包頭地區2 637例女性HPV感染情況及基因型分析*

邢少姬，李曉敏，何 珊，楊雪毓，尹芳蕊，翟翔宇，劉雙杰，張瀚文

(1.包頭醫學院醫學技術與麻醉學院，內蒙古包頭 014060；2.包頭醫學院第一附屬醫院中心實驗室)

據統計，全世界每年大約有27萬的婦女因宮頸癌而失去生命，該病死率仍在持續升高，且其發病逐漸趨于年輕化[1]。人類乳頭瘤病毒(HPV)長期的持續感染是誘發女性宮頸上皮細胞發生癌變的必要致病因子[2-3]。HPV是一種具有嗜上皮特性的強致病DNA病毒，其亞型種類繁雜高達上百種，由于其致病能力的不同，分為HPV高危型(HPV-HR)與HPV低危型(HPV-LR)兩種。現有的研究表明，HPV不同基因型別在不同地區、不同人群間的分布均存在差異[4]。目前尚缺乏有關內蒙古包頭地區女性感染HPV情況的任何研究數據。本研究對包頭地區2 637名成年女性受檢人員進行了常見23種HPV基因型別的檢測，初步了解當地女性HPV的感染狀況，以利于為當地開展宮頸癌的防治提供一定幫助。

1 對象與方法

1.1對象 收集選用2018年1月至2019年12月在包頭市某三甲醫院婦科門診篩檢的2 637名女性受檢人員作為研究對象，所有入選人員均自愿接受宮頸脫落細胞的采集和HPV的分型檢測。納入標準：籍貫為包頭市轄區內的成年女性，有性生活史。排除標準：取樣前3 d內有陰道的操作,如沖洗、用藥等以及宮頸手術史。

1.2方法

1.2.1細胞DNA提取 取1 mL宮頸脫落細胞液，將其加入于1.5 mL的離心管中，進行13 000轉離心10 min，后加入100 μL裂解液于離心后的沉淀細胞中，懸浮沉淀、混勻，沸水加熱10 min，再次離心10 min后取上清液備用。

1.2.2HPV基因分型檢測 根據試劑盒(產自深圳亞能生物技術公司)說明書配制能夠同時檢測23種HPV基因型的PCR反應分型檢測擴增體系。總體積25 μL，包括：樣本DNA 5 μL、PCR反應液12.5 μL、6.5 μL引物混合液及1 μL純化水。擴增后PCR產物經高溫變性處理，然后通過冰盒將其轉移至全自動的核酸分子雜交儀內，再進行雜交反應、溫育、洗膜和顯色及結果的判讀。每一組樣本的檢測都要設置一個陽性對照、一個陰性對照和內標質控品(自身質控，檢測DNA提取樣本是否加入)。

1.3統計學方法 本次實驗所獲得數據的統計分析運用SPSS 17.0軟件，率的比較采用卡方檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1受檢人員HPV整體感染類型及構成 2 637名受檢人員中檢出HPV感染者723名，檢出率達27.42 %，發現感染類型主要為單一基因型別，占比達69.02 %，同時存在雙重和多重基因型別。見表1。

表1 受檢人員HPV感染類型及構成

2.2受檢感染人員HPV基因型別分布情況 723名感染人員中檢出高危型別16種，低危型別5種，有2種高危型別即HR-73和HR-83未檢出。感染率最高的前3位分別是HR-52(6.22 %)、HR-16(6.07 %)和HR-58(3.15 %)。見表2。

表2 感染人員HPV基因型別分布情況

2.3不同年齡段分組人員感染情況 由于美國中期指南確定的HPV篩查年齡已由30歲提前至25歲[5]，因此，本研究年齡組的劃分也以25歲作為重要劃分界限，同時參考國內同類研究文獻[6-7]將受檢人員分為18～24歲、25～34歲、35～44歲、45～54歲和≥55歲5個年齡組。受檢人員中35～44歲女性HPV的感染率最高，感染率為32.04 %，HPV女性感染率在總體年齡上差異有統計學意義(P<0.05)；各年齡組女性受檢人員在雙重型別感染率上總體差異也有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 年齡段分組人員感染情況[n(%)]

