院 528400

白血病是一類造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病，是因患者的克隆性干細(xì)胞繁殖、分裂及凋亡通路受到阻礙，進(jìn)而導(dǎo)致大部分惡性繁殖的白血病造血干細(xì)胞會集于患者骨髓及各種造血系統(tǒng)中[1-2]。急性髓細(xì)胞性白血病為白血病細(xì)胞分型中的一個(gè)種類，AML主要根據(jù)骨髓造血干細(xì)胞嚴(yán)重繁殖，其特點(diǎn)為骨髓和外周血中的原始細(xì)胞與稚嫩細(xì)胞異常增殖[3-4]。臨床表現(xiàn)為不同程度的貧血、口腔出血、胸悶痛、感染、乏力、發(fā)熱伴咳嗽、骨骼疼痛等。近幾年來，流行病學(xué)研究表明，在白血病系列中AML的患病率約為30%，0～6歲的幼小兒童群體也是高發(fā)人群，而且患病后惡性程度高于其他白血病類型，主要表現(xiàn)為存活期(5年左右)比其他類型的白血病患者低[5]。目前，治療AML的難度仍然極大，學(xué)者們對AML的重視度也越來越高，關(guān)于AML的發(fā)病機(jī)制也在持續(xù)的深入研究。大量研究證實(shí)，人體機(jī)體血管再生能力及細(xì)胞凋亡能力與AML患病具有相關(guān)性[6-7]。而VEGF為擁有象征性的可控制機(jī)體血管新生與細(xì)胞凋亡的蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物，其表達(dá)水平變化可體現(xiàn)患者機(jī)體內(nèi)的新生血管能力與細(xì)胞凋亡能力。因此，本文篩選我院收治的197例AML患者為觀察對象，分析VEGF在AML患者中的水平表達(dá)情況，期望能給白血病的發(fā)病機(jī)制提供新的調(diào)查方向，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 篩選本院在2017年7月—2019年11月期間收治的197例AML患者作為研究組，男93例，女104例；年齡5～87歲，平均年齡(48.77±19.10)歲；急性白血病的FAB分型：M1型33例，M2型89例，M3型42例，M4型24例，M5型9例。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)根據(jù)急性髓系白血病治療的專家共識(第一部分)的判斷標(biāo)準(zhǔn)及臨床檢查診斷為AML者；(2)患者及家屬知情同意并簽署知情同意書；(3)經(jīng)本院倫理委員會批準(zhǔn)同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)檢查判斷不是AML者；(2)患者為孕婦或正處于乳期婦女；(3)合并器質(zhì)性疾病、惡性腫瘤疾病者；(4)正處于有關(guān)藥物治療者。同時(shí)另抽取本院行健康體檢的60例受試者為參照組。其中男34例，女26例；年齡12～70歲，平均年齡(48.67±18.33)歲。對比研究組與對照組的一般資料，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 檢測方法 將所有患者進(jìn)行VEGF水平檢測，抽取每例患者的空腹靜脈血大約5ml，然后加入經(jīng)過抗凝劑處理過的抗凝管中混合，使用TG12M型毛細(xì)管血液離心機(jī)(北京亞態(tài)科技有限公司)進(jìn)行離心，轉(zhuǎn)速為3 000r/min，離心10min(半徑為13.5cm)，分離獲得血清后，將患者的血清用ELISA法展開檢測VEGF表達(dá)水平，ELISA檢測試劑盒在上海晶抗生物工程有限公司購買，根據(jù)試劑盒的操作說明進(jìn)行測定血清。研究組根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化治療2個(gè)療程，1個(gè)療程為28d，再次抽取患者的空腹靜脈血進(jìn)行VEGF水平檢測。

1.3 觀察指標(biāo) (1)統(tǒng)計(jì)兩組(研究組、參照組)入院時(shí)VEGF水平，然后進(jìn)行比較。(2)研究組經(jīng)過治療后，根據(jù)療效判斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評估療效，將不同的治療效果分為完全緩解組(n=78)、部分緩解組(n=86)、未緩解組(n=33)。對比三組VEGF水平。

