PSP、IL?10、CCL?17在新生兒早發型GBS敗血癥中的水平變化及臨床意義

王佳麗 彭文紅 徐敬軒

B 族鏈球菌（Group B Streptococcus，GBS）是一種條件致病菌，是圍產期母嬰感染的主要病原菌之一［1］。據統計，我國孕婦GBS 帶菌率高達10.1%～32.4%，新生兒早發型GBS 敗血癥發生率在1.6%～2.1%［2］。目前，培養法是診斷新生兒早發型GBS 敗血癥的金標準，但檢測周期較長，無法實現早期確診及病情評估［3］。研究證實，胰石蛋白（Pancreatic stone protein，PSP）可用于感染性疾病診斷及病情評估［4］。白細胞介素?10（Interleukin?10，IL?10）是臨床常見炎癥免疫反應相關指標，可有效反映機體免疫失衡、炎癥狀態［5］。趨化因子17（Chemoattractant cytokine ligand 17，CCL17）可通過趨化Th12、Th17 細胞及調節性T 細胞至組織損傷或感染部位，在局部炎癥反應中發揮重要作用［6］。但有關三者在新生兒早發型GBS 敗血癥中的臨床價值仍有待驗證。為此，本研究嘗試探究PSP、IL?10、CCL?17 在新生兒早發型GBS 敗血癥中的水平變化及臨床意義。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取丹陽市婦幼保健院2018年2月至2021年2月90 例新生兒早發型GBS 敗血癥患兒作為敗血癥組，其中男55 例，女35 例，胎齡平均（37.06±0.42）周，出生體重平均（3.36±0.51）kg。另選擇同期30例新生兒GBS 感染患兒作為GBS 組，其中男19例，女11 例，胎齡平均37.15 周，出生體質量平均3.29 kg。30 例健康新生兒作為健康對照組，其中男20 例，女10 例，胎齡平均（37.10±0.48）周，出生體重平均（3.41±0.67）kg。3 組性別、胎齡、出生體質量均衡可比，差異無統計學意義（P>0.05）。納入標準：①敗血癥組、GBS 組均經血培養證實為GBS 感染，敗血癥組于出生≤72 h 內發生敗血癥，且符合新生兒敗血癥診斷標準［7］；②健康對照組各項指標正常，且GBS 培養陰性；③3 組監護人均知情，簽訂知情承諾書。排除標準：①伴有先天性畸形、遺傳性代謝性疾病者；②合并溶血性貧血、嚴重缺血缺氧性腦病者；③母體陰道常見病原菌混合感染者。且本研究經院倫理委員會審批通過。

1.2 方法

血清檢測方法：于入院當日清晨采集空腹靜脈血3 mL，采用3 000 r/min 速率離心10 min，取上清液，保存于-80℃條件下待檢。采用酶聯免疫吸附法檢測血清PSP、IL?10、CCL?17 水平，試劑盒購自美國R&B 公司，操作步驟遵循說明書。敗血癥組治療方法：確診后立即給予針對性抗菌藥物治療，持續治療7 d。療效判定方法［7］：臨床表現及體征消失，GBS 病原學檢查陰性，血常規等常規生化指標復常為治愈；臨床表現及體征基本消失，GBS 病原學檢查陰性，血常規常規生化指標有所改善但未復常為好轉；臨床表現及體征無明顯緩解或加重為無效。

1.3 統計學分析

采用統計學軟件SPSS 22.0 處理數據；計量資料以（±s）描述，多組間比較采用單因素方差分析，進一步兩兩組間比較采用LSD?t 檢驗，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗；計數資料用n（%）表示，χ2檢驗；相關性采用Spearma 相關系數模型分析；診斷效能采用受試者工作特征（ROC）曲線分析，獲取曲線下面積、置信區間、敏感度、特異度及截斷值；聯合診斷實施Logistic 二元回歸擬合，返回預測概率logit（p），將其作為獨立檢驗變量。P<0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3 組血清PSP、IL?10、CCL?17 水平

3 組血清PSP、IL?10、CCL?17 水平比較，差異有統計學意義（P<0.05）；兩兩比較，敗血癥組血清PSP、IL?10、CCL?17 高于GBS 組、健康對照組，GBS 組高于健康對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