3 討論

近年來，如何早期預防和篩查宮頸癌，已然成為了全世界的公共衛生問題。目前，關于宮頸癌的病因已經明確，即與HPV的長期慢性感染密切相關。女性宮頸上皮細胞持續感染HR-HPV后，細胞會異常增生，進而最終導致癌變。從HR-HPV的感染至發展為宮頸癌，此過程較為漫長，大約需要十至十五年的時間[8]。因此,對適齡女性進行HPV的基因分型檢測是早期防治宮頸癌的關鍵手段。

現有的研究發現，人群中HPV的感染非常普遍，其感染率與所生活的地區、年齡、職業和教育程度及對HPV的認知度等有關[8-10]。本次我們研究發現包頭地區2 637名受檢人員中檢出HPV感染723名，總檢出率達27.42 %。這一檢出率低于近年報道的廣東省中山市(37.00 %)[11]和陜西省咸陽地區(32.14 %)[12]，而高于南京六和地區(19.26 %)[13]與珠海市(21.37 %)[14]等。提示包頭地區女性也可能屬于HPV感染較高風險地區，但還需要擴大樣本量開展進一步的流行病學調查，以利于采取有效措施進行預防。在HPV感染的類型上，包頭地區多為單一基因型別，占比達69.02 %，低于上述的中山市(79.80 %)，與南京六和地區(72.58 %)，與上海市(71.21 %)[6]較為接近。本次研究結果中感染率最高的前3位HPV基因型均為高危型，分別是HR-52、HR-16和HR-58，這與上海市和中山市的研究結果一致。同時，占比最高前3位HPV基因型也與咸陽地區(HPV16、HPV52、HPV58)、重慶地區(HPV52、HPV16、HPV58)和深圳地區(HPV52、HPV58、HPV16)的報道基本一致，這也進一步印證了有關報道的“我國整體上HPV感染情況多以HPV16、18和52及58型為主[15]”。

本研究中，HPV在各年齡段女性中均可檢出，其中35～44歲年齡組HPV的感染率最高，感染率為32.04 %，其次是最小年齡組18～25歲，感染率為27.66 %。HPV女性感染率在年齡上總體差異有統計學意義。35～44歲年齡組HPV感染率之所以最高，可能與此年齡段女性性生活較為活躍，同時缺乏相應個人衛生防護意識等因素有關。本研究結果中特別值得關注的是18～24歲低年齡組的女性人群，從社會發展程度及人口素質對低年齡段的感染率的影響方面考慮，低年齡段女性如果性生活開始年齡較早，且預防保護措施欠缺，性行為影響相關疾病的知識欠缺等都可成為其HPV感染率較高的原因。因此，非常有必要對這一年齡段的女性人群特別加強HPV相關知識的健康宣教，提高其HPV的知曉率。在HPV雙重型別感染率上不同年齡受檢人員差異有統計學意義，雙重感染率在45～54歲出現一個高峰，這可能與女性隨年齡增長，其在圍絕經期的體內激素水平下降，免疫系統的衰退等有關。

宮頸癌的形成是一個循序漸進的過程。當前感染者便是將來宮頸癌患者的潛在人群，故HPV的分型檢測的重要性不言而喻，其在宮頸癌的篩查中有著舉足輕重的地位。基于本次研究結果，建議包頭地區相關機構必須加強HPV相關知識的宣傳與教育，提高HPV知曉率，倡導適齡女性及時注射HPV疫苗，并針對性地開展早期預防性篩查，一旦發現感染者，特別是HR-HPV型感染者，應積極采取有效的治療措施。同時密切關注老年女性的生殖健康，切實有效降低當地女性宮頸癌的發病率。