高危型HPV-E6/E7mRNA 檢測在宮頸病變篩查中的臨床價值

姜洪苗

（南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科，江蘇 南京 210000）

宮頸癌（cervical cancer）是臨床中常見的女性惡性腫瘤，發(fā)病率在女性群體中高居第4 位，且發(fā)展中國家的發(fā)病率明顯高于發(fā)達(dá)國家[1]。宮頸癌的發(fā)生與多種因素有關(guān)，其中高危型人乳頭瘤病毒（HRHPV）持續(xù)感染是引發(fā)宮頸癌前病變以及宮頸癌的重要因素。從臨床實踐來看，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了150 多種HPV，可能導(dǎo)致宮頸病變的HPV 高達(dá)40 多種，是當(dāng)前臨床篩查宮頸病變的重要方式之一，能有效降低宮頸癌的發(fā)生，控制疾病發(fā)展，保證患者的生存[2-4]。液基細(xì)胞學(xué)檢測、HPV DNA 檢測是目前臨床篩查宮頸病變的主要方式，但這兩種方法均存在一定的局限性，即特異性較低，且難以預(yù)測患者預(yù)后，限制了其在臨床中的推廣應(yīng)用[5]。本研究主要分析了HR-HPV-E6/E7 mRNA 檢測在宮頸病變篩查中的臨床價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020 年2 月-2021 年2 月南京醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院共80例就診患者作為研究對象，年齡30～65 歲，平均年齡（49.58±7.11）歲。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，患者自愿參與研究，并簽署知情同意書。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①無宮頸癌治療史；②性生活史≥2 年。排除標(biāo)準(zhǔn)：①72 h 內(nèi)陰道灌洗或藥物治療；②接受過抗HPV 藥物治療；③子宮切除。

1.3 方法 所有患者均接受陰道鏡活檢、HPV 分型檢測以及HR-HPV-E6/E7 mRNA 檢測，并以陰道鏡活檢病理結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)。

1.3.1 陰道鏡活檢方法 根據(jù)臨床醫(yī)師的判斷，在可疑病變部位取組織進(jìn)行活檢，必要情況下可采取宮頸搔刮的情況。至少由2 名臨床醫(yī)師對活檢結(jié)果進(jìn)行觀察，結(jié)果包括以下幾種①正常或炎癥；②宮頸上皮內(nèi)瘤變，根據(jù)瘤變的程度，分為低級別鱗狀上皮內(nèi)病變（CIN1）、高級別鱗狀上皮內(nèi)病變（CIN2）、高級別鱗狀上皮不典型增生和原位鱗癌（CIN3）；③宮頸浸潤癌（ICC）。

1.3.2 HPV 檢測方法 通過HPV 專用取樣刷在宮頸處采取相關(guān)標(biāo)本，將標(biāo)本置于保存液中，通過高危型流式點陣熒光分析器檢測HPV 分型。HR-HPV-E6/E7 mRNA 檢測方法如下：通過全自動核酸檢測系統(tǒng)進(jìn)行HR-HPV-E6/E7 mRNA 的定性檢測，檢測過程嚴(yán)格按照操作說明書進(jìn)行。

1.4 觀察指標(biāo) ①分析HPV 檢測結(jié)果；②分析HRHPV-E6/E7 mRNA 檢測結(jié)果；③比較HPV 與HRHPV-E6/E7 mRNA 檢測陽性率；④分析HR-HPV-E6/E7 mRNA 陽性與宮頸病變病理分級的相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 通過SPSS 22.0 統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以（）表示，計數(shù)資料以[n（%）]表示，采用χ2檢驗。通過Spearman 相關(guān)性分析進(jìn)行HR-HPV-E6/E7 mRNA 陽性與宮頸病變病理分級的關(guān)系。以P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV 檢測結(jié)果分析 HPV 檢測顯示陽性44例，占比55.00%；陰性36例，占比45.00%。陽性中正常或炎癥占比低于陰性，CIN1、CIN2 以及CIN3 占比均高于陰性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。陽性與陰性ICC 占比比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 HPV 檢測結(jié)果分析[n（%）]