表1 3 組血清PSP、IL?10、CCL?17 水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum PSP，IL?10 and ccl?17 levels among the three groups（±s）

表1 3 組血清PSP、IL?10、CCL?17 水平比較（±s）Table 1 Comparison of serum PSP，IL?10 and ccl?17 levels among the three groups（±s）

注：與健康對照組比較，aP<0.05；與GBS 組比較，bP<0.05。

組別敗血癥組GBS 組健康對照組F 值P 值n 90 30 30 PSP（ng/mL）20.63±6.72ab 13.81±4.43a 5.18±1.19b 88.606<0.001 IL?10（pg/mL）61.34±15.47ab 45.96±12.10a 10.07±3.31b 168.527<0.001 CCL?17（pg/mL）412.77±113.59ab 308.45±84.28a 69.41±17.20b 143.497<0.001

2.2 血清PSP、IL?10、CCL?17 與新生兒GBS 感染及敗血癥的關系

Spearman 相關性分析，血清PSP、IL?10、CCL?17與新生兒GBS 感染、新生兒早發型GBS 敗血癥呈正相關（P<0.05）。見表2。

表2 血清PSP、IL?10、CCL?17 與新生兒GBS 感染及早發型GBS 感染敗血癥的關系Table 2 Relationship between serum PSP，IL?10，ccl?17 and neonatal GBS infection

2.3 血清PSP、IL?10、CCL?17 對新生兒早發型GBS 敗血癥的診斷價值

以敗血癥組為陽性樣本，GBS 組為陰性樣本，繪制ROC 曲線，結果顯示，血清PSP、IL?10、CCL?17診斷新生兒早發型GBS 敗血癥的AUC 分別為0.788、0.648、0.722，三者聯合診斷新生兒早發型GBS 敗血癥的AUC 為0.927 診斷價值優于各血清指標單獨診斷（P<0.05）。見圖1。

圖1 血清PSP、IL?10、CCL?17 對新生兒早發型GBS 敗血癥的診斷價值Figure 1 The diagnostic value of serum PSP，IL?10 and ccl?17 in the early?onset GBS sepsis of newborn

2.4 敗血癥組不同療效患兒血清PSP、IL?10、CCL?17 水平

敗血癥組不同療效患兒血清PSP、IL?10、CCL?17水平比較，差異有統計學意義（P<0.05）；治愈患兒血清PSP、IL?10、CCL?17 低于好轉患兒組、無效患兒組，好轉患兒組低于無效患兒組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表3。

表3 敗血癥組不同療效患兒血清PSP、IL?10、CCL?17水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum PSP，IL?10 and CCl?17 levels in children with different curative effects in Study Group（±s）

表3 敗血癥組不同療效患兒血清PSP、IL?10、CCL?17水平比較（±s）Table 3 Comparison of serum PSP，IL?10 and CCl?17 levels in children with different curative effects in Study Group（±s）

注：與無效患兒比較，aP<0.05；與好轉患兒比較，bP<0.05。

CCL?17（pg/mL）368.41±92.25ab 446.74±108.53a 609.72±149.21b 28.292<0.001組別治愈患兒組好轉患兒組無效患兒組F 值P 值n 64 14 12 PSP（ng/mL）16.57±4.38ab 25.49±6.59a 36.61±10.12b 66.755<0.001 IL?10（pg/mL）54.37±13.14ab 67.55±18.79a 91.27±22.46b 29.803<0.001

2.5 血清PSP、IL?10、CCL?17 與療效的關系

Spearman 相關性分析，血清PSP（r=-0.745）、IL?10（r=-0.579）、CCL?17（r=-0.476）與療效呈負相關（P<0.05）。

3 討論

GBS 通常定植于泌尿生殖道、胃腸道，是引起新生兒肺炎、腦膜炎、敗血癥的常見致病菌，嚴重者甚至死亡，及早確診、及時治療、控制病情進展是降低死亡風險的關鍵所在［8?9］。因此，積極探索較為可靠的指標進行早期診斷具有重要意義。

