MMP-2、TIMP-2在足月胎膜早破發病中的作用

梁學美

泰安市中心醫院產科，山東泰安271000

臨產前的胎膜破裂稱為胎膜早破,胎膜早破的發生與營養、羊膜腔壓力增高、創傷、感染以及妊娠期糖尿病等并發癥有關系[1-2]。胎膜早破是產科最常見的并發癥之一，可能會引起絨毛膜感染、臍帶脫垂、胎兒窘迫、羊水栓塞甚至威脅到母嬰的生命安全[3]。近年來，人們普遍認為，胎膜的結構病變可能與胎膜早破有一定的關系，相關研究也顯示，MMPs/TIMP與胎膜早破關系密切[4]。該研究方便選取2019年3月—2020年3月在該院住院剖宮產產婦足月胎膜早破40例為研究組，足月未胎膜早破者40例為對照組，用免疫組化法分別檢測胎膜中基質金屬蛋白酶-2（MMP-2）、基質金屬蛋白酶抑制劑-2（TIMP-2）分布,并進一步明確其在足月胎膜早破中的作用，從而達到預防與治療胎膜早破的目的。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院住院產婦分成兩組，研究組為胎膜早破足月剖宮產的產婦40例，對照組為未胎膜早破足月剖宮產的產婦40例。所有患者自然受孕，單胎，宮頸擴張＜3 cm，胎膜早破＜12 h。對照組年齡25～39歲，平均(30.5±3.20)歲；孕周37～41周，平均(38.85±1.93)周。研究組年齡23～40歲，平均(29.05±4.07)歲；孕周37～41.5周，平均(39.12±1.05)周。兩組孕周、年齡比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。該研究已通過泰安市中心醫院倫理委員會批準，已取得孕婦及家屬知情同意。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 在該院住院產婦按照以上標準分為兩組，研究組為胎膜早破足月剖宮產的產婦40例，對照組為未胎膜早破足月剖宮產的產婦40例，兩組產婦剖宮產術中取其近宮頸處大小約2 cm×2 cm胎膜一塊，分別經過0.9%生理鹽水沖洗、10%多聚甲醛固定、石蠟包埋。

1.2.2 檢測 按照常規免疫組化操作，陽性對照為TIMP-2陽性的纖維母細胞切片及MMP-2陽性乳腺癌切片，磷酸鹽緩沖液作為陰性對照，通過病理圖象分析儀，仔細觀察兩組胎膜組織的染色強度。

1.3 觀察指標

用光鏡觀察兩組胎膜組織陽性細胞的百分率及染色：一個切片選取5個段面，在400×光鏡下，切片中陽性物質的相對含量通過5個斷面中的陽性物質的平均值表示，半定量分析參考Fromowitz綜合記分法。根據陽性細胞的百分率及顯色深淺評分，陽性細胞的百分率：0為無陽性細胞；1為陽性細胞<25%；2為25%～50%；3為>50%；顯色：0為未顯色或顯色不清楚；1為淺黃色；2為棕黃色；3為深褐色。兩項之和累積：0～1分表示陰性(-)；2～3分表示弱陽性(+)；4～5分表示中度陽性(++)；6分為表示強陽性(+++)，陽性率為每組（+)~(+++）陽性總例數與每組總例數比值的百分比，從而檢測胎膜中MMP-2及TIMP-2的分布及陽性率的表達。

1.4 統計方法

采用SPSS 18.0統計學軟件分析數據，計數資料采用頻數或率（%）表示，比較采用χ2檢驗，等級資料采用秩和檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組產婦胎膜組織中MMP-2陽性率比較

MMP-2在研究組的陽性表達率85.0%,高于對照組的65.0%，差異有統計學意義（χ2=4.267，P=0.039），通過Mann-Whitney檢驗Z=-3.258，漸進顯著性（0.001）。見表1。

表1 兩組產婦胎膜組織中MMP-2陽性率比較

2.2 兩組產婦胎膜組織中TIMP-2陽性率比較

TIMP-2在研究組中陽性表達率52.5%,低于對照組的70.0%，但差異無統計學意義（χ2=2.581，P=0.108），通過Mann-Whitney檢驗Z=-1.693，漸進顯著性（0.090）。見表2。