1.4 療效判斷標(biāo)準(zhǔn) 完全緩解組：骨髓象細(xì)胞學(xué)檢查：原顆粒細(xì)胞Ⅰ型與Ⅱ型的總和≤5%，并且紅血球(RBC)與巨核細(xì)胞正常。血常規(guī)檢查：血紅蛋白(HGB)水平在11.0～15.0g/dl之間，血小板水平在(100～300)×109個(gè)/L之間，中性粒細(xì)胞在(1.80～6.30)×109/L之間，并且患者外周血分類不存在白血病細(xì)胞，無侵潤內(nèi)臟器官造成的臨床癥狀和特征，患者可正常生活或靠近正常納入完全緩解組。部分緩解組：原幼稚細(xì)胞于5%～20%之間；或者臨床癥狀、特征及血常規(guī)檢查中有一項(xiàng)未達(dá)到以上要求納入部分緩解組。未緩解組：骨髓象細(xì)胞學(xué)檢查、血常規(guī)檢查、臨床癥狀和特征均未達(dá)到以上標(biāo)準(zhǔn)納入未緩解組。然后對比3組的VEGF水平。

2 結(jié)果

2.1 研究組、參照組治療前的VEGF水平對比 治療前，研究組VEGF水平為(328.79±47.32)pg/ml，明顯高于參照組的(131.11±21.70)pg/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=31.34，P<0.05)。

2.2 治療后研究組不同治療效果的VEGF水平對比 單因素方差分析總體VEGF水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。多重對比分析，研究組治療后，完全緩解組VEGF水平為(169.60±28.11)pg/ml，部分緩解組為(210.28±31.70)pg/ml，未緩解組為(299.81±36.22)pg/ml，三組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=189.55，P<0.05)，而且完全緩解組VEGF水平低于部分緩解組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

急性髓細(xì)胞白血病的惡性程度高于其他類型的白血病，發(fā)病急促，而且病情發(fā)展快速，給臨床治療造成極大的困難，致使學(xué)者們對AML進(jìn)行更深入的調(diào)查研究，其發(fā)病機(jī)制也越來越清晰[8-9]。經(jīng)過對人體的一部分生物標(biāo)志物、生長因子進(jìn)行研究測定，初步了解到AML患者機(jī)體內(nèi)的造血干細(xì)胞異常凋亡的受阻過程，此外，再生血管持續(xù)增生提高了該細(xì)胞的營養(yǎng)供應(yīng)，給其異常增殖帶來了有利條件，進(jìn)而導(dǎo)致患者的造血系統(tǒng)受到損害[9-10]。隨不斷深入研究顯示，AML患者機(jī)體內(nèi)的造血干細(xì)胞異常繁殖與凋亡時(shí)存在各種各樣的生物因子介入[11]。檢測VEGF是醫(yī)院評估AML患者新生血管產(chǎn)生的重要蛋白質(zhì)生物標(biāo)志物。所以，檢測AML患者的蛋白VEGF水平，針對AML的發(fā)病機(jī)制研究及判斷病情、預(yù)后具有重要意義[12]。

本研究通過對AML患者與健康受試者的VEGF水平檢測比較，結(jié)果顯示，研究組的VEGF水平明顯比參照組高，提示造成AML或許和患者機(jī)體內(nèi)的VEGF水平相關(guān)。研究組通過標(biāo)準(zhǔn)化治療2個(gè)周期后，完全緩解組與部分緩解組的VEGF表達(dá)水平明顯低于未緩解組，而且完全緩解組VEGF水平低于部分緩解組，提示AML患者的VEGF表達(dá)水平變化和患者預(yù)后療效具有明顯的相關(guān)性。隨患者的病情改善，VEGF水平隨之下降。分析其原因是由于VEGF為一種具有高度特異性促血管內(nèi)皮生長因子，經(jīng)酪氨酸激酶受體達(dá)到目的，進(jìn)一步提升血管通透性、細(xì)胞外基質(zhì)性、血管內(nèi)皮增生、遷移及血管產(chǎn)生[13]。VEGF表達(dá)水平上升，能夠激發(fā)白血病患者的惡性血液腫瘤細(xì)胞間接分裂加速反應(yīng)，同時(shí)使造血干細(xì)胞進(jìn)一步自我調(diào)節(jié)，給惡性造血干細(xì)胞異常增生持續(xù)提供增生時(shí)需要的營養(yǎng)，進(jìn)而導(dǎo)致AML快速進(jìn)展。依照上述研究成果，提示治療AML患者能夠使用VEGF抑制劑實(shí)施治療，以供廣大AML患者治療研究新方向[14]。

綜上所述，VEGF水平在AML患者中呈顯著性表達(dá)，隨患者的病情得到改善，VEGF水平表達(dá)持續(xù)下降，所以對AML的診斷、預(yù)后療效評價(jià)具有臨床應(yīng)用的意義。