PSP 是胰腺應激蛋白家族成員之一，由再生基因編碼，不僅可反映胰腺損傷情況，在糖尿病、消化道腫瘤、炎癥性腸病、急慢性胰腺炎中還屬于急性反應蛋白，呈現出不同程度升高表達。有文獻指出，PSP 是判斷感染嚴重程度的新型指標，在新生兒敗血癥中異常升高表達［10］。結合查麗等［11］報道，考慮原因為：PSP 作為C 型凝聚素，具有特異性凝聚細菌作用，可通過加快有絲分裂、細胞黏附、促進細胞聚集、抑制凋亡等途徑加速感染發生，隨著其水平不斷升高，病情逐漸加劇，從而參與新生兒GBS 感染、早發型GBS 敗血癥發生發展。本研究還發現，血清PSP 對新生兒早發型GBS 敗血癥中具有一定診斷價值，且與療效呈負相關，說明血清PSP 不僅可以作為診斷指標，還可為臨床評估療效提供相關信息。

邢靜等［12］研究顯示，血清IL?10 在小兒膿毒癥中呈升高表達，動態監測有利于評估膿毒癥病情程度。本研究發現，血清IL?10 在新生兒早發型GBS敗血癥中水平較高，參與其發生發展過程。IL?10是目前臨床公認的炎癥與免疫抑制細胞因子，在敗血癥細胞因子瀑布中發揮強大抗炎作用。在敗血癥條件下，內毒素、腫瘤壞死因子會刺激Th 細胞、B 細胞、單核細胞產生、分泌IL?10，達到抑制炎癥反應的目的，但過高的抗炎介質濃度會打破促炎?抗炎系統之間的動態平衡，從而抑制機體免疫功能，導致對病原菌清除能力減弱，甚至可能引發“免疫麻痹狀態”［13］。同時，相關報道證實，GBS表面三磷酸甘油醛脫氫酶（GAPDH）能誘導巨噬細胞吞噬，刺激大量IL?10 分泌，在感染早期發揮抑制炎癥反應作用，但IL?10 濃度不斷升高會反饋性抑制中性白細胞抗炎效應，并超過IL?10 的直接抗炎作用加快GBS 增殖［14］。本研究數據表明，血清IL?10 對新生兒早發型GBS 敗血癥單獨診斷價值欠佳，需與其他指標聯合診斷，還發現其與療效之間存在負相關關系，可見血清IL?10 可應用于療效評估中。

CCL17 屬于CC 趨化因子之一，由巨噬細胞M1 產生，當病原菌入侵機體，巨噬細胞M0 接觸干擾γ 后會極化為M1，產生過多CCL17，參與局部炎癥反應，并加劇病變所致的免疫紊亂［15］。本研究表明，與健康新生兒、新生兒GBS 感染患兒相比，新生兒早發型GBS 敗血癥患兒血清CCL17 水平呈顯著高表達。主要是因為GBS 定植條件下，處于休眠狀態的巨噬細胞M0 便可極化為巨噬細胞M1，發揮抗炎作用，一旦發生GBS 感染，M0 便會通過極化為M2 抑制過度炎癥反應，而CCL17 上調不僅與M1有關，還與M2 極化聯系緊密，從而在GBS 敗血癥發生發展過程中占據重要地位［16］。提示臨床可將檢測血清CCL17 水平作為早期診斷與療效評估的重要環節，為及早確診、制定合理治療方案提供參考依據。

血清PSP、IL?10、CCL?17 單獨診斷價值均有較大提升空間，為此本研究初次嘗試分析血清PSP、IL?10、CCL?17 聯合診斷價值，結果發現，三者聯合診斷價值較各指標單獨診斷顯著提高，為臨床早期診斷提供新思路、新途徑。但本研究屬于單中心、小樣本分析，可能造成數據偏移，需進一步采取多中心、大樣本研究，以獲取更可靠的數據支持。

綜上可知，血清PSP、IL?10、CCL?17 在新生兒早發型GBS 敗血癥中異常升高，聯合檢測可作為臨床輔助診斷的潛在途徑，還可為評估療效提供參考依據。