飼糧能量水平對白薩福克×湖羊F1羔羊生產(chǎn)性能和脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

張小強(qiáng)，趙雷云，黃曉瑜，楊 晨，田林濤，李 博，張恩平

(西北農(nóng)林科技大學(xué) 動物科技學(xué)院，陜西 楊凌 712100)

羊肉具有高蛋白、低脂肪和低膽固醇等優(yōu)點，隨著社會經(jīng)濟(jì)發(fā)展和人民追求健康飲食理念的加強(qiáng)，優(yōu)質(zhì)羔羊肉深受市場青睞。2～4月齡的羔羊具有生長發(fā)育快、飼料轉(zhuǎn)化率高等特點，因此斷奶羔羊快速肥育成為生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)羔羊肉的主要方式。飼糧能量是影響反芻動物的第一限制性因素[1]，早期營養(yǎng)攝入不足會嚴(yán)重阻礙其生長發(fā)育。大量研究發(fā)現(xiàn)，飼糧能量水平顯著影響羔羊的生產(chǎn)性能。呂小康等[2]發(fā)現(xiàn)，增加飼糧能量含量能顯著提高2～4月齡湖羊羔羊的生長性能。Liu等[3]也發(fā)現(xiàn)，2月齡灘羊羔羊的體重、平均日增重和胴體重隨著飼糧能量水平的升高而顯著改善。血液不僅是動物體液最重要的組成部分，也是連接機(jī)體與外界的重要樞紐。Shakeri等[4]認(rèn)為血清生化指標(biāo)的變化與動物的能量代謝密切相關(guān)。Song等[5]發(fā)現(xiàn)，飼糧營養(yǎng)濃度可影響綿羊的血清生化指標(biāo)。羔羊營養(yǎng)不足時，其血清生化指標(biāo)也會隨之變化[6-7]。經(jīng)濟(jì)雜交能夠提高肉羊生產(chǎn)性能。有研究表明，薩湖F1代具有良好的育肥、屠宰性能以及上佳的肉質(zhì)性狀[8]，但由于生產(chǎn)中肉綿羊雜交組合較多，目前對特定雜交羔羊育肥階段營養(yǎng)需要的系統(tǒng)研究較少。本文通過對不同飼糧能量水平下薩湖F1代羔羊的生產(chǎn)性能、血液生化指標(biāo)以及脂肪代謝基因表達(dá)的測定，探究飼糧能量水平對薩湖F1代羔羊早期育肥的影響，為雜交羔羊早期育肥的營養(yǎng)需要提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗時間和地點

本試驗于2020年7月24日-2020年10月10日在甘肅省慶陽市環(huán)縣慶環(huán)肉羊制種有限公司進(jìn)行。試驗周期為78 d，其中預(yù)試期8 d，正試期70 d。

1.2 試驗動物與試驗設(shè)計

選取2月齡左右、平均體重為20.58±1.47 kg的健康白薩福克羊(♂)×湖羊(♀)F1代雜種羔羊36只，隨機(jī)分為3組，每組4個重復(fù)(公母各2個重復(fù))，每個重復(fù)3只羊，分別飼喂低能組(LE)、標(biāo)準(zhǔn)組(CON)和高能組(HE)試驗飼糧。

1.3 試驗飼糧

根據(jù)肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T816-2004)[9]中體重為20.0 kg，目標(biāo)日增重為200 g/d的育肥羔羊營養(yǎng)設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)組(CON)飼糧，消化能為10.38 MJ/kg，粗蛋白質(zhì)為14.36%；低能組(LE)飼糧設(shè)計能量水平為標(biāo)準(zhǔn)組的85%，消化能配方計算值為8.67 MJ/kg；高能組(HE)飼糧設(shè)計能量水平為標(biāo)準(zhǔn)組的115%，消化能配方計算值為12.31 MJ/kg，LE組和HE組飼糧蛋白水平與標(biāo)準(zhǔn)組一致。3組飼糧均制成顆粒飼料飼喂。飼糧配方組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Diet composition and nutritional level (air-dry basis)