2.2 HR-HPV-E6/E7 mRNA 檢測結(jié)果分析 HRHPV-E6/E7 mRNA 檢測顯示陽性42例，占比52.50%；陰性38例，占比47.50%。陽性正常或炎癥占比低于陰性，CIN1、CIN2 以及CIN3 均高于陰性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；陽性與陰性ICC 占比比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表2 HR-HPV-E6/E7 mRNA 檢測結(jié)果分析[n（%）]

2.3 HPV 與HR-HPV-E6/E7 mRNA 檢測陽性率比較以陰道鏡活檢病理結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，HPV 陽性率與HR-HPV-E6/E7 mRNA 陽性率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

表3 HPV 與HR-HPV-E6/E7 mRNA 檢測陽性率比較[n（%）]

2.4 HR-HPV-E6/E7 mRNA 陽性與宮頸病變病理分級的關(guān)系 Spearman 相關(guān)性分析顯示，HR-HPVE6/E7 mRNA 陽性與CIN1、CIN2 以及CIN3 呈正相關(guān)（r=0.670、0.510、0.600，P＜0.05）。

3 討論

HP-HPV 會首先感染宿主細(xì)胞，感染后將E6/E7 DNA 整合入細(xì)胞基因組中，在相關(guān)致癌因素的影響下，會生成癌蛋白E6/E7，導(dǎo)致抑癌蛋白活性下降，最終引發(fā)宮頸癌[6，7]。E6/E7 基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯是HR-HPV 感染宮頸后引發(fā)惡性病變的重要過程，因此該基因物質(zhì)也是臨床判斷宮頸癌是否會發(fā)生的主要標(biāo)志物類型[8，9]。

宮頸癌篩查是臨床降低宮頸癌發(fā)病率，保證患者生存的重要途徑，目前以HPV 分型檢測與宮頸細(xì)胞學(xué)檢測為主[10]。HPV 分型檢測雖然靈敏度較高，但女性HPV 感染的發(fā)生率較高，且多數(shù)患者會自動消失，不會引發(fā)宮頸病變，若單純依靠HPV 分型檢測，會增加轉(zhuǎn)診陰道鏡的數(shù)量，導(dǎo)致過度醫(yī)療[11，12]。宮頸細(xì)胞學(xué)檢測能夠?qū)PV 陽性患者進(jìn)行進(jìn)一步的篩查，有利于提高宮頸病變篩查的準(zhǔn)確率，但宮頸細(xì)胞學(xué)檢測的結(jié)果會受到臨床醫(yī)師的主觀性影響，且由于設(shè)備與人員的不同，其結(jié)果也會發(fā)生一定的變化[13，14]。本研究結(jié)果顯示，HPV 陽性率與HR-HPV-E6/E7 mRNA 陽性率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；HR-HPV-E6/E7 mRNA 檢測陽性正常或炎癥占比低于陰性，CIN1、CIN2 以及CIN3 均高于陰性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；陽性與陰性ICC 占比比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），且Spearman 相關(guān)性分析顯示，HR-HPV-E6/E7 mRNA陽性與CIN1、CIN2 以及CIN3 呈正相關(guān)（P＜0.05）。相比之下，HR-HPV-E6/E7 mRAN 檢測陽性則表示HR-HPV 致癌基因的表達(dá)，能夠判斷HR-HPV 感染是否處于致癌活動期，和細(xì)胞學(xué)檢測相比，不會受到臨床醫(yī)師主觀性的影響，有利于保證結(jié)果的客觀性與準(zhǔn)確性[15]。

綜上所述，HR-HPV-E6/E7 mRNA 檢測陽性與宮頸病變病理結(jié)果密切相關(guān)，有利于臨床醫(yī)師判斷患者病變的嚴(yán)重程度，且對患者預(yù)后具有一定的指導(dǎo)意義。