表2 兩組產婦胎膜組織中TIMP-2陽性率比較

2.3 TIMP-2及MMP-2在兩組胎膜中表達的相關性

TIMP-2和MMP-2在兩組產婦胎膜組織中表達的陽性率呈負相關（RSquare=0.761,P＜0.05）。

3 討論

胎膜含有較多的膠原，膠原本身的結構狀態決定胎膜的強度[5]，胎膜早破可能會引起臍帶脫垂、感染、胎兒窘迫等,因此嚴重威脅母兒的生命安全[6]。因此，用比較準確的指標對胎膜早破及時進行預測，對孕婦的治療有很大地幫助，可以盡量減少母嬰并發癥的發生[7]。

基質金屬蛋白酶共有26個成員,根據不同的底物和結構特異性，分為基質溶素、膠原酶、膜型基質金屬蛋白酶、溶基質素、明膠酶和其他六大類[8]。 除膜型直接以酶的形式發揮作用外，其他均以酶原形式分泌，被激活劑激活后才具有酶活性[9]。基質金屬蛋白酶可以介導細胞外基質的釋放，并激活可溶性因子,如細胞因子和生長因子等[10]。MMP-2主要分布在羊膜上皮細胞上，具有降解細胞外基質蛋白的功能[11]。MMP-2可以降解Ⅰ型和Ⅲ型膠原,在胎膜早破孕婦較未胎膜早破的孕婦羊水中的濃度偏高[12]。胎膜未破時，血清中MMP-2在血清中含量較少，但在某些因素刺激下，可能增加MMP-2的水平，使胎膜中的ECM的降解增加，膠原分解也增加，導致發生胎膜早破[13-14]。胎膜早破患者胎盤中的高遷移率族蛋白B1(HMGB1)刺激HMGB1受體,導致MMP-2水平升高,進一步調節胎膜中外基質蛋白的分解代謝,MMP-2在胎膜早破患者胎膜、胎盤及血清中均出現升高現象[15]。基質蛋白酶具有降解膠原的作用，胎膜組織中含量升高可引起局部胎膜的薄弱[16]。崔世紅等[17]研究中，對比胎膜早破病例及同孕期健康孕婦各30名,基質金屬蛋白酶-2在胎膜早破組胎膜中的表達陽性23例(77%),在正常對照組胎膜中的表達陽性15例(50%)(P＜0.05)，從而得出胎膜中基質金屬蛋白酶-2蛋白的高表達可能參與胎膜早破的發病過程。 在該次研究中，MMP-2在研究組的陽性表達率85.0%,高于對照組的65.0%(P=0.039)，與前人的研究結果一致，隨著MMP-2水平增加，胎膜中的ECM的降解增加，膠原分解也增加，容易發生胎膜早破。

TIMP-2為MMP-2的特異性組織抑制劑，其合成與降解水平與胎膜早破有關[18]。張莉等[19]研究胎膜早破及正常剖宮產產婦各30例，結果MMP-2在胎膜早破組表達（100.00%）明顯高于正常剖宮產組(46.67%）(P＜0.05),TIMP-2在胎膜早破組表達（40.00%）低于正常剖宮產組(60.0%)(P=0.091),得出MMP-2和TIMP-2失調可能是誘發胎膜早破 的原因之一。在該次研究中，TIMP-2在研究組中陽性表達率52.5%,低于對照組的70.0%,但差異無統計學意義(χ2=2.581，P=0.108)，該文結果與以上研究基本一致，雖然TIMPS陽性表達率優于對照組，但不能否認胎膜早破中TIMP-2所起的作用，可以在以后對TIMP-2與胎膜破裂的關系做進一步探討。

從研究中可以看出,研究組中羊膜MMP-2的陽性表達率高于對照組,TIMP-2的陽性表達率低于對照組，且它們的表達呈負相關（R Square=0.761,P＜0.05），當胎膜組織中的MMP-2含量明顯增多，而TIMP-2含量減少,MMP-2/TIMP-2比例失去平衡時，導致胎膜中膠原出現大量降解，胎膜強度減小,使局部胎膜發生破裂。可見足月胎膜早破的原因之一可能是MMP-2/TIMP-2比例失衡，MMP-2、TIMP-2在一定程度上共同參與足月胎膜早破的發生。