1.4 飼養(yǎng)管理

試驗開始之前對圈舍、水槽、料槽以及走廊等進(jìn)行全面清掃和消毒，并對試驗羊按程序免疫(三聯(lián)四防)和體內(nèi)驅(qū)蟲(伊維菌素)。試驗期各處理組分別飼喂對應(yīng)能量水平的顆粒飼糧，每日分別于08:30和17:00投料2次，同時觀察試驗羊的健康狀況，試驗羊自由采食，自由飲水。

1.5 樣品采集和指標(biāo)測定

1.5.1 生產(chǎn)性能的測定 以試驗設(shè)置的重復(fù)為單位記錄各組的飼喂量和剩料量，并測定試驗羊的初始體重和終末體重，計算干物質(zhì)采食量(DMI)、平均日增重(ADG)和料肉比(F/G)。飼養(yǎng)試驗結(jié)束后，從每個重復(fù)中隨機(jī)選取1只試驗羊(共12只)進(jìn)行屠宰(空腹24 h)，記錄宰前活重和胴體重，計算屠宰率。采集皮下脂、尾脂和背最長肌組織樣品，并做好RNA提取樣品前處理。

1.5.2 胴體重 屠宰后去除頭、蹄、尾、內(nèi)臟，保留腎臟，稱量胴體重。

1.5.3 屠宰率

屠宰率(%)=胴體重/宰前活重×100%

1.5.4 血液生化指標(biāo)的測定 試驗結(jié)束的當(dāng)天晨飼前，所有試驗羊頸靜脈采血，靜置30 min，用低速離心機(jī)以3 500 r/min離心10 min，移取上層血清于2 mL離心管內(nèi)，于-20 ℃冰箱內(nèi)保存待測。采用邁瑞B(yǎng)S-420全自動生化儀(深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司)測定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、葡萄糖(GLU)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素(BUN)和生長激素(GH)含量。試劑盒由中生北控股有限公司提供。

1.5.5 相關(guān)基因表達(dá)檢測

1.5.5.1 RNA的提取和cDNA的合成 將皮下脂、尾脂和背最長肌組織從裝有保存液的凍存管內(nèi)取出，按照RNA提取試劑盒的說明書提取組織的總RNA，運用核酸定量儀(K5800，上海DRAWELL科學(xué)儀器有限公司)測定總RNA濃度和純度，用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測RNA的完整性。按照反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明進(jìn)行操作將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，于-20 ℃冰箱中保存。

1.5.5.2 引物設(shè)計與合成 依據(jù)NCBI(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)公布的綿羊脂肪酸合成酶基因(FASN)、乙酰CoA羧化酶基因(ACC)、過氧化物酶激活受體基因(PPARγ)、脂肪酸結(jié)合蛋白4基因(FABP4)、激素敏感脂肪酶基因(HSL)和內(nèi)參基因β-肌動蛋白(β-actin)的mRNA序列使用軟件Primer 5.0 設(shè)計特異性引物，交由陜西中科羽瞳生物公司合成，引物序列見表2。

表2 引物序列Table 2 Primer sequences

1.5.5.3 熒光定量PCR 反應(yīng)體系為20 μL：2× SYBR qPCR Master Mix 10 μL，cDNA 1 μL，上下游引物各0.4 μL，ddH2O 8.2 μL。PCR擴(kuò)增條件：95 ℃預(yù)變性30 s，95 ℃變性10 s，60 ℃延伸退火30 s，40個循環(huán)。融解條件：95 ℃下15 s，60 ℃下60 s，95 ℃下15 s，循環(huán)1次，檢測結(jié)果由LightCyler 96定量儀給出，以β-actin為內(nèi)參基因，各目的基因反轉(zhuǎn)錄強(qiáng)度以基因絕對拷貝數(shù)/β-actin絕對拷貝數(shù)表示，通過熔解曲線判斷是否有非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物或引物二聚體出現(xiàn)，采用2-ΔΔCT法進(jìn)行相對定量。

1.6 統(tǒng)計分析

采用Excel 2010對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行初步整理，使用GraphPad Primer 8.0 軟件做圖；使用SPSS 25.0統(tǒng)計軟件中的單因素方差分析(One-Way ANOVA)和Duncan氏法進(jìn)行多重比較，數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P<0.05表示差異顯著，P<0.01表示差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 試驗羔羊的生產(chǎn)性能

