長壽花組織培養快繁技術

盧玫璇

（吉林市園林管理中心 吉林·吉林 132108）

長壽花為景天科伽藍菜屬中一種草本植物，又名圣誕伽藍菜等，是一種常見草本花卉，可露地栽植及盆栽，觀賞價值非常好。長壽花觀賞效果、開花時節及觀賞期極具特點，是園林綠化、室內美化應用中非常好的花材。長壽花常用繁殖方法為扦插繁殖和組培繁殖。扦插繁殖應用較早，技術比較成熟，組培繁殖技術應用較晚，還有開發空間，結合花卉生產實踐介紹組織培養快繁技術。

1 長壽花組培外植體的處理

長壽花的莖頂、葉、莖、花芽和花均可以作為外植體，在作者實踐中，以莖段做為外植體的效果最好。采集長壽花莖段，帶回組培實驗室，清水洗凈截小段，裝進廣口瓶，無菌紗布封瓶口，流水沖洗15分鐘，瀝干水分將截成小段嫩枝再進一步截成2～3厘米長短段，在0.1%升汞（HgCl2）溶液中浸泡3分鐘，再用無菌水沖洗4～5次，瀝干水分，帶入接種室中，放入已經消過毒的超凈工作臺上。在接種前，外植體還需在75%的酒精溶液中浸泡30分鐘，用無菌水沖4～5次后，再用無菌的藥棉拭干水分，放在培養皿（墊上無菌濾紙）中。莖段用酒精燈灼燒過的手術刀切割成0.5厘米的小段后再接種，首次接種每瓶只接1塊原材料，這樣可以降低它的污染率。接種時使莖段保持橫臥狀態會有較好的效果，保持橫臥時，莖段側面兩個切口都能夠生成愈傷組織，最后會連到一起，保證產生較大面積的愈傷組織塊，為形成大量不定芽做好基礎。

2 長壽花組培培養基配方選取

長壽花整個室內組培過程分為初代培養、增殖培養和生根培養三個階段。前兩個階段基本培養基選取MS，生根培養階段基本培養基選取1/2MS，然后往基本培養基中添加不同種類和濃度的激素。各配方的培養基均采用固體培養基，添加瓊脂量為6g/L，蔗糖量為30g/L，各配方pH值均調整為5.8。所有培養基都要用高壓滅菌鍋高壓滅菌，條件為121℃、131kPa、30分鐘。初代培養主要以誘導為目的，可選用MS+6-BA1.0毫克/升+NAA0.1毫克/升配方，在實踐中發現該配方除了污染之外，每個組培瓶中均能夠100%的形成愈傷組織，而且愈傷組織能夠較好地誘導出不定芽。增殖培養主要以擴繁為目的，實踐中在基本培養基MS中添加不同配比的細胞分裂素KT和生長素IAA、NAA，結果發現KT添加量為1.0毫克/升時，生長素NAA量增加有利于增殖，但影響苗高生長。另外，玻璃化比率處于上升狀態，說明添加生長素NAA，增殖倍數和苗高較IAA效果好，但易導致苗木玻璃化。經多次實踐比較，在培養基中添加1.0毫克/升的GA3，可減少玻璃化現象。增殖培養基的配方選取MS+KT1.0毫克/升+NAA0.02毫克/升+GA31.0毫克/升效果最好。生根培養主要以促進增殖苗生根為目的，生根培養基配方可以選用1/2MS+IBA0.5毫克/升，生根率達到100%，且生成的根基部無愈傷組織，根較粗壯。

3 長壽花組培過程及培養條件

外植體莖段以保持橫臥狀態接種到初代培養基上，為降低污染率，初次接種每瓶只接1塊原材料，接種后7天開始形成愈傷組織，到第15天愈傷組織生長達到最旺盛時期，此時愈傷組織上面開始分化出不定芽，經過25天時間，大部分愈傷組織上形成7～8個不定芽，待不定芽長成3～4厘米，將其切成1～2厘米小段轉接到增殖培養基配方中，增殖培養基上培養20天將會長成小叢苗，然后再次切割小叢苗進行第二代增殖，總共增殖培養3代，然后進行生根培養，生根培養時間為20～25天。

三個階段培養過程均在培養室進行，接種、轉瓶過程均需無菌條件，培養室、接種室要保證無菌環境。初代階段，溫度控制20～25℃，光照度1000～2000Lx，每天光照8小時；增殖階段溫度控制在 25～28℃，光照度 2000～3000Lx，每天光照時間 8～12 小時；生根階段溫度前期階段控制25℃，后期階段控制25～28℃，光照強度先低后高，控制在1500～4000Lx，光照時間14小時。

4 組培苗出瓶移栽及養護

長壽花在生根培養基上長到苗木高達3厘米、具有3～4條1～2厘米長根系時進行出瓶移栽操作。出瓶前煉苗3～5天，出瓶基質可采用蛭石、沙子、草碳、園土等，實踐表明采用蛭石∶沙子=2∶1效果較好，出瓶成活率達到98%，苗木生長狀況好，葉濃綠，苗健壯，新根粗壯。出瓶后需在大棚溫室進行培養1個月，環境隨正常大棚環境。在大棚培養前期階段，需要覆蓋塑料薄膜，保證膜內濕度在80%～85%，大棚的遮蔭率在50%，另注意病蟲害的防治。