飼糧能量水平對羔羊生產(chǎn)性能的影響數(shù)據(jù)見表3。由表3可知，初始體重各處理組間無差異。試驗期羔羊末重和平均日增重HE組和CON組顯著高于LE組(P<0.05)；日均干物質(zhì)采食量CON組顯著高于HE組(P<0.05)；胴體重HE組生產(chǎn)成績最好，顯著高于LE組(P<0.05)，與CON組無顯著差異。屠宰率HE組較LE組和CON組升高了9.95%和7.09%。該結(jié)果表明，中國肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T 816-2004)[9]適用于薩湖F1代，適當(dāng)提高飼糧能量水平能夠提高飼料轉(zhuǎn)化效率和肉羊屠宰率。

2.2 試驗羔羊的血液生化指標(biāo)

由表4可知，飼糧能量水平對血清TC、TG、LDL、HDL和TP含量有顯著影響， HE組的血清TC含量較CON和LE組升高了35.53%和37.56%(P<0.05)；HE組的血清TG含量較CON組和LE組均升高了33.33%(P<0.05)；HE組的LDL含量較CON組和LE組升高了35.53%和37.56% (P<0.05)；HE組的HDL較CON組和LE組升高了27.78%和23.15%(P<0.05)；HE組的TP較CON組和LE組升高了8.12%和8.35%(P<0.05)；血清GLOB含量隨著能量水平的上升有升高趨勢(P=0.054)。

表4 飼糧能量水平對血清生化指標(biāo)的影響Table 4 Effect of dietary energy level on serum biochemical indexes

2.3 試驗羔羊脂肪代謝相關(guān)基因mRNA的表達(dá)

飼糧能量水平對羔羊脂肪代謝相關(guān)基因mRNA表達(dá)的影響見圖1。由圖1A可知，飼糧能量水平對皮下脂中基因ACC、FABP4和HSLmRNA的表達(dá)有顯著影響。ACCmRNA的表達(dá)隨能量水平的升高而升高，HE組顯著高于LE組(P<0.05)。HSLmRNA的表達(dá)量在3組之間差異顯著，HE組高于CON組高于LE組。CON組FABP4的表達(dá)水平最高，較LE和HE組分別提高了56.90%和58.62%(P<0.05)；飼糧能量水平對皮下脂肪中FASN和PPARγmRNA的表達(dá)無影響(P>0.05)。

由圖1B可知，飼糧營養(yǎng)水平對尾脂中基因FASN、ACC、FABP4和HSLmRNA的表達(dá)有顯著影響。FASNmRNA的表達(dá)量HE組最高，顯著高于CON組和LE組(P<0.05)；尾脂中ACCmRNA的表達(dá)模式與皮下脂中的相同，隨著能量水平的升高而逐漸升高，HE組顯著高于LE組(P<0.05)；FABP4 mRNA的表達(dá)量CON組最高，較LE組和HE組升高了31.97%和25.85%(P<0.05)；HSLmRNA的表達(dá)量LE組最高，較CON和HE組升高了18.00%和16.00%(P<0.05)。

由圖1C可知，飼糧能量水平對背最長肌中脂肪沉積相關(guān)基因mRNA的表達(dá)均有顯著影響。FASNmRNA的表達(dá)量CON組最高，分別較LE組和HE組提高了40.83%和42.01%(P<0.05)；ACCmRNA的表達(dá)量CON組最低，分別較LE和HE組下降了57.44%和30.55%(P<0.05)；PPARγmRNA的表達(dá)量HE組最低，分別較LE和CON組降低了16.00%和19.00%(P<0.05)；HSLmRNA的表達(dá)量LE組最高，分別較CON和HE組增加了83.00%、82.00%(P<0.05)。FABP4 mRNA的表達(dá)量HE組顯著高于CON組(P<0.05),CON組顯著高于LE組(P<0.05)。

圖1 薩湖F1代羔羊脂肪組織脂肪代謝相關(guān)基因mRNA的表達(dá)A.皮下脂肪；B.尾部脂肪；C.背最長肌脂肪同一基因標(biāo)相同字母或無字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)Fig. 1 mRNA expression of genes related to fat metabolism inadipose tissue of White Suffolk×Hu F1 Lambs A. subcutaneous adipose; B. tail fat; C. fat in longissimus dorsiIn the same gene, the same or no letter superscripts indicateinsignificant difference(P>0.05), while different lowercasesuperscripts mean significant difference (P<0.05)

3 討 論

3.1 飼糧能量水平對羔羊生產(chǎn)性能的影響

飼糧能量水平是影響反芻動物生長發(fā)育的第一限制性因素[1]。前人研究發(fā)現(xiàn)飼糧能量水平影響不同品種羔羊的體重、ADG和飼料轉(zhuǎn)化率，但卻存在一定差異。Yagoub等[10]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧能量水平的升高(ME:8.5～11.5 MJ/kg)可極顯著提高蘇丹羊羔羊的末重、ADG和飼料轉(zhuǎn)化率。Ebrahimi等[11]也發(fā)現(xiàn)，低能量飼糧可顯著降低梅赫拉班公羔的ADG和體重。本試驗結(jié)果與前人研究一致，羔羊末重和ADG隨營養(yǎng)水平的升高而顯著升高。研究發(fā)現(xiàn)，動物為能而食，可依據(jù)飼糧能量水平自主調(diào)整采食量，進(jìn)而提高飼料報酬和體重[12]。Brand等[13]發(fā)現(xiàn)，羔羊采食量隨著飼糧能量的提高而降低。在本試驗中，高能組的干物質(zhì)采食量最低，且顯著低于標(biāo)準(zhǔn)組。可能因為高能飼糧更容易滿足羔羊的營養(yǎng)需要，動物根據(jù)能量水平自主調(diào)整采食量，進(jìn)而造成采食量的下降。料肉比(F/G)反映飼料利用率的高低。呂小康等[2]也發(fā)現(xiàn)，提高飼糧能量水平顯著降低90～120日齡湖羊羔羊的料肉比。這與本試驗的結(jié)果一致，料肉比隨著能量的升高而極顯著下降，表明高能量飼糧能顯著促進(jìn)羔羊的飼料轉(zhuǎn)化率，提高經(jīng)濟(jì)效益。

研究發(fā)現(xiàn)，飼料營養(yǎng)水平與屠宰性能也有一定聯(lián)系。Wang等[14]發(fā)現(xiàn)不同能量水平的飼糧(ME為9.17～10.82 MJ/kg)可顯著提高20.0 kg肥育湖羊公羔的宰前活重和胴體重。Wang等[15]發(fā)現(xiàn)能量水平(ME為9.17～10.41 MJ/kg)的升高可有效增加4月齡湖羊公羔的宰前活重和胴體重。本試驗結(jié)果與前人的一致，HE組(12.31 MJ/kg)的宰前活重和胴體重顯著高于LE組(8.67 MJ/kg)，屠宰率也得到顯著提高。在本試驗中，LE組飼糧精粗比為40:60，CON組和HE組的飼糧精粗比一致為50:50，盧盛勇等[16]研究發(fā)現(xiàn)，精粗比為50:50與40:60的日糧對貴州白山羊(15.96±2.94 kg)的生長性能和屠宰性能無顯著影響，這與高林青等[17]在湖羊羔羊(15.62±0.01 kg)上的研究結(jié)果相同，這表明可將因飼糧的精粗比差異對羔羊育肥效果的影響排除在外。本試驗結(jié)果表明，飼糧能量水平的提高可顯著影響白薩湖羔羊的肥育期生產(chǎn)性能，在中國肉羊飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(NY/T 816-2004)[9]的基礎(chǔ)上增加15%可取得良好飼喂效果。

3.2 飼糧能量水平對羔羊血清生化指標(biāo)的影響

能量貯存于飼糧的各種養(yǎng)分中，飼糧能量的消化、轉(zhuǎn)化和利用總是伴隨著物質(zhì)代謝同步進(jìn)行，血液是體內(nèi)循環(huán)流通的代謝池，血液中相關(guān)生化指標(biāo)可間接反映機(jī)體的物質(zhì)代謝情況[18]。霍俊宏等[19]研究發(fā)現(xiàn)，精粗比為40:60與50:50的日糧對努比亞山羊(20.07±0.57 kg)的血清生化指標(biāo)無顯著影響。本試驗中CON組和HE組的飼糧精粗比相同，這說明在本試驗中飼糧精粗比的差異對白薩湖羔羊的育肥效果無影響。血清TC和TG指標(biāo)均與能量攝入有關(guān)，反映脂類的代謝和吸收[20]。江趙寧等[21]研究表明，隨著能量水平的升高，妊娠期母豬血清中的TG和TC含量呈顯著上升趨勢。本試驗的研究結(jié)果與前人一致，血清TC和TG含量隨著飼糧能量水平的升高呈升高趨勢，血清TC和TG含量HE組顯著高于CON組和LE組，說明高能量飼糧可有效促進(jìn)動物的脂代謝過程。

HDL和LDL都是膽固醇的運載介質(zhì)，其含量高低與體脂沉積密切相關(guān)。HDL可將血液中的TC和TG運輸?shù)礁蝺?nèi)和脂肪組織中進(jìn)行降解，進(jìn)而減少TG的沉積。LDL因能量攝入其水平顯著降低，可以有效防止脂代謝的紊亂[22]。劉爽[23]研究表明，架子牛血清中的HDL和LDL水平均隨能量水平的增加而升高。孫國虎[24]發(fā)現(xiàn)綿羊血清LDL水平隨能量(ME為7.85～11.67 MJ/kg)的升高而顯著增加。在本試驗中，血清HDL和LDL含量HE組極顯著高于CON組和LE組，可能因為高能量水平的飼糧先造成機(jī)體TC和TG含量的升高，進(jìn)而促進(jìn)機(jī)體中HDL和LDL的合成與分泌，用于轉(zhuǎn)運TC和TG到肝臟組織和脂肪組織中進(jìn)行降解，最終促進(jìn)機(jī)體脂肪沉積和內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)平衡。

血清葡萄糖水平反映機(jī)體能量代謝水平的高低，動物GLU濃度應(yīng)在6.1 mmol/L之下，否則影響機(jī)體的糖代謝運轉(zhuǎn)[25]。Chelikani等[26]發(fā)現(xiàn)血清中的GLU隨著飲食能量的增加而增加。在本試驗中，血清GLU含量隨著能量水平的升高而呈升高趨勢，且均在6.1 mmol/L以下，無顯著差異。這表明在本試驗中，較高能量水平可促進(jìn)機(jī)體的糖代謝增強(qiáng)，但并未影響糖代謝的正常運轉(zhuǎn)。

TP包括ALB和GLOB。TP含量的升高可促進(jìn)動物組織的蛋白質(zhì)沉積，ALB能直接反映機(jī)體營養(yǎng)狀態(tài)的高低，GLOB可參與機(jī)體的免疫活動。鐘港等[27]發(fā)現(xiàn)高能飼糧(16.42 MJ/kg)組湘南黃牛的血清TP水平高于低能組(14.93 MJ/kg)，但低能組的ALB水平要優(yōu)于高能組。田春麗[28]發(fā)現(xiàn)灘羊(22.0～25.0kg)的血清ALB和GLOB在不同飼糧能量水平下(7.45～11.32 MJ/kg)無顯著影響。本試驗結(jié)果為血清TP水平隨著能量水平的升高而顯著升高，HE組的血清TP水平顯著高于CON組和LE組。這表明高能飼糧可提高機(jī)體的蛋白質(zhì)代謝，可能是因為高能飼糧為瘤胃微生物提供豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)微生物的繁殖和生長，進(jìn)而產(chǎn)生更多的菌體蛋白，最終促進(jìn)機(jī)體的蛋白質(zhì)代謝。而各組的血清ALB和GLOB含量無顯著差異，這與田春麗的研究結(jié)果一致。本試驗結(jié)果提示，適當(dāng)提高飼糧能量水平可提高機(jī)體的蛋白質(zhì)利用率。

血清BUN含量反映動物機(jī)體的氮代謝情況，與蛋白合成率和氨基酸平衡呈負(fù)相關(guān)[29]。呂小康等[2]指出，提高能量水平可顯著降低4月齡湖羊羔羊的血清BUN含量，這與本試驗結(jié)果相似。在本試驗中，血清BUN水平與能量呈負(fù)相關(guān)，隨著能量水平的升高而下降，當(dāng)能量水平提高到12.31 MJ/kg 時，可促進(jìn)機(jī)體的氮沉積和氨基酸利用效率。

GH的主要作用是促進(jìn)脂肪分解與蛋白質(zhì)合成，進(jìn)而控制動物的生長和營養(yǎng)物質(zhì)代謝。崔原年等[30]發(fā)現(xiàn)，高營養(yǎng)水平可降低反芻動物的GH濃度，而限飼時血漿GH濃度顯著高于自由采食的。在本研究中，HE組血清GH水平分別較CON組和LE組下降了24.86%和18.30%，與前人研究一致。因此提高飼糧能量水平會促進(jìn)羔羊的脂代謝和蛋白質(zhì)代謝。

3.3 飼糧能量水平對脂肪組織中脂肪代謝相關(guān)基因表達(dá)的影響

體脂沉積與動物自身的營養(yǎng)代謝密切相關(guān)，不僅可以緩解因能量過度攝入而造成的器官損傷，在必要時還可以作為機(jī)體的主要能量來源。脂肪組織的生長發(fā)育主要通過細(xì)胞的增殖與分化，并由多種脂肪代謝基因共同調(diào)控，其中包括FASN、ACC、PPARγ、FABP4和HSL等基因。大量研究表明，飼糧能量水平與體脂沉積有一定相關(guān)性。高良霜[31]發(fā)現(xiàn)，高能飼糧(0.75 MJ/W0.75×d-1)顯著促進(jìn)阿勒泰羊皮下脂和尾脂中基因ACC和PPARγ的表達(dá)。劉培峰等[32]發(fā)現(xiàn)，隨著能量水平(NE：9.84～10.67 MJ/kg)的增加，38.00 kg丹系三元豬的背膘厚度呈線性增加。

Liu等[3]發(fā)現(xiàn)，4月齡灘羊的皮下脂肪和尾脂中FASN隨著能量水平的升高而顯著升高，而HSL表達(dá)量則顯著下降。Zhang等[33]在雜交牛皮下脂肪中發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)ASN、ACC、PPARγ隨著能量水平的增加而顯著升高，而HSL的表達(dá)量則顯著下降。在本試驗中，低飼糧營養(yǎng)水平對脂肪組織中ACC和FABP4mRNA表達(dá)影響相同，表達(dá)量均降低，與前人研究一致。但HE組基因FABP4的表達(dá)有降低趨勢，可能是因為飼糧營養(yǎng)水平對其的影響已達(dá)到閾值，再提高能量水平，反而會降低其基因的表達(dá)；能量水平對皮下脂和尾脂中PPARγ表達(dá)的影響差異不顯著，但隨著營養(yǎng)水平的升高而呈升高趨勢。在本試驗中，飼糧能量對脂肪組織中基因PPARγ和FABP4表達(dá)的影響趨勢相同，這與王小芳[34]提出的飼糧營養(yǎng)對FABP4基因的調(diào)控可能由PPARγ來實現(xiàn)的觀點一致。飼糧能量對皮下脂和尾脂中FASN基因表達(dá)的影響不同，在尾脂中顯著升高，而在皮下脂肪中無顯著影響，可能是因為羔羊皮下脂和尾脂沉積存在空間上的差異。

而營養(yǎng)水平對皮下脂和尾脂中HSL的表達(dá)影響相反，在皮下脂中顯著提高，但在尾脂中則顯著下降。這與Zhang等[33]和Liu等[3]的研究結(jié)果不同，分析其原因可能有二：一是本試驗采樣時羔羊皮下脂可能已經(jīng)沉積完全， FASN是脂肪從頭合成的關(guān)鍵酶，當(dāng)皮下脂的脂肪酸從頭合成已經(jīng)達(dá)到飽和時，過多的能量對皮下脂而言成為負(fù)擔(dān)，因此脂解基因HSL的表達(dá)顯著升高用于維持皮下脂中的正常代謝；二是因為高能量飼糧的攝入先引起機(jī)體血液中的TC和TG含量的顯著升高，進(jìn)而促使機(jī)體合成與分泌大量的LDL和HDL，用于轉(zhuǎn)運TC和TG到肝臟和脂肪組織中進(jìn)行降解，以維持自身的健康穩(wěn)態(tài)和營養(yǎng)代謝平衡。皮下脂肪是最先沉積的[35]，因此很大可能是將過多的TC和TG轉(zhuǎn)運到皮下脂肪中進(jìn)行降解，最終促進(jìn)皮下脂肪中HSL基因的表達(dá)。本試驗表明，提高飼糧能量水平可促進(jìn)薩湖F1代羔羊育肥期的皮下脂肪和尾脂的沉積。

3.4 飼糧能量水平對背最長肌中脂肪代謝基因表達(dá)的影響

肌內(nèi)脂肪的沉積可以改善羊肉的品質(zhì)和風(fēng)味特征，提高肌內(nèi)脂的沉積也是高檔羊肉生產(chǎn)過程中的關(guān)鍵技術(shù)難點和突破點。Zhang等[36]報道稱，西門塔爾牛×黃種牛肌肉中的FASN和FABP4的表達(dá)隨著能量的升高而顯著升高。Kang等[37]也發(fā)現(xiàn)基因FASN表達(dá)隨能量的升高而顯著增加。這與本試驗的結(jié)果一致，F(xiàn)ABP4隨著飼糧能量水平的升高而極顯著升高，F(xiàn)ASN隨著能量的升高而先升高后下降，可能是能量水平對其的影響已達(dá)到最大，能量水平的再升高，其表達(dá)水平反而會降低。郝稱莉[38]發(fā)現(xiàn)4月齡后的湖羊PPARγ與IMF含量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.441)。Huang等[39]在雄性薩福克羊上也證明了PPARγ的表達(dá)對IMF含量有負(fù)面作用。這與前人的結(jié)果一致，可能是因為PPARγ主要表達(dá)在脂肪組織中，是脂肪胞質(zhì)內(nèi)特定性轉(zhuǎn)錄因子[38]。而肌內(nèi)脂肪是最后沉積的，故PPARγ在肌肉組織中其表達(dá)水平較低，且飼糧營養(yǎng)水平對其的影響與肌內(nèi)脂肪沉積呈負(fù)相關(guān)。

在本試驗中，LE組的ACC表達(dá)水平最高，這與Zhang等[36]的研究結(jié)果不同。有研究發(fā)現(xiàn)，ACC有兩種亞型(ACC1和ACC2)，ACC1主要存在于肝臟和脂肪組織中，促進(jìn)脂肪酸的合成，ACC2主要存在于骨骼肌和心肌中，促進(jìn)脂解供能[40]。在本試驗中，LE組ACC表達(dá)水平較高，可能是因為LE組的飼糧能量供給難以滿足動物自身的生長需要，總體表現(xiàn)為脂解功能，進(jìn)而維持機(jī)體的正常發(fā)育。Kim等[41]研究表明，隨著飼糧能量的升高，HSL表達(dá)顯著降低。Zhang等[36]研究發(fā)現(xiàn)，西門塔爾牛×黃種牛的背肌中HSL的表達(dá)隨著能量水平的升高而顯著下降。這與本試驗的研究結(jié)果一致，脂解基因HSL的表達(dá)隨著能量攝入的增加而顯著降低，說明飼糧營養(yǎng)水平通過下調(diào)脂解基因HSL的表達(dá)促進(jìn)背最長肌中的脂肪沉積。

4 結(jié) 論

在本研究中，綜合生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)和脂肪沉積相關(guān)基因的表達(dá)，飼糧能量水平為12.31 MJ/kg時更適用于白薩福克×湖羊F1肥育期羔羊的生長發(fā)育和體脂